一种光敏感可降解阳性质粒、构建方法及应用技术

本发明专利技术涉及质粒构建技术领域，具体涉及一种光敏感可降解阳性质粒、构建方法及应用。本发明专利技术构建了含有与待测核酸样品特征碱基序列能够互补的目的基因，并将该目的基因搭载到质粒中，从而得到阳性质粒，该阳性质粒能够作为核酸检测的阳性质控品，有效保证核酸检测的准确性；并在该目的基因中标记有光敏基团，该光敏基团在紫外光的照射下能够快速的分解失活，并能够使阳性质粒断裂为小的核酸碎片，从而有效的避免了阳性质粒的气溶胶污染，对保证PCR实验室的稳定运行以及保证核酸检测结果的准确性，都有着重要的意义。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及质粒构建，具体涉及一种光敏感可降解阳性质粒、构建方法及应用。

技术介绍

1、质粒是细菌、酵母菌和放线菌等生物中染色体(或拟核)以外的dna分子，存在于细胞质中，具有自主复制能力，使其在子代细胞中也能保持恒定的拷贝数，并表达所携带的遗传信息；质粒是闭合环状的双链dna分子，它是基因工程最常见的运载体，在pcr(多聚酶链式反应)核酸检测技术中可作为扩增模板。

2、pcr核酸检测技术以其高敏感性、高特异性的特点广泛应用于分子检测领域，为了保证检测的准确性，在检测时需要进行质控，其中包括阳性质控品与阴性质控品；当阳性质控品检测出阳性结果、阴性质控品检测出阴性结果时，说明检测过程是规范的，临床样品的检测结果才是准确、可信的；如果阳性质控品未检出阳性结果，便可及时提示“假阴性”发生的风险。

3、现有的采用阳性质粒作为阳性质控品，由此也容易导致阳性质粒污染的发生，环状质粒本身稳定性较好，且阳性质粒在单位容积内浓度高容易形成气溶胶污，据计算一个气溶胶颗粒中含有上万拷贝的质粒，形成的气溶胶颗粒可以随空气流动、可静电吸附在实验人员身体上随本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种光敏感可降解阳性质粒，在质粒载体中搭载有目的基因，其特征在于：所述的目的基因中包含待测核酸样品的阳性碱基序列，在目的基因中每隔一定的距离标记有光敏基团，光敏基团在紫外光的照射下快速分解失活并使质粒断裂为小的核酸片段。

2.根据权利要求1所述一种光敏感可降解阳性质粒，其特征在于：所述的质粒包括但不限于pUC-57、pUC-SP、pBluescript II KS(+)、pBluescript II SK(-)。

3.根据权利要求1所述一种光敏感可降解阳性质粒，其特征在于：所述的光敏基团的种类包括但不限于硝基苯类、香豆素类、苯甲酰类、吲哚类以及喹啉类。

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【技术特征摘要】

1.一种光敏感可降解阳性质粒，在质粒载体中搭载有目的基因，其特征在于：所述的目的基因中包含待测核酸样品的阳性碱基序列，在目的基因中每隔一定的距离标记有光敏基团，光敏基团在紫外光的照射下快速分解失活并使质粒断裂为小的核酸片段。

2.根据权利要求1所述一种光敏感可降解阳性质粒，其特征在于：所述的质粒包括但不限于puc-57、puc-sp、pbluescript ii ks(+)、pbluescript ii sk(-)。

3.根据权利要求1所述一种光敏感可降解阳性质粒，其特征在于：所述的光敏基团的种类包括但不限于硝基苯类、香豆素类、苯甲酰类、吲哚类以及喹啉类。

4.根据权利要求3所述一种光敏感可降解阳性质粒，其特征在于：所述的光敏基团包括但不限于邻硝基苄基、4-氨基苯甲酰基、4-氨基-3-硝基苯甲酰基、4-氨基-5-硝基苯甲酰基、8-硝基腺嘌呤、8-硝基腺嘌呤-5'-二磷酸、4-硝基苯甲酰基、4-硝基-3-氨基苯甲酰基、4,5-二甲氧基-2-硝基苄基、1-(2-硝基苯基)丙基、1(-2-硝基苯基)乙基、7-甲氧基香豆素-4-甲基、4-甲基香豆素及其碳酸盐以及蒽醌-2-甲氧基羰基。

5.根据权利要求1～4任意一项所述的一种光敏感可降解...

【专利技术属性】
技术研发人员：娄亚坤，杨楠，于恩琪，翟少伦，
申请(专利权)人：郑州纳克智造生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：