【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及体外诊断技术，尤其是涉及一种重组蛋白、猴痘疫苗及其制备方法与应用。
技术介绍
1、自2022年5月以来，非洲原发地区以外的猴痘病毒(mpv)感染病例数量急剧增加。世界卫生组织(who)已宣布全球猴痘病毒爆发构成国际关切的公共卫生紧急事件。猴痘病毒与天花病毒(smallpox)、牛痘病毒(vacv)同属于痘病毒科正痘病毒属，是双链dna病毒。接种正痘病毒疫苗可提供对其他正痘病毒的感染提供交叉免疫保护。因此，两种基于活性减弱的vacv的疫苗(acam2000和jynneos)，已经被美国食品和药物管理局紧急批准用于预防猴痘。然而，这些疫苗被证实与一些严重的不良事件相关，包括心肌炎和心包炎，特别是在某些个体群体中，如湿疹患者和孕妇。到目前为止，它们仅被批准用于对猴痘高暴露风险个体进行预暴露预防，而不是一般公众使用。因此，在全球天花免疫力下降的背景下，迫切需要一种更安全、更有效的新疫苗，以对抗潜在增加的猴痘流行病。
2、猴痘病毒具有一个庞大且复杂的蛋白质组，含有200多种蛋白质。猴痘病毒有两种主要的感染模式，细胞外包膜病毒(eev)和胞内成熟病毒(imv)，从eev和imv的表面抗原中筛选合适的重组病毒亚单位疫苗可能是一种高效、安全的技术手段。
3、cn116102663a公开了一种猴痘病毒b6r抗原及其制备方法与应用。
4、cn116024265a公开了一种制备猴痘病毒m1r抗原分泌蛋白的方法及其所用核酸分子。
5、cn116603060a公开了一种猴痘病毒亚单位疫苗及其制
6、cn116082521a公开了一种针对痘病毒(特别是猴痘病毒)的多免疫原嵌合或混合抗原，嵌合或混合抗原包含三种免疫原：(1)猴痘病毒a35r蛋白、(2)猴痘病毒m1r蛋白和(3)猴痘病毒b6r蛋白，能够激发针对细胞内成熟病毒颗粒(imv)和细胞外包膜病毒颗粒(eev)两种感染性病毒颗粒的免疫反应。
7、cn116218879a公开了一种针对正痘病毒属的mrna疫苗，可编码并分泌表达来源于猴痘病毒2022流行株的表面蛋白m1r、b6r、c19l、e8l、h3l。
8、cn116712536a公开了一种抗痘病毒疫苗，其含下列抗原和/或融合抗原的mrna：选自下列的两种或多种猴痘病毒抗原或抗原的一部分融合而成的融合抗原：a35r、m1r、b6r和a29l。
9、本专利技术提供一种用于预防猴痘的二联重组蛋白及构建方法和应用，以解决目前灭活苗和弱毒苗存在的保护效果不稳定、易引起继发感染、毒力返强等问题。本技术可用于制备猴痘病毒亚单位疫苗，应用于预防猴痘。
技术实现思路
1、在某些实施例中，本专利技术首先提供了一种重组蛋白，是如下a)或b)的重组蛋白：
2、a)氨基酸序列是seq id no.2的重组蛋白；
3、b)将seq id no.2所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的能够编码具有猴痘抗原活性的重组蛋白。
4、在某些实施例中，本专利技术还提供了与上述重组蛋白相关的生物材料，为下述b1)至b8)中的任一种：
5、b1)编码权利要求1所述重组蛋白的核酸分子；
6、b2)含有b1)所述核酸分子的表达盒；
7、b3)含有b1)所述核酸分子的重组载体，
8、b4)含有b2)所述表达盒的重组载体；
9、b5)含有b1)所述核酸分子的重组微生物；
10、b6)含有b2)所述表达盒的重组微生物；
11、b7)含有b3)所述重组载体的重组微生物；
12、b8)含有b4)所述重组载体的重组微生物；
13、在某些实施例中，所述载体包括大肠杆菌、酵母表达载体以及其他表达载体；
14、在某些实施例中，所述重组微生物包括工程菌。
15、在某些实施例中，所述核酸分子为如下1)或2)或3)或4)所示的核酸分子：
16、1)编码序列是序列表中seq id no.1的dna分子或cdna分子；
17、2)核酸序列是序列表中seq id no.1的dna分子；
18、3)与1)或2)限定的核苷酸序列具有75％或75％以上同一性，且编码上述重组蛋白的cdna分子或基因组dna分子；
19、4)在严格条件下与1)或2)限定的核苷酸序列杂交，且编码上述重组蛋白的cdna分子或基因组dna分子。
20、在某些实施例中，本专利技术还提供了上述的重组蛋白的下述任一应用:
21、c1)制备预防猴痘病毒感染的产品；
22、c2)预防猴痘病毒感染；
23、c3)制备预防或治疗猴痘病毒所致疾病的产品；
24、c4)预防或治疗猴痘病毒所致疾病；
25、c5)制备预防或治疗猴痘病毒感染而引起的猴痘的产品；
26、c6)预防或治疗猴痘病毒感染而引起的猴痘；
27、任选地，所述应用为非治疗目的的。
28、在某些实施例中，本专利技术还提供了上述的生物材料的下述任一应用:
29、c1)制备预防猴痘病毒感染的产品；
30、c2)预防猴痘病毒感染；
31、c3)制备预防或治疗猴痘病毒所致疾病的产品；
32、c4)预防或治疗猴痘病毒所致疾病；
33、c5)制备预防或治疗猴痘病毒感染而引起的猴痘的产品；
34、c6)预防或治疗猴痘病毒感染而引起的猴痘；
35、任选地，所述应用为非治疗目的的。
36、在某些实施例中，本专利技术还提供了一种猴痘疫苗的生产方法，其包含利用上述的生物材料表达重组蛋白的步骤。
37、在某些实施例中，本专利技术还提供了一种猴痘疫苗，所述疫苗由上述的方法制备得到。
38、在某些实施例中，本专利技术还提供了一种猴痘疫苗的应用，所述应用为预防猴痘病毒或者治疗猴痘，所述应用为非治疗目的的。
39、本专利技术与现有技术相比，至少具有如下有益效果：
40、本专利技术从eev和imv的表面抗原中筛选合适的重组病毒亚单位疫苗，免疫组的攻毒保护率说明了二联融合重组蛋白可以产生100％的免疫保护率。是一种高效、安全的技术手段，解决了目前灭活苗和弱毒苗存在的保护效果不稳定、易引起继发感染、毒力返强等问题。本专利技术的重组蛋白和生物材料可用于制备猴痘病毒亚单位疫苗，应用于预防猴痘。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种重组蛋白，是如下a)或b)的重组蛋白：
2.与权利要求1所述重组蛋白相关的生物材料，为下述B1)至B8)中的任一种：
3.根据权利要求2所述的生物材料，其特征在于：所述载体包括大肠杆菌、酵母表达载体以及其他表达载体。
4.根据权利要求2所述的生物材料，其特征在于：所述重组微生物包括工程菌。
5.根据权利要求2所述的生物材料，其特征在于：所述核酸分子为如下1)或2)或3)或4)所示的核酸分子：
6.权利要求1所述的重组蛋白的下述任一应用:
7.权利要求2所述的生物材料的下述任一应用:
8.一种猴痘疫苗的生产方法，其特征在于，其包含利用权利要求2所述的生物材料表达重组蛋白的步骤。
9.一种猴痘疫苗，其特征在于，所述疫苗由权利要求8所述的方法制备得到。
10.一种猴痘疫苗的应用，其特征在于，所述应用为预防猴痘病毒或者治疗猴痘，所述应用为非治疗目的的。
【技术特征摘要】
1.一种重组蛋白，是如下a)或b)的重组蛋白：
2.与权利要求1所述重组蛋白相关的生物材料，为下述b1)至b8)中的任一种：
3.根据权利要求2所述的生物材料，其特征在于：所述载体包括大肠杆菌、酵母表达载体以及其他表达载体。
4.根据权利要求2所述的生物材料，其特征在于：所述重组微生物包括工程菌。
5.根据权利要求2所述的生物材料，其特征在于：所述核酸分子为如下1)或2)或3)或4)所...
【专利技术属性】
技术研发人员：刘志新，杜卫星，
申请(专利权)人：十堰市人民医院湖北医药学院附属人民医院，
类型：发明
国别省市：
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