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【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物,具体涉及一种弹性蛋白多肽及其制备方法。
技术介绍
1、弹性蛋白是一种具有弹性、不溶性的结构蛋白,在动物的弹性器官分布广泛,具有弹性、抗拉伸性和耐久性等特点,同时也是维持机体弹性的重要成分。除此之外,在各种生理过程中也发挥着重要作用,承载着细胞信号转导、促进成纤维细胞和内皮细胞增殖分化等功能。弹性蛋白在弹性器官中含量最多,如血管,弹性韧带、肺和皮肤等器官。作为心血管系统中重要组成成分,弹性蛋白的含量变化对心血管功能有显著影响,如高血压、动脉粥样硬化、血栓形成等,另外,在衰老过程中会发生弹性纤维的降解,导致血管僵硬。对于弹性蛋白的缺失与降解,提出从外源性途径获取,使用弹性蛋白肽或与其他聚合物共混等方式制备凝胶或组织工程产品有助于对心血管弹性器官的修复。
2、弹性蛋白是由弹性蛋白原通过共价交联的方式形成不溶性弹性蛋白,半衰期约为70年。鉴于动物体内多为成熟的不溶性弹性蛋白,其耐久性和不溶性的特点在很大程度上阻碍了对弹性蛋白的提取和再利用。目前,弹性蛋白肽的制备一般是利用酶解法,弹性蛋白降解酶主要有三大类:丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶和基质金属蛋白酶(mmps)。在金属蛋白酶中,基质金属蛋白酶如mmp-2、mmp-7、mmp-9或mmp-12具有明显的酶解作用;然而,酶解法的工艺比较复杂。此外,现有商业化的弹性蛋白多肽主要来源于牛心管、牛跟腱和其他哺乳动物,存在生物相容性较差和纯度较低的问题。
3、鱼鳔作为鱼体内的弹性器官,可以根据压力自由收缩舒张,含有丰富的弹性蛋白,同时具有良好的理化性能、
4、有鉴于此,特提出本专利技术。
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提供一种弹性蛋白多肽及其制备方法,本专利技术制备得到的弹性蛋白多肽具有较高的纯度和良好的生物相容性,能够用于医疗器械如人工瓣膜、人工血管、心肌补片等产品,及药品和保健品的研发中。
2、为了实现本专利技术的上述目的,特采用以下技术方案:
3、本专利技术第一方面提供了一种弹性蛋白多肽的制备方法,所述弹性蛋白多肽的制备方法包括如下步骤:
4、(a)选取新鲜鱼鳔并进行预处理;
5、(b)对预处理的鱼鳔材料依次分别进行盐萃取和碱萃取;
6、(c)采用草酸溶液对碱萃取后的鱼鳔材料进行水解,再经纯化,即得所述弹性蛋白多肽。
7、优选地,所述步骤(b)中,盐萃取中采用的萃取剂为0.5~1.5mol/l的氯化钠溶液。
8、优选地,所述步骤(b)中,盐萃取温度为2~6℃,时间为10~15h。
9、优选地,所述步骤(b)中,碱萃取中采用的萃取剂为0.05~0.2mol/l的氢氧化钠溶液或氢氧化钾溶液。
10、优选地,所述步骤(b)中,碱萃取温度为80~98℃,时间为1~3h。
11、优选地,所述步骤(c)中,水解温度为90~98℃;水解至鱼鳔材料完全溶解。
12、优选地,所述步骤(c)中,纯化方式为超滤,超滤截留分子量为3kda~10kda。
13、本专利技术第二方面提供了一种上述制备方法制得的弹性蛋白多肽。
14、与现有技术相比,本专利技术的有益效果至少包括:
15、本专利技术制备得到的弹性蛋白多肽具有较高的纯度和良好的生物相容性,能够用于医疗器械如人工瓣膜、人工血管、心肌补片等产品,及药品和保健品的研发中。
16、本专利技术制备方法工艺简单,易于操作,能够实现弹性蛋白多肽的批量生产。
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1.一种弹性蛋白多肽的制备方法,其特征在于,所述弹性蛋白多肽的制备方法包括如下步骤:
2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述步骤(b)中,盐萃取中采用的萃取剂为0.5~1.5mol/L的氯化钠溶液。
3.根据权利要求1或2所述的制备方法,其特征在于,所述步骤(b)中,盐萃取温度为2~6℃,时间为10~15h。
4.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述步骤(b)中,碱萃取中采用的萃取剂为0.05~0.2mol/L的氢氧化钠溶液或氢氧化钾溶液。
5.根据权利要求1或4所述的制备方法,其特征在于,所述步骤(b)中,碱萃取温度为80~98℃,时间为1~3h。
6.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述步骤(c)中,水解温度为90~98℃;水解至鱼鳔材料完全溶解。
7.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述步骤(c)中,纯化方式为超滤,超滤截留分子量为3kDa~10kDa。
8.权利要求1~7中任一所述的制备方法制得的弹性蛋白多肽。
【技术特征摘要】
1.一种弹性蛋白多肽的制备方法,其特征在于,所述弹性蛋白多肽的制备方法包括如下步骤:
2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述步骤(b)中,盐萃取中采用的萃取剂为0.5~1.5mol/l的氯化钠溶液。
3.根据权利要求1或2所述的制备方法,其特征在于,所述步骤(b)中,盐萃取温度为2~6℃,时间为10~15h。
4.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述步骤(b)中,碱萃取中采用的萃取剂为0.05~0.2mol/l的氢氧...
【专利技术属性】
技术研发人员:刘婧,王志红,孔媛媛,冷希岗,
申请(专利权)人:中国医学科学院生物医学工程研究所,
类型:发明
国别省市:
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