【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及微生物基因工程，具体涉及一种提高类球红细菌发酵生产辅酶q10产量的方法。
技术介绍
1、辅酶q10广泛存在于生物体内，是天然的抗氧化剂和能量代谢活跃组织的必需成分，具有清除自由基、保护线粒体、增加免疫等重要作用，目前被普遍用于医药、保健品和化妆品等多个行业。目前，辅酶q10的合成方法主要包括化学合成法、动植物组织提取法和微生物发酵法。类球红细菌rb.sphaeroides含有较为丰富的辅酶q10，是生产辅酶q10的重要菌株之一。
2、类球红细菌含有辅酶q10代谢合成途径，在低氧发酵条件下，辅酶q10合成相关基因的表达量最大，提高了类球红细菌辅酶q10的生物合成量。虽然低氧发酵条件下，类球红细菌辅酶q10的合成会提高，但野生型类球红细菌辅酶q10的合成量较低。
技术实现思路
1、针对上述问题，本专利技术提供一种提高类球红细菌发酵生产辅酶q10产量的方法。
2、一种提高类球红细菌发酵生产辅酶q10产量的方法，包括如下步骤：
3、步骤1：以类球红细菌基因组dna为模板进行dxsa基因的pcr扩增；
4、步骤2：将pcr扩增的dxsa基因克隆到表达载体prkpuf，得到过量表达载体prkpuf-dxsa；
5、步骤3：将表达载体prkpuf-dxsa接合转移至类红球细菌中得到基因工程菌rb.sphaeroides/dxsa；
6、步骤4：利用基因工程菌rb.sphaeroides/dxsa诱导表达辅酶q1
7、进一步的，所述步骤1，扩增条件为98℃变性10s，64.5℃退火5s，72℃延伸2min，30个循环。
8、进一步的，所述步骤1，dxsa基因的pcr扩增后需要过柱纯化利用kpni和ecori双酶切，凝胶回收双酶切的dxsa片段。
9、本专利技术的有益效果是：
10、rb.sphaeroides/dxsa基因工程菌诱导表后，rb.sphaeroides/dxsa发酵生产辅酶q10产量为43.77mg/l，与原始类球红细菌中辅酶q10的产量27.46mg/l相比，提高了59.43％。
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1.一种提高类球红细菌发酵生产辅酶Q10产量的方法，其特征在于，包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述一种提高类球红细菌发酵生产辅酶Q10产量的方法，其特征在于，所述步骤1，扩增条件为98℃变性10s，64.5℃退火5s，72℃延伸2min，30个循环。
3.根据权利要求1所述一种提高类球红细菌发酵生产辅酶Q10产量的方法，其特征在于，所述步骤1，dxsA基因的PCR扩增后需要过柱纯化利用KpnI和EcoRI双酶切，凝胶回收双酶切的dxsA片段。
【技术特征摘要】
1.一种提高类球红细菌发酵生产辅酶q10产量的方法，其特征在于，包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述一种提高类球红细菌发酵生产辅酶q10产量的方法，其特征在于，所述步骤1，扩增条件为98℃变性10s，64.5℃退火5s，72...
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