【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于基因工程，具体涉及过表达氧化还原酶基因ptprx5在提高普通小球藻在外源刺激素刺激下高效产硒过程中的抗氧化能力的应用。
技术介绍
1、硒(selenium，se)为一种非金属微量元素，对人体健康至关重要，是癌症的重要化学预防剂之一。微藻作为生物载体，是具有高生物利用度有机硒的潜在生产者，能够作为饲料提高动物机体的硒含量，作为肥料使作物富集硒，降低人体摄取硒的健康风险。但硒浓度过高会造成藻细胞毒害，细胞裂解死亡。peroxiredoxin(prx)是一类过氧化物还蛋白，通过半胱氨酸残基(cys)巯基的氧化还原消除植物叶绿体中过氧化氢(h2o2)、氢过氧化物(rooh)和过氧亚硝基阴离子(onoo-)。prx的氧化还原过程依赖于硫氧还蛋白(trx)系统，trx在生物体中广泛保守，可接收来自fdx和nadph的信号，利用巯基发生氧化还原反应形成二硫键改变蛋白质构象，硫氧还蛋白-过氧化物还蛋白(trx-prx)途径是植物清除体内h2o2的重要途径之一。trx-prx途径相关基因的过表达可以在一定程度上提高植物抗氧化应激能力。
2、公布号为cn107653255a的中国专利申请文献，公开了一种斑节对虾过氧化物还原酶基因prx5的cdna，它的核酸序列如seq id no.1所示。该专利还公开了包括该cdna的表达载体。以及斑节对虾过氧化物还原酶prx5重组蛋白在制备具有虾类抗细菌功效或具有增强虾类免疫力功效的药物中的应用。但该专利并没有公开氧化还原酶基因ptprx5在提高普通小球藻产硒过程抗氧化能力中的应用。p>
技术实现思路
1、本专利技术所要解决的技术问题在于如何针对普通小球藻外源刺激素刺激下高效产硒过程中发生的氧化应激反应，提供一种过表达ptprx5基因在提高普通小球藻外源刺激素刺激下高效产硒过程中的抗氧化能力的应用。
2、本专利技术通过以下技术手段实现解决上述技术问题的：
3、本专利技术的第一方面提出一种过表达氧化还原酶基因ptprx5在提高普通小球藻产硒过程抗氧化能力中的应用，所述ptprx5的基因序列如seq id no:1所示。
4、优选的，采用电穿孔转化法将ptprx5基因导入普通小球藻基因组。
5、本专利技术的第二方面提出一种转基因小球藻的培育方法，包括以下步骤：采用电穿孔转化法将ptprx5基因导入普通小球藻基因组中，得到转基因小球藻；所述转基因小球藻的抗氧化能力、产硒量均优于普通小球藻；所述ptprx5基因序列如seq id no:1所示。
6、有益效果：本专利技术提供一种过表达氧化还原酶基因ptprx5在提高普通小球藻在外源刺激素刺激下高效产硒过程抗氧化能力中的应用，通过基因工程技术得到ptprx5过表达的普通小球藻，在外源刺激素刺激下高效产硒过程中，可以帮助提高藻细胞的抗氧化系统的酶活，降低膜损伤，以此来应对不良的外界胁迫，提高普通小球藻的自我防护能力以及硒元素的产量。
7、本专利技术的第三方面提出采用上述培育方法所获得的转基因小球藻。
8、本专利技术的第四方面提出采用上述培育方法所获得的转基因小球藻在制备硒元素中的应用。
9、本专利技术的第五方面提出一种生产硒元素的方法，包括以下步骤：将上述转基因小球藻接种到生长培养基中培养，加入终浓度为15μg/l的外源刺激素，加入终浓度为200mg/l亚硒酸钠，继续培养，得到具有高硒含量的藻细胞，提取得到硒元素。
10、优选的，所述生长培养基成分为(mg/l)：nano3：1500，k2hpo4·3h2o：40，mgso4·7h2o：75，cacl2·2h2o：36，柠檬酸铁铵：6，柠檬酸：6，edta：1，na2co3：20，h3bo3：180，mncl2·4h2o：1.8，znso4·7h2o：0.22，cuso4·5h2o：0.0784，namoo4·2h2o：0.0378，cocl2·6h2o：0.05。
11、优选的，所述培养条件为：湿度20％，光照强度为3000lx，培养温度为25±1℃，光暗周期为12:12h。
12、优选的，所述外源刺激素为槲皮素。
13、优选的，所述继续培养的时间大于等于7天。
14、本专利技术的优点在于：
15、本专利技术提供一种过表达氧化还原酶基因ptprx5在提高普通小球藻在外源刺激素刺激下高效产硒过程抗氧化能力中的应用，通过基因工程技术得到ptprx5过表达的普通小球藻，在外源刺激素刺激下高效产硒过程中，可以帮助提高藻细胞的抗氧化系统的酶活，降低膜损伤，以此来应对不良的外界胁迫，提高普通小球藻的自我防护能力以及硒元素的产量。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种过表达氧化还原酶基因PtPrx5在提高普通小球藻产硒过程抗氧化能力中的应用，其特征在于，所述PtPrx5的基因序列如SEQ ID NO:1所示。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，采用电穿孔转化法将PtPrx5基因导入普通小球藻基因组。
3.一种转基因小球藻的培育方法，其特征在于，包括以下步骤：采用电穿孔转化法将PtPrx5基因导入普通小球藻基因组中，得到转基因小球藻；所述转基因小球藻的抗氧化能力、产硒量均优于普通小球藻；所述PtPrx5基因序列如SEQ ID NO:1所示。
4.由权利要求3所述的培育方法得到的转基因小球藻。
5.权利要求4所述的转基因小球藻在制备硒元素中的应用。
6.一种生产硒元素的方法，其特征在于，包括以下步骤：将权利要求3所述的转基因小球藻接种到生长培养基中培养，加入终浓度为15μg/L的外源刺激素，加入终浓度为200mg/L亚硒酸钠，继续培养，得到具有高硒含量的藻细胞，提取得到硒元素。
7.根据权利要求6所述的生产硒元素的方法，其特征在于，所述生长培养基成分为(mg/
8.根据权利要求6所述的生产硒元素的方法，其特征在于，所述培养条件为：湿度20％，光照强度为3000lx，培养温度为25±1℃，光暗周期为12:12h。
9.根据权利要求6所述的生产硒元素的方法，其特征在于，所述外源刺激素为槲皮素。
10.根据权利要求6所述的生产硒元素的方法，其特征在于，所述继续培养的时间大于等于7天。
...【技术特征摘要】
1.一种过表达氧化还原酶基因ptprx5在提高普通小球藻产硒过程抗氧化能力中的应用，其特征在于，所述ptprx5的基因序列如seq id no:1所示。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，采用电穿孔转化法将ptprx5基因导入普通小球藻基因组。
3.一种转基因小球藻的培育方法，其特征在于，包括以下步骤：采用电穿孔转化法将ptprx5基因导入普通小球藻基因组中，得到转基因小球藻；所述转基因小球藻的抗氧化能力、产硒量均优于普通小球藻；所述ptprx5基因序列如seq id no:1所示。
4.由权利要求3所述的培育方法得到的转基因小球藻。
5.权利要求4所述的转基因小球藻在制备硒元素中的应用。
6.一种生产硒元素的方法，其特征在于，包括以下步骤：将权利要求3所述的转基因小球藻接种到生长培养基中培养，加入终浓度为15μg/l的外源刺激素，加入终浓度为200mg/l亚硒酸钠，继续培养，得到...
【专利技术属性】
技术研发人员：马瑜晗，黄昌悦，李明浩，吴文慧，周心翊，赵惠茹，孙莹，黄名苑，武文泉，吴丽芳，
申请(专利权)人：安徽农业大学，
类型：发明
国别省市：
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