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【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物工程,具体的,是一种苯胺降解菌菌株及其应用。
技术介绍
1、苯胺作为一种重要的化工原料常常用于制造农药、染料、塑料、橡胶等行业,它也是一种有毒污染物,被国家列为优先控制的污染物之一。苯胺废水的大量排放,不仅对环境造成污染,同时也威胁人体健康。苯胺废水的处理方法包括物理、化学和生物。与物理和化学发相比,生物法降解苯胺具有高经济性和高效率性,是处理大量含苯胺污水最主要的方法。但是传统的生物法对苯胺的降解也存在一些缺陷,比如对苯胺的承受能力低、抗冲击负荷性能较差,因此需要筛选高效苯胺降解菌进行生物强化。
2、目前高效苯胺降解菌的研究主要集中在低浓度苯胺深度降解方面,而对高浓度苯胺的降解以及能适应不同环境的苯胺降解菌的研究还较少,因此筛选能以苯胺为唯一碳源、能源的高效降解菌株在污水治理中具有重要的应用价值,是解决苯胺废水的关键之一。
3、因此,需要提供一种苯胺降解菌菌株及其应用来解决上述问题。
技术实现思路
1、本专利技术的目的是提供一种苯胺降解菌菌株及其应用。
2、本专利技术通过如下技术方案实现上述目的:
3、技术方案之一为:
4、一种苯胺降解菌菌株,为戴尔福特菌(delftia sp),保藏编号为cgmccno.27609。
5、进一步的,16s rdna的核苷酸序列如seq id no.1所示。
6、进一步的,采用纺织印染企业污水处理系统中好氧池中活性污泥进行苯胺降解菌的富集;
>7、富集方法:将底泥离心后,去上清,沉淀按照10%(w/v)加入到富集培养基中,35℃,150r/min进行富集。
8、进一步的,每天检测培养液中苯胺的变化,如培养基中的的苯胺降至0mg/l时,按照10%的比例再次接种至新的培养基中,同时加大苯胺的含量;驯化1-2个月后,污泥的苯胺降解效率大大提高,此时得到苯胺降解菌富集液,即可将富集的菌液采用平板稀释涂布以及划线法进行分离和纯化。
9、进一步的,将富集菌液用液体纯化培养基稀释成10-1-10-88个梯度,每个梯度取100ul分别涂布于固体纯化培养基上,每个梯度做5个平行,在30℃培养48h,挑取平板上长出的不同菌落进行划线纯化,经过7-8代划线,最终纯化得到了1株菌,命名为hz-o-031。
10、进一步的,菌株hz-o-031在牛肉膏蛋白胨固体培养基上划线,于30℃,缺氧条件下培养24-48h。hz-o-031菌落直径为0.5-1.0mm,菌落呈白色,隆起,表面光滑没有光泽,圆形,边缘光滑,透明,无臭无味。
11、技术方案之二为:
12、一种苯胺降解菌菌株的应用,应用于氯苯废水处理,步骤包括:
13、2)菌株活化;
14、将菌种hz-o-031接种于增菌培养基中,30℃,150r/min,振荡培养24h;
15、2)应用:
16、2-1)活化后的hz-o-030将活化好的菌种按照1%(v/v)接种到100ml增菌培养基中,苯胺浓度分别设置2000mg/l(高浓度)和200mg/l(低浓度)两种浓度;
17、2-2)30℃,150r/min,振荡培养24h;
18、2-3),每隔8h取样检测培养液中od600(菌浓度)和苯胺含量。
19、进一步的,增菌培养基配方:
20、苯胺50-100μl,k2hpo4 0.5g,kh2po40.52g,nacl 0.2g,mgso4·7h2o 0.2g,mnso4·h2o 0.15g,cacl20.1g,(nh4)2so4 0.1-1g,补充蒸馏水至1l,ph7.0-7.2。补充蒸馏水至1l,ph7.0-7.2。
21、与现有技术相比,本专利技术能够降解较大范围浓度的苯胺,且降解效率较高,接种后24h内即可将较高浓度的苯胺处理完全。
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1.一种苯胺降解菌菌株,其特征在于:为戴尔福特菌(Delftia sp),保藏编号为CGMCCNO.27609。
2.根据权利要求1所述的一种苯胺降解菌菌株,其特征在于:16S rDNA的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。
3.根据权利要求1所述的一种苯胺降解菌菌株,其特征在于:采用纺织印染企业污水处理系统中好氧池中活性污泥进行苯胺降解菌的富集;
4.根据权利要求3所述的一种苯胺降解菌菌株,其特征在于:每天检测培养液中苯胺的变化,如培养基中的的苯胺降至0mg/L时,按照10%的比例再次接种至新的培养基中,同时加大苯胺的含量;驯化1-2个月后,污泥的苯胺降解效率大大提高,此时得到苯胺降解菌富集液,即可将富集的菌液采用平板稀释涂布以及划线法进行分离和纯化。
5.根据权利要求4所述的一种苯胺降解菌菌株,其特征在于:将富集菌液用液体纯化培养基稀释成10-1-10-88个梯度,每个梯度取100ul分别涂布于固体纯化培养基上,每个梯度做5个平行,在30℃培养48h,挑取平板上长出的不同菌落进行划线纯化,经过7-8代划线,最终纯化得到了1株
6.根据权利要求5所述的一种苯胺降解菌菌株,其特征在于:菌株HZ-O-031在牛肉膏蛋白胨固体培养基上划线,于30℃,缺氧条件下培养24-48h。HZ-O-031菌落直径为0.5-1.0mm,菌落呈白色,隆起,表面光滑没有光泽,圆形,边缘光滑,透明,无臭无味。
7.一种苯胺降解菌菌株的应用,其特征在于:应用于氯苯废水处理,步骤包括:
8.根据权利要求7所述的一种苯胺降解菌菌株的应用,其特征在于:增菌培养基配方:
...【技术特征摘要】
1.一种苯胺降解菌菌株,其特征在于:为戴尔福特菌(delftia sp),保藏编号为cgmccno.27609。
2.根据权利要求1所述的一种苯胺降解菌菌株,其特征在于:16s rdna的核苷酸序列如seq id no.1所示。
3.根据权利要求1所述的一种苯胺降解菌菌株,其特征在于:采用纺织印染企业污水处理系统中好氧池中活性污泥进行苯胺降解菌的富集;
4.根据权利要求3所述的一种苯胺降解菌菌株,其特征在于:每天检测培养液中苯胺的变化,如培养基中的的苯胺降至0mg/l时,按照10%的比例再次接种至新的培养基中,同时加大苯胺的含量;驯化1-2个月后,污泥的苯胺降解效率大大提高,此时得到苯胺降解菌富集液,即可将富集的菌液采用平板稀释涂布以及划线法进行分离和纯化。
5.根据权利要求4所述...
【专利技术属性】
技术研发人员:邓敬轩,单晓红,邱勋,向斯,
申请(专利权)人:恒臻无锡生物科技有限公司,
类型:发明
国别省市:
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