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【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及眼科,尤其涉及一种泪液蛋白质采集、分离分析方法及其采集装置。
技术介绍
1、泪液分析在医学诊断和研究中具有重要价值,因为它能够提供有关人体健康状况的关键信息。泪液中的蛋白质、电解质、代谢产物等成分的分析对于眼科疾病的诊断、全身性疾病的监测以及药物治疗的效果评估等方面都具有重要意义。然而,传统的泪液采集和分析方法存在一些局限性,如采集量小、成分破坏、操作复杂等。
2、目前,泪液的采集主要依赖于两种方法:
3、一、毛细管法:使用细小的毛细管物理吸取泪液。这种方法简单,但容易因操作不当而刺激眼睛,且难以长时间采集。
4、二、滤纸条法:将特制的滤纸条放置于下眼睑边缘,通过毛细作用吸取泪液。这种方法对泪液成分可能产生干扰,并可能引起眼部不适,同样无法用于长时间采集。
5、且目前已公开的专利技术中,申请号201810456469.4,专利名称为“一种用于收集泪液蛋白的角膜接触镜”的专利技术,公开了一种用于收集泪液蛋白的角膜接触镜,包括与角膜接触的内层以及与眼睑接触的外层,所述内层上设置有用于收集泪液的流道、具有泵入口和泵出口的泵腔以及至少一个蛋白收集室,所述泵腔与所述蛋白收集室通过所述流道串联连接,所述外层上设置有一一对应于所述泵腔的凸起的泵膜,所述泵腔和所述泵膜组成扩缩微泵,利用佩戴者眨眼的动作获得动力,在所述泵腔内产生压力差,使泪液被泵送到所述蛋白收集室。
6、然而,上述专利仍然不能够长期安全放置在人的眼球表面,用于采集泪液或泪液成分的装置。该专利还存在以下缺陷:
技术实现思路
1、有鉴于此,有必要提供一种泪液蛋白质采集、分离分析方法及其采集装置,用以解决现有的采集装置无法长期或过夜收集、吸附非特定的蛋白、舒适性差及其结构复杂的技术问题以及蛋白质种类和含量的快速检测问题。
2、一种泪液蛋白质采集装置,能够安放于眼睑和眼球之间,采集装置包括:
3、尼龙微孔膜,用以吸附泪液中的蛋白质;
4、膜体单元,膜体单元包括具有柔性及生物相容性的膜本体,所述膜本体具有一体积可变的腔室,所述腔室内包裹所述尼龙微孔膜且与所述尼龙微孔膜可拆卸设置,所述膜体单元对应眼睑一侧设置有泪液入口,膜体单元相对眼睑端部设置有泪液排出口,所述泪液入口与所述尼龙微孔膜相对设置,所述膜体单元的腔室能够经由佩戴者眨眼的动作以获得动力,且具有一负压状态以及一常压状态;
5、当所述腔室为负压状态时,泪液通过泪液入口吸附于腔室内以被所述尼龙微孔膜吸附蛋白质,分离的蛋白质后的泪液经由所述泪液排出口并切换为常压状态。
6、优选地,所述尼龙微孔膜的厚度为45μm-50μm,所述尼龙微孔膜展开呈长条形,所述尼龙微孔膜以多层折叠状态包裹于所述腔室以增加与泪液的接触面积。
7、优选地,所述尼龙微孔膜上结合有特异性抗体或配体,以特异性地分离出特定的蛋白质。
8、优选地,所述膜本体为水凝胶膜。
9、优选地,所述膜本体呈信封状袋体结构,包括经由正面膜和反面膜围合以形成一侧开口的膜体以及与反面膜相连接以用于可开闭密封所述开口的盖体,所述尼龙微孔膜经由所述开口内置于所述膜体内。
10、优选地,所述正面膜上开设多个平行且间隔设置的所述泪液入口,所述泪液入口呈条状,多个所述泪液入口所在区域对应所述正面膜的各个边角分别设置有柱状凸起,所述柱状凸起用于顶开结膜以供结膜与泪液入口之间形成泪液流入间隙。
11、优选地,所述泪液排出口设于所述膜体的一侧且与所述开口相对设置,所述泪液排出口突出于所述正面膜和所述反面膜,所述泪液排出口的出液端呈两片相贴合的活瓣,以供泪液单向流出。
12、优选地,所述反面膜的外部表面设置有第一凸起状密封条,所述正面膜的内部表面设置有第二凸起状密封条,所述第二凸起状密封条沿所述开口的边沿设置且与所述第一凸起状密封条相匹配,当所述盖体折叠塞入腔室时,所述第一凸起状密封条和第二凸起状密封条相咬合,所述盖体的自由端倾斜延伸至所述泪液入口的远端一侧并抵触于所述正面膜内壁以形成供泪液能够单向流入的活动开合阀。
13、优选地,所述膜本体长度为8mm-10mm,宽度4mm-5mm,厚度为0.2mm-0.5mm。
14、一种泪液蛋白质采集、分离分析方法,包括泪液蛋白质采集装置,所述方法包括:
15、步骤1,取出采集完成的尼龙微孔膜;
16、步骤2,将尼龙微孔膜放入含有sds溶液的容器中;
17、步骤3,取出尼龙微孔膜,以离心方式去除未溶解的颗粒,并收集含有洗脱的蛋白质的sds溶液;
18、步骤4检测含有洗脱的蛋白质的sds溶液中的蛋白质种类和含量。
19、本专利技术提供的泪液蛋白质采集装置,能够长期安全安放于眼睑和眼球之间,采用柔性及生物相容性的膜本体,使得本装置能够长期放置在结膜囊内,不会引起明显不适,能够减少了对眼球的潜在刺激或伤害。利用尼龙微孔膜亲和蛋白质的特性,能有效地从泪液中提取包括蛋白质等有机大分子。且上述结构中膜本体和尼龙微孔膜易于取材,充分利用了膜本体的用柔性及生物相容特性,作为人体眼部结膜位置的直接接触层,以包裹的方式利用尼龙微孔膜亲和蛋白质的特性实现了对蛋白质等有机大分子的提取,同时也避免尼龙微孔膜直接接触人体眼球部位引起不适,其整体结构简单可快速实现规模量产。
20、本专利技术提供的泪液蛋白质采集、分离分析方法,使用采集装置完成泪液蛋白采集后,可以打开膜本体取出尼龙微孔膜,再利用十二烷基硫酸钠(sds)溶液洗脱、分离蛋白质,尼龙微孔膜可直接置于离心设备中离心分离,无需增加采集装置本身的分离步骤,直接使用常见的实验室蛋白质检测手段,如酶联免疫吸附试验(elisa)或蛋白免疫印迹(westernblot),进行蛋白质种类和含量的检测。
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1.一种泪液蛋白质采集装置,其特征在于,能够安放于眼睑和眼球之间,采集装置包括:
2.根据权利要求1所述的泪液蛋白质采集装置,其特征在于,所述尼龙微孔膜的厚度为45μm-50μm,所述尼龙微孔膜展开呈长条形,所述尼龙微孔膜以多层折叠状态包裹于所述腔室以增加与泪液的接触面积。
3.根据权利要求2所述的泪液蛋白质采集装置,其特征在于,所述尼龙微孔膜上结合有特异性抗体或配体,以特异性地分离出特定的蛋白质。
4.根据权利要求1所述的泪液蛋白质采集装置,其特征在于,所述膜本体为水凝胶膜。
5.根据权利要求4所述的泪液蛋白质采集装置,其特征在于,所述膜本体呈信封状袋体结构,包括经由正面膜和反面膜围合以形成一侧开口的膜体以及与反面膜相连接以用于可开闭密封所述开口的盖体,所述尼龙微孔膜经由所述开口内置于所述膜体内。
6.根据权利要求5所述的泪液蛋白质采集装置,其特征在于,所述正面膜上开设多个平行且间隔设置的所述泪液入口,所述泪液入口呈条状,多个所述泪液入口所在区域对应所述正面膜的各个边角分别设置有柱状凸起,所述柱状凸起用于顶开结膜以供结
7.根据权利要求6所述的泪液蛋白质采集装置,其特征在于,所述泪液排出口设于所述膜体的一侧且与所述开口相对设置,所述泪液排出口突出于所述正面膜和所述反面膜,所述泪液排出口的出液端呈两片相贴合的活瓣,以供泪液单向流出。
8.根据权利要求7所述的泪液蛋白质采集装置,其特征在于,所述反面膜的外部表面设置有第一凸起状密封条,所述正面膜的内部表面设置有第二凸起状密封条,所述第二凸起状密封条沿所述开口的边沿设置且与所述第一凸起状密封条相匹配,当所述盖体折叠塞入腔室时,所述第一凸起状密封条和第二凸起状密封条相咬合,所述盖体的自由端倾斜延伸至所述泪液入口的远端一侧并抵触于所述正面膜内壁以形成供泪液能够单向流入的活动开合阀。
9.根据权利要求1所述的泪液蛋白质采集装置,其特征在于,所述膜本体长度为8mm-10mm,宽度4mm-5mm,厚度为0.2mm-0.5mm。
10.一种泪液蛋白质采集、分离分析方法,其特征在于,包括权利要求1-9任意一项所述的泪液蛋白质采集装置,所述方法包括:
...【技术特征摘要】
1.一种泪液蛋白质采集装置,其特征在于,能够安放于眼睑和眼球之间,采集装置包括:
2.根据权利要求1所述的泪液蛋白质采集装置,其特征在于,所述尼龙微孔膜的厚度为45μm-50μm,所述尼龙微孔膜展开呈长条形,所述尼龙微孔膜以多层折叠状态包裹于所述腔室以增加与泪液的接触面积。
3.根据权利要求2所述的泪液蛋白质采集装置,其特征在于,所述尼龙微孔膜上结合有特异性抗体或配体,以特异性地分离出特定的蛋白质。
4.根据权利要求1所述的泪液蛋白质采集装置,其特征在于,所述膜本体为水凝胶膜。
5.根据权利要求4所述的泪液蛋白质采集装置,其特征在于,所述膜本体呈信封状袋体结构,包括经由正面膜和反面膜围合以形成一侧开口的膜体以及与反面膜相连接以用于可开闭密封所述开口的盖体,所述尼龙微孔膜经由所述开口内置于所述膜体内。
6.根据权利要求5所述的泪液蛋白质采集装置,其特征在于,所述正面膜上开设多个平行且间隔设置的所述泪液入口,所述泪液入口呈条状,多个所述泪液入口所在区域对应所述正面膜的各个边角分别设置有柱状凸起,所述柱状凸起...
【专利技术属性】
技术研发人员:谢华桃,吴名峰,张明昌,
申请(专利权)人:华中科技大学同济医学院附属协和医院,
类型:发明
国别省市:
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