一种白前毛状根遗传转化方法及其应用技术

本发明专利技术提供了一种白前毛状根遗传转化方法及其应用。具体的，本发明专利技术中将白前外植体置于含发根农杆菌的侵染液中，经过超声、振荡培养，促使白前产生大量毛状根，实现快速扩繁；并且利用发根农杆菌的Ri质粒将外源基因转入到白前基因组中，实现外源基因导入，进而实现在白前中表达目的产物，如次生代谢物生物碱，还可以借助发根作为一种生物反应器，实现目的产物的大量、快速生产。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于植物遗传转化领域，尤其涉及一种白前毛状根遗传转化方法及其应用。

技术介绍

1、本部分的陈述仅仅是提供了与本专利技术相关的
技术介绍
信息，不必然构成在先技术。

2、柳叶白前cynanchum stauntonii(decne.)schltr.exlevl.属于萝藦科药用植物。主要分布于产于甘肃、安徽、江苏、浙江、湖南、江西、福建、广东、广西和贵州等省区。生长于低海拔的山谷湿地、水旁或水中。全株供药用，有清热解毒，降气下痰之效；民间用其根治肺病、小儿疳积、感冒咳嗽及慢性支气管炎等。目前常用药用部位为白前晒干的根部，与人参等药材类试根部含有丰富的皂苷成分。理论上，利用基因工程、代谢工程及合成生物学手段对柳叶白前皂苷生物合成途径加以改造，不仅可以提高柳叶白前皂苷合成效率，而且能够节约生产成本。但目前受限于遗传转化技术的发展，采用基因工程等手段对柳叶白前的改造并不顺利。

3、毛状根转化体系的建立是借助一种根瘤菌科农杆菌属的革兰氏阴性菌——发根农杆菌(agrobacterium rhizogenes)来实现的。发根农杆菌侵染植物时，本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种白前毛状根遗传转化方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.如权利要求1所述的一种白前毛状根遗传转化方法，其特征在于，所述外植体由幼嫩茎段、不定芽、叶、叶柄或下胚轴产生；

3.如权利要求1所述的一种白前毛状根遗传转化方法，其特征在于，所述白前包括柳叶白前或芫花叶白前。

4.如权利要求1所述的一种白前毛状根遗传转化方法，其特征在于，所述发根农杆菌包括K599、C58C1、MSU440、Ar.A4或ATCC 15834；

5.如权利要求4所述的一种白前毛状根遗传转化方法，其特征在于，所述侵染液中农杆菌OD600＝0.4-0.8。

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【技术特征摘要】

1.一种白前毛状根遗传转化方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.如权利要求1所述的一种白前毛状根遗传转化方法，其特征在于，所述外植体由幼嫩茎段、不定芽、叶、叶柄或下胚轴产生；

3.如权利要求1所述的一种白前毛状根遗传转化方法，其特征在于，所述白前包括柳叶白前或芫花叶白前。

4.如权利要求1所述的一种白前毛状根遗传转化方法，其特征在于，所述发根农杆菌包括k599、c58c1、msu440、ar.a4或atcc 15834；

5.如权利要求4所述的一种白前毛状根遗传转化方法，其特征在于，所述侵染液中农杆菌od600＝0.4-0.8。

6.如权利要求4所述的一种白前毛状根遗传转化方法，其特征在于...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘大会，张婧怡，苗玉焕，刘方杰，
申请(专利权)人：湖北中医药大学，
类型：发明
国别省市：

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