【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物，特别是一种抗菌肽nigroain-k1-e4kd18k及其制备方法和应用。
技术介绍
1、日益严重的对常规抗生素的耐药性问题刺激了开发新的抗菌产品的需求。抗菌肽可以有效的抵抗有害微生物。由于抗菌肽的抗菌机制与常规抗生素有明显区别，抗菌肽不易产生耐药性，因此抗菌肽的发展引起了相当大的关注。传统抗生素多是通过抑制细菌特定代谢途径起到杀菌作用，大多数抗菌肽对细菌的作用靶点是细菌膜，通过破坏细菌细胞膜，导致细胞内容物的泄漏，最终导致细菌死亡。由于细菌的细胞膜组成基本不发生变化，因此抗菌肽不易产生耐药性。
2、抗菌肽多为带有净正电荷的两亲性多肽分子，其结构多为α-螺旋结构；抗菌肽广泛存在于动植物体中，是宿主先天免疫系统的重要组成部分。但天然来源的抗菌肽往往存在结构复杂、序列较长、抗菌活性低等缺点。
3、中国专利申请号cn201610984016.x公开的一种能抑制和杀灭革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌的抗菌肽，其氨基酸序列如seq id no.1-3所示。该抗菌肽用于杀灭或抑制以耐甲氧西林金黄色葡萄球菌、李斯特菌为代表的革兰氏阳性菌或以大肠杆菌为代表的革兰氏阴性菌有一定的效果，但是效果不是太显著。
技术实现思路
1、为了解决上述技术问题，本专利技术提供了一种抗菌肽nigroain-k1-e4kd18k及其制备方法和应用。
2、为达到上述目的，本专利技术是按照以下技术方案实施的：
3、本专利技术的目的之一是提供一种抗菌肽nigroa
4、本专利技术的目的之二是提供一种抗菌肽nigroain-k1-e4kd18k的制备方法，通过对天然来源的nigroain-k1肽进行氨基酸替换，将第4位的谷氨酸、第18位的天冬氨酸分别用带有正电荷的赖氨酸替换，同时将替换后的多肽序列n末端和c末端分别为乙酰化和酰胺化修饰，得到抗菌肽nigroain-k1-e4kd18k；具体，称取0.25mm rink amide mbharesin树脂活化并脱保护后，以fmoc-氨基酸为原料，从多肽序列的c端到n端顺序合成；合成过程中，fmoc-氨基酸加入量为1mm-2mm；20-30℃下100-180转/分振荡孵育合成；待最后一个氨基酸偶联完成后，加入0.5-3ml乙酸酐对n端进行乙酰化；乙酰化完毕后，将粗肽从树脂上切割下来，切割试剂由tfa、水和三异丙基氯硅烷按照质量比98:1:1混合而成；用含0.1％tfa的a相双蒸水和含0.1％tfa的b相乙腈为流动相，采用ab相梯度混合，用c18色谱柱按1ml/min流速进行多肽粗品的纯化，收集nigroain-k1-e4kd18k肽肽纯品，冻干保存。
5、本专利技术的目的之三是提供一种抗菌肽nigroain-k1-e4kd18k在制备抑制革兰阴性菌和/或革兰阳性菌产品中的应用。
6、与现有技术相比，本专利技术抗菌肽nigroain-k1-e4kd18k对革兰阴性菌和/或革兰阳性菌有显著的抗菌效果。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种抗菌肽Nigroain-K1-E4KD18K，其特征在于，其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。
2.一种如权利要求1所述的抗菌肽Nigroain-K1-E4KD18K的制备方法，其特征在于，通过对天然来源的Nigroain-K1肽进行氨基酸替换，将第4位的谷氨酸、第18位的天冬氨酸分别用带有正电荷的赖氨酸替换，同时将替换后的多肽序列N末端和C末端分别为乙酰化和酰胺化修饰，得到抗菌肽Nigroain-K1-E4KD18K。
3.一种如权利要求2所述的抗菌肽Nigroain-K1-E4KD18K的制备方法，其特征在于，具体包括：
4.一种如权利要求1所述的抗菌肽Nigroain-K1-E4KD18K在制备抑制革兰阴性菌和/或革兰阳性菌产品中的应用。
【技术特征摘要】
1.一种抗菌肽nigroain-k1-e4kd18k，其特征在于，其氨基酸序列如seq id no.2所示。
2.一种如权利要求1所述的抗菌肽nigroain-k1-e4kd18k的制备方法，其特征在于，通过对天然来源的nigroain-k1肽进行氨基酸替换，将第4位的谷氨酸、第18位的天冬氨酸分别用带有正电荷的赖氨酸替换，同时将替换后的...
【专利技术属性】
技术研发人员：胡翠华，张思亮，汪洋，衣同辉，陈玉娟，王璐，董莉彤，王作斌，
申请(专利权)人：长春理工大学，
类型：发明
国别省市：
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