【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于多肽提取，尤其涉及一种啤酒酵母多肽提取工艺建立方法及啤酒酵母多肽提取工艺。
技术介绍
1、啤酒素有“液体面包”之称，是一种采用纯种酵母发酵，添加了啤酒花的大麦麦芽而产生的低酒精度饮料，在啤酒的生产过程中，酵母是必不可少的添加物之一，我国作为啤酒的生产大国，废啤酒酵母泥是每个生产工厂在啤酒的生产完成后都会有的副产品，会产生大量的废弃物，所以开发利用啤酒酵母蛋白资源变得尤为重要。
2、酵母多肽是以啤酒酵母为原料，利用多种酶降解酵母蛋白得到的。啤酒酵母多肽大多都是直接将酿酒酵母水解后直接利用，而利用酶解制备啤酒酵母多肽的研究并不多，导致对酿酒酵母肽的高效利用缺乏必要的理论基础。
技术实现思路
1、针对现有技术存在的不足之处，本专利技术所要解决的技术问题是克服现有利用酶解制备啤酒酵母多肽的研究并不多，导致对酿酒酵母肽的高效利用缺乏必要的理论基础的问题，提出一种具有提取时间短、多肽提取率高的啤酒酵母多肽提取工艺建立方法及啤酒酵母多肽提取工艺。
2、为解决所述技术问题，本专利技术采用的技术方案为：
3、本专利技术一方面提供一种啤酒酵母多肽提取工艺建立方法，包括：
4、s1：通过预实验得到影响啤酒酵母多肽提取含量的因素包括ph、温度以及加酶量；
5、s2：通过单因素多水平实验，筛选出所述ph、温度以及加酶量的参数范围；
6、s3：根据所述s2的单因素多水平实验筛选出的各参数范围，对所述ph、温度以及加酶量每三个
7、s4：对所述s3中得到的实验数据进行多元线性回归和二项拟合并建立回归方程，得到以多肽提取率为响应值的响应曲面图，通过所述响应曲面图得到啤酒酵母多肽提取工艺的最佳提取工艺；
8、所述s4中得到的所述回归方程为：
9、y＝62.02+0.4375x1+1.05x2+0.395x3–0.715x1x2+0.09x1x3–0.37x2x3–2.52
10、x12–5.43x22–3.87x32
11、y为多肽提取率；x1为ph；x2为温度，单位为℃；x3为加酶量，单位为％。
12、优选的，所述s2的单因素多水平实验包括：研究温度对啤酒酵母提取多肽的影响步骤、研究ph值对啤酒酵母提取多肽的影响步骤、以及研究加酶量对啤酒酵母提取多肽的影响步骤。
13、优选的，所述研究温度对啤酒酵母提取多肽的影响步骤包括：取啤酒酿造富余酵母冷冻得到的酵母粉，加入去离子水，配制成12％的悬浮液，调节ph至8.5，在功率为300w下超声处理，超声处理完毕的样品在8000r/min下离心，取上清液，即得到酵母蛋白混合液，分成15份共3个平行组，调节ph至8.0，加入1.5％的蛋白酶，分别在30℃、35℃、40℃、45℃、50℃下酶解，水解完毕后沸水浴灭酶，冷却至室温后加入等体积10％的三氯乙酸溶液，使大分子蛋白质沉淀，使用涡旋混合器使之充分混匀后静置，充分混合后的样品在10000r/min下离心，取上清液测定可溶性氮的含量，即是多肽的含量。
14、优选的，所述研究ph值对啤酒酵母提取多肽的影响步骤包括：取啤酒酿造富余酵母冷冻得到的酵母粉，加入去离子水，配制成12％的悬浮液，调节ph至8.5，在功率为300w下超声处理，超声处理完毕的样品在8000r/min下离心，取上清液，得到酵母蛋白混合液，分成15份共3个平行组，分别调节ph至7、7.5、8.0、8.5、9，加入1.5％的蛋白酶，分别在40℃下酶解，水解完毕后沸水浴灭酶，冷却至室温后加入等体积10％的三氯乙酸溶液，使大分子蛋白质沉淀，使用涡旋混合器使之充分混匀后静置，充分混合后的样品在10000r/min下离心，取上清液测定可溶性氮的含量，即是多肽的含量。
15、优选的，所述研究加酶量对啤酒酵母提取多肽的影响步骤包括：取啤酒酿造富余酵母冷冻得到的酵母粉，加入去离子水，配制成12％的悬浮液，调节ph至8.5，在功率为300w下超声处理，10000r/min下对样品离心，取上清液，即得到酵母蛋白混合液，分成15份共3个平行组，调节ph至8.0，分别加入0.5％、1.0％、1.5％、2.0％、2.5％的蛋白酶，分别在40℃下酶解，水解完毕后沸水浴灭酶，冷却至室温后加入等体积10％的三氯乙酸溶液，使大分子蛋白质沉淀，使用涡旋混合器使之充分混匀后静置，充分混合后的样品在10000r/min下离心，取上清液测定可溶性氮的含量，即是多肽的含量。
16、优选的，所述预实验包括：取啤酒酿造富余酵母冷冻得到的酵母粉，加入去离子水，配成悬浮液，调节ph至8.5，在功率为300w下超声处理提取酵母蛋白质，超声处理完毕的样品离心，取上清液，得到酵母蛋白混合液；采用胰蛋白酶、碱性蛋白酶、以及木瓜蛋白酶对所述酵母蛋白混合液进行酶解处理，并检测不同处理条件下酶解处理后的样品中的可溶性氮的含量，确定影响啤酒酵母多肽提取含量的因素。
17、优选的，采用自动凯式定氮仪检测所述检测不同处理条件下酶解处理后的样品中的可溶性氮的含量，在自动凯式定氮仪测定完成后记录样品中粗蛋白的含量。
18、本专利技术另一方面提供上述任一技术方案所述的啤酒酵母多肽提取工艺建立方法建立得到的啤酒酵母多肽提取工艺。
19、优选的，以啤酒酵母泥作为原料，采用超声波辅助提取酵母多肽。
20、优选的，通过所述响应曲面图得到啤酒酵母多肽提取工艺的最佳提取工艺为：ph为7.5，温度为40℃，加酶量为1％。
21、与现有技术相比，本专利技术的有益效果在于：
22、本专利技术提供一种啤酒酵母多肽提取工艺建立方法，采用响应面法优化啤酒酵母蛋白酶解工艺，通过超声波辅助测定其酵母多肽溶液的氮含量来获取最佳提取工艺，通过优化酶解啤酒酵母蛋白超声破碎法的操作工艺来提高酵母多肽提取率，建立二次多项式回归模型，并对多肽提取工艺进行响应面优化，多肽提取率达到了62.88％。
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1.一种啤酒酵母多肽提取工艺建立方法，其特征在于，包括：
2.根据权利要求1所述的啤酒酵母多肽提取工艺建立方法，其特征在于，所述S2的单因素多水平实验包括：研究温度对啤酒酵母提取多肽的影响步骤、研究pH值对啤酒酵母提取多肽的影响步骤、以及研究加酶量对啤酒酵母提取多肽的影响步骤。
3.根据权利要求2所述的啤酒酵母多肽提取工艺建立方法，其特征在于，所述研究温度对啤酒酵母提取多肽的影响步骤包括：取啤酒酿造富余酵母冷冻得到的酵母粉，加入去离子水，配制成12％的悬浮液，调节pH至8.5，在功率为300W下超声处理，超声处理完毕的样品在8000r/min下离心，取上清液，即得到酵母蛋白混合液，分成15份共3个平行组，调节pH至8.0，加入1.5％的蛋白酶，分别在30℃、35℃、40℃、45℃、50℃下酶解，水解完毕后沸水浴灭酶，冷却至室温后加入等体积10％的三氯乙酸溶液，使大分子蛋白质沉淀，使用涡旋混合器使之充分混匀后静置，充分混合后的样品在10000r/min下离心，取上清液测定可溶性氮的含量，即是多肽的含量。
4.根据权利要求2所述的啤酒酵母多肽提取工
5.根据权利要求2所述的啤酒酵母多肽提取工艺建立方法，其特征在于，所述研究加酶量对啤酒酵母提取多肽的影响步骤包括：取啤酒酿造富余酵母冷冻得到的酵母粉，加入去离子水，配制成12％的悬浮液，调节pH至8.5，在功率为300W下超声处理，10000r/min下对样品离心，取上清液，即得到酵母蛋白混合液，分成15份共3个平行组，调节pH至8.0，分别加入0.5％、1.0％、1.5％、2.0％、2.5％的蛋白酶，分别在40℃下酶解，水解完毕后沸水浴灭酶，冷却至室温后加入等体积10％的三氯乙酸溶液，使大分子蛋白质沉淀，使用涡旋混合器使之充分混匀后静置，充分混合后的样品在10000r/min下离心，取上清液测定可溶性氮的含量，即是多肽的含量。
6.根据权利要求1所述的啤酒酵母多肽提取工艺建立方法，其特征在于，所述预实验包括：取啤酒酿造富余酵母冷冻得到的酵母粉，加入去离子水，配成悬浮液，调节pH至8.5，在功率为300W下超声处理提取酵母蛋白质，超声处理完毕的样品离心，取上清液，得到酵母蛋白混合液；采用胰蛋白酶、碱性蛋白酶、以及木瓜蛋白酶对所述酵母蛋白混合液进行酶解处理，并检测不同处理条件下酶解处理后的样品中的可溶性氮的含量，确定影响啤酒酵母多肽提取率的因素。
7.根据权利要求1所述的啤酒酵母多肽提取工艺建立方法，其特征在于，采用自动凯式定氮仪检测所述检测不同处理条件下酶解处理后的样品中的可溶性氮的含量，在自动凯式定氮仪测定完成后记录样品中蛋白的含量。
8.根据权利要求1-7任一项所述的啤酒酵母多肽提取工艺建立方法建立得到的啤酒酵母多肽提取工艺。
9.根据权利要求8所述的啤酒酵母多肽提取工艺，其特征在于，以啤酒酵母泥作为原料，采用超声波辅助提取酵母多肽。
10.根据权利要求8所述的啤酒酵母多肽提取工艺，其特征在于，通过所述响应曲面图得到啤酒酵母多肽提取工艺的最佳提取工艺为：pH为7.5，温度为40℃，加酶量为1％。
...【技术特征摘要】
1.一种啤酒酵母多肽提取工艺建立方法，其特征在于，包括：
2.根据权利要求1所述的啤酒酵母多肽提取工艺建立方法，其特征在于，所述s2的单因素多水平实验包括：研究温度对啤酒酵母提取多肽的影响步骤、研究ph值对啤酒酵母提取多肽的影响步骤、以及研究加酶量对啤酒酵母提取多肽的影响步骤。
3.根据权利要求2所述的啤酒酵母多肽提取工艺建立方法，其特征在于，所述研究温度对啤酒酵母提取多肽的影响步骤包括：取啤酒酿造富余酵母冷冻得到的酵母粉，加入去离子水，配制成12％的悬浮液，调节ph至8.5，在功率为300w下超声处理，超声处理完毕的样品在8000r/min下离心，取上清液，即得到酵母蛋白混合液，分成15份共3个平行组，调节ph至8.0，加入1.5％的蛋白酶，分别在30℃、35℃、40℃、45℃、50℃下酶解，水解完毕后沸水浴灭酶，冷却至室温后加入等体积10％的三氯乙酸溶液，使大分子蛋白质沉淀，使用涡旋混合器使之充分混匀后静置，充分混合后的样品在10000r/min下离心，取上清液测定可溶性氮的含量，即是多肽的含量。
4.根据权利要求2所述的啤酒酵母多肽提取工艺建立方法，其特征在于，所述研究ph值对啤酒酵母提取多肽的影响步骤包括：取啤酒酿造富余酵母冷冻得到的酵母粉，加入去离子水，配制成12％的悬浮液，调节ph至8.5，在功率为300w下超声处理，超声处理完毕的样品在8000r/min下离心，取上清液，得到酵母蛋白混合液，分成15份共3个平行组，分别调节ph至7、7.5、8.0、8.5、9，加入1.5％的蛋白酶，分别在40℃下酶解，水解完毕后沸水浴灭酶，冷却至室温后加入等体积10％的三氯乙酸溶液，使大分子蛋白质沉淀，使用涡旋混合器使之充分混匀后静置，充分混合后的样品在10000r/min下离心，取上清液测定可溶性氮的含量，即是多肽的含量。
5.根据权利要求2所述的啤酒酵母多肽提取工艺建...
【专利技术属性】
技术研发人员：王剑锋，尹花，杨朝霞，邵淑萍，余俊红，邢磊，李梅，闫鹏，张宇昕，何毅，
申请(专利权)人：青岛啤酒股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
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