【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物，具体涉及一种ffpe样本核酸提取专用脱蜡液及脱蜡方法。
技术介绍
1、福尔马林固定石蜡包埋技术(formalin-fixedandparrffin-embedded，ffpe)是一种组织保存技术。长期以来，ffpe技术在临床检验、细胞形态学检验以及病理学研究中得到广泛应用。近几年来，随着分子诊断的不断发展，ffpe也越来越多地应用于肿瘤的基因检测。
2、ffpe核酸提取第一步是对石蜡包埋组织样品进行脱蜡，以消除石蜡对dna提取和pcr扩增的不良影响。脱蜡过程还需要保证不增加外源性pcr抑制因子并尽量减少dna额外损伤。
3、目前，成熟脱蜡试剂盒采用的脱蜡方法主要是有机溶剂脱蜡法，其中二甲苯脱蜡法具有脱蜡彻底的特性及透明作用，被广泛地应用在肿瘤研究中。但二甲苯的毒性较大，对操作人员的健康影响较大，且存在脱蜡时间长等缺点。
技术实现思路
1、基于此，有必要提供环保型ffpe样本核酸提取专用脱蜡液及脱蜡方法，不利用二甲苯对组织样本进行脱蜡，对操作人员的健康危害较小，并且可以显著缩短脱蜡时间，提高实验效率。
2、本专利技术采用如下技术方案：
3、本专利技术提供一种ffpe样本核酸提取专用脱蜡液，其主要由异构十二烷、白油、exxsol d110、消泡剂、表面活性剂和抗氧化剂组成；其中，异构十二烷、白油、exxsol d110的体积比为(60～85):(10～20)：(8～20)。
4、在其中一些实施例中，所述消泡
5、在其中一些实施例中，所述表面活性剂选自吐温、醇醚磷酸酯、tx-10中的至少一种。
6、在其中一些实施例中，所述抗氧化剂选自丁基羟基茴香醚(bha)、irganox 1076和2,6-二叔丁基对甲基苯酚(bht)中的至少一种。
7、上述表面活性剂的体积百分比优选为0.05％～1％，可以促进溶剂与蜡石表面的接触，有助于脱除蜡层并提高液体的湿润性，从而提高去除蜡的效果。上述消泡剂的体积百分比优选为0.05％～1％，用于防止产生泡沫和氧化，保持液体稳定性和持久性。在其中一些实施例中，消泡剂、表面活性剂占脱蜡液总体积的比例不超过1％。
8、上述抗氧化剂的含量优选为0.5～2g/l，用来延缓脱蜡液的氧化和变质，能减少组织脱蜡过程中的氧化反应，防止在dna提取过程中引入过多人为的氧化损伤，产生g：c—t：a颠换突变或双链断裂，有效提高核酸提取质量，减少检测流程中造成的假阳性。
9、在其中一些实施例中，所述ffpe样本核酸提取专用脱蜡液中异构十二烷、白油、exxsol d110、消泡剂、表面活性剂的体积比为76.8：15：8：0.05：0.05。
10、本专利技术提供一种ffpe组织脱蜡方法，包括如下步骤：获取ffpe组织样本；将所述ffpe组织样本置于上述脱蜡液中，56℃孵育溶蜡，离心，吸走上清，得脱蜡组织碎块；向所述脱蜡组织碎块中加入乙醇，清洗除去残留脱蜡液，离心，吸走上清，得除蜡残组织碎块；将所述除蜡残组织碎块置于56℃金属浴上3～5min，去除乙醇残留，得烘干组织样本。
11、在其中一些实施例中，将所述ffpe组织样本5～10片置于1ml脱蜡液中溶蜡。优选地，离心工艺参数为：13000rpm离心30s。
12、与现有技术相比，本专利技术的核心优势：
13、本专利技术ffpe样本核酸提取专用脱蜡液主要由特定配比的异构十二烷、白油、exxsol d110、消泡剂、表面活性剂和抗氧化剂组成。异构十二烷、白油、exxsol d110具有极低的毒性，易生物降解。采用该脱蜡液进行脱蜡的时间控制在10min内即可脱蜡完毕，且可以保证ffpe组织提取核酸的高质量，对操作人员的身体危害性低。
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1.一种FFPE样本核酸提取专用脱蜡液，其特征在于，其主要由异构十二烷、白油、ExxsolD110、消泡剂、表面活性剂和抗氧化剂组成；
2.根据权利要求1所述的FFPE样本核酸提取专用脱蜡液，其特征在于，所述消泡剂选自Antifoam 204。
3.根据权利要求1所述的FFPE样本核酸提取专用脱蜡液，其特征在于，所述表面活性剂选自吐温、醇醚磷酸酯、TX-10中的至少一种。
4.根据权利要求1所述的FFPE样本核酸提取专用脱蜡液，其特征在于，所述抗氧化剂选自丁基羟基茴香醚、Irganox 1076和2,6-二叔丁基对甲基苯酚中的至少一种。
5.根据权利要求1至4任一项所述的FFPE样本核酸提取专用脱蜡液，其特征在于，异构十二烷、白油、Exxsol D110的体积比为(70～80):(10～15)：(8～15)。
6.根据权利要求5所述的FFPE样本核酸提取专用脱蜡液，其特征在于，异构十二烷、白油、Exxsol D110、消泡剂、表面活性剂的体积比为76.8：15：8：0.05：0.05。
7.一种FFPE样本核
8.根据权利要求7所述的FFPE样本核酸提取专用脱蜡方法，其特征在于，将所述FFPE组织样本5～10片置于1mL权利要求1至6任一项所述的脱蜡液中溶蜡。
9.根据权利要求8所述的FFPE样本核酸提取专用脱蜡方法，其特征在于，离心工艺参数为：13000rpm离心30s。
...【技术特征摘要】
1.一种ffpe样本核酸提取专用脱蜡液，其特征在于，其主要由异构十二烷、白油、exxsold110、消泡剂、表面活性剂和抗氧化剂组成；
2.根据权利要求1所述的ffpe样本核酸提取专用脱蜡液，其特征在于，所述消泡剂选自antifoam 204。
3.根据权利要求1所述的ffpe样本核酸提取专用脱蜡液，其特征在于，所述表面活性剂选自吐温、醇醚磷酸酯、tx-10中的至少一种。
4.根据权利要求1所述的ffpe样本核酸提取专用脱蜡液，其特征在于，所述抗氧化剂选自丁基羟基茴香醚、irganox 1076和2,6-二叔丁基对甲基苯酚中的至少一种。
5.根据权利要求1至4任一项所述的ffpe样本核酸提取专用脱蜡液，其特征在于...
【专利技术属性】
技术研发人员：李彬，郭琼钰，陆亚平，
申请(专利权)人：国药武汉医学实验室有限公司，
类型：发明
国别省市：
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