【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于化学生物学，涉及生物体系分子探针，具体涉及一种荧光/光声探针及其在乙酰胆碱酯酶检测中的应用。
技术介绍
1、公开该
技术介绍
部分的信息仅仅旨在增加对本专利技术的总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。
2、乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase,ache)主要存在于神经和肌肉中，其主要的功能是水解神经递质乙酰胆碱，从而终止突触之间的神经元传递和信号传导。然而ache失活导致的乙酰胆碱的异常聚集会促使淀粉样蛋白β肽组装成淀粉样蛋白原纤维，从而引发阿尔茨海默氏病；此外ache的活性异常还与帕金森病、癌症、抑郁症密切相关。因此，可用于活细胞及动物中ache实时检测化学探针的开发对于疾病的早期诊断和相关药物开发具有重要的意义。
3、传统的分析技术，如ellman比色法(ellman’s colorimetric assay)、胆碱氧化酶偶联多酶测定法(choline oxidase-coupled multi-enzyme assay)等方法为通过检测酶反应后的硫代胆碱或双氧水等中间体的间接法。相比之下，基于ache酶反应的荧光探针具有生物兼容性、高灵敏、易操作、和直接检测等优点而收到极大的关注。但是，这些探针主要利用的是荧光单通道信号，荧光发射波长低于600nm。而可见光区荧光的组织穿透性往往较低(低于1mm)，这极大的限制了探针在动物组织深层次的应用。
技术实现思路
1、
2、为了实现上述目的，本专利技术的技术方案为：
3、一方面，一种荧光/光声探针，其化学结构式如式i所示；
4、
5、其中，r为h、c1～c3的烷基或-(ch2)nso3-，n为0～3，x为h或卤素。
6、另一方面，一种荧光/光声探针的制备方法，包括：
7、以化合物7和化合物8为原料按照如下反应路线获得探针1的过程；
8、
9、或者，以化合物7和化合物9为原料按照如下反应路线获得探针2的过程；
10、
11、以化合物11和化合物9为原料按照如下反应路线获得探针3的过程；
12、
13、第三方面，一种组合物，包括上述荧光/光声探针以及辅料。
14、第四方面，一种上述荧光/光声探针或组合物在乙酰胆碱酯酶检测、荧光检测、细胞荧光成像、组织荧光成像、小鼠脑荧光成像和/或小鼠脑光声成像中的应用。
15、第五方面，一种上述荧光/光声探针或组合物在制备乙酰胆碱酯酶检测试剂、细胞荧光成像试剂、组织荧光成像试剂、小鼠脑荧光成像试剂和/或小鼠脑光声成像试剂中的应用。
16、第六方面，一种检测乙酰胆碱酯酶的试剂盒，包括上述荧光/光声探针或组合物，以及溶剂。
17、本专利技术的有益效果为：
18、(1)本专利技术的荧光/光声探针合成方法简单，可灵敏检测ache。
19、(2)本专利技术提供的荧光/光声探针通过荧光光谱检测实现了ache的定量检测，且不受其他胆碱酯酶的干扰。
20、(3)本专利技术提供的荧光/光声探针兼具荧光成像灵敏性和光声成像组织穿透能力强的优点。
21、(4)本专利技术提供的荧光/光声探针具有生物低毒性，能实现生物细胞内和小鼠脑内ache的实时成像检测。
22、(5)本专利技术提供的荧光/光声探针能实现小鼠脑内ache的实时光声成像检测。
23、因此，本专利技术是一种快速、灵敏、便捷的ache检测试剂，在生物细胞和动物脑中ache的检测具有广阔的应用前景。
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1.一种荧光/光声探针，其特征是，化学结构式如式I所示；
2.如权利要求1所述的荧光/光声探针，其特征是，所述卤素为氯；
3.如权利要求1所述的荧光/光声探针，其特征是，所述探针选自以下化合物：
4.一种荧光/光声探针的制备方法，其特征是，包括：
5.如权利要求4所述的荧光/光声探针的制备方法，其特征是，在惰性气氛下，将化合物4与碳酸钾加入至乙腈中，混合均匀，然后加入二甲氨基甲酰氯进行反应，即得探针1；或，化合物4和二甲氨基甲酰氯的摩尔比为1：(1～10)；或，化合物4和碳酸钾的摩尔比为1：(1～3)；或，反应完全后，减压蒸发溶剂，通过硅胶柱色谱法纯化；或，硅胶柱色谱法纯化洗脱剂配比为甲醇：二氯甲烷＝1：(10～100)；
6.一种组合物，其特征是，包括权利要求1～3任一所述的荧光/光声探针以及辅料。
7.一种权利要求1～3任一所述的荧光/光声探针或权利要求6所述的组合物在乙酰胆碱酯酶检测、荧光检测、细胞荧光成像、组织荧光成像、小鼠脑荧光成像和/或小鼠脑光声成像中的应用。
8.一种权利要求1～3任
9.一种检测乙酰胆碱酯酶的试剂盒，其特征是，包括权利要求1～3任一所述的荧光/光声探针或权利要求6所述的组合物，以及溶剂。
10.如权利要求9所述的检测乙酰胆碱酯酶的试剂盒，其特征是，所述溶剂包括DMSO和/或生理盐水。
...【技术特征摘要】
1.一种荧光/光声探针，其特征是，化学结构式如式i所示；
2.如权利要求1所述的荧光/光声探针，其特征是，所述卤素为氯；
3.如权利要求1所述的荧光/光声探针，其特征是，所述探针选自以下化合物：
4.一种荧光/光声探针的制备方法，其特征是，包括：
5.如权利要求4所述的荧光/光声探针的制备方法，其特征是，在惰性气氛下，将化合物4与碳酸钾加入至乙腈中，混合均匀，然后加入二甲氨基甲酰氯进行反应，即得探针1；或，化合物4和二甲氨基甲酰氯的摩尔比为1：(1～10)；或，化合物4和碳酸钾的摩尔比为1：(1～3)；或，反应完全后，减压蒸发溶剂，通过硅胶柱色谱法纯化；或，硅胶柱色谱法纯化洗脱剂配比为甲醇：二氯甲烷＝1：(10～100)；
6.一种组...
【专利技术属性】
技术研发人员：谢玉生，王妙妙，李龙辉，王昊，徐广宇，向靖，
申请(专利权)人：山东大学，
类型：发明
国别省市：
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