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【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物工程,具体的,是一种耐盐氯苯降解菌株及其应用。
技术介绍
1、氯苯是一种常用的工业有机溶剂,是许多化学反应的中介物,常应用于纺织、制药、皮革、钢铁等行业;由于氯具有致突变、致癌和致畸三致效应,且累积生物毒性及污染面广特点,被列为重点污染物黑名单之一。
2、氯苯的化学性质稳定较为稳定,传统的物理、或者化学氧化手段,处理周期长,效率差。
3、利用微生物降解氯苯是最为经济有效的方式,氯苯降解菌的筛选与培育已有使用,但是现阶段使用的的氯苯降解菌具有需要解决问题:降解氯苯的浓度范围较小、降解时间较长、适用环境范围小。
4、因此,需要提供耐盐氯苯降解菌株及其应用来解决上述问题。
技术实现思路
1、本专利技术的目的是提供一种耐盐氯苯降解菌株及其应用。
2、本专利技术通过如下技术方案实现上述目的:
3、技术方案之一为:
4、一种耐盐氯苯降解菌株,为苍白杆菌(ochrobactrumsp),保藏编号为cgmccno.27159。
5、进一步的,16s rdna的核苷酸序列如seq id no.1所示。
6、进一步的,通过富集培养基对印染厂污水处理系统中缺氧池中底泥进行富集,将底泥离心后,去上清,污泥沉淀按照5-10%w/v加入到富集培养基中,在缺氧条件do<1mg/l下,35℃进行富集。
7、进一步的,每天检测培养基中氯苯含量的变化,如培养基中的的氯苯含量降至0mg/l时,按
8、进一步的,使用纯化培养基进行将富集菌液用液体纯化培养基稀释成10-1-10-77个梯度,每个梯度取100ul分别涂布于固体纯化培养基上,每个梯度做5个平行,在30℃缺氧培养48h,挑取平板上长出的不同菌落进行划线纯化;经过7-8代划线,最终纯化得到株菌,命名为株菌hz-o-030。
9、进一步的,菌株hz-o-030在牛肉膏蛋白胨固体培养基上划线,于30℃,缺氧条件下培养24-48h;hz-o-030菌落直径为0.5-1mm,菌落呈白色,隆起,表面光滑没有光泽,圆形,边缘光滑,透明,无臭无味;通过扫描电镜观察显微形态,菌株hz-o-030为杆菌,长1-2μm,宽0.4-0.5μm。
10、技术方案之二为:
11、一种耐盐氯苯降解菌株的应用,其特征在于:应用于氯苯废水处理,步骤包括:
12、1)菌株活化;
13、2)应用:
14、2-1)活化后的hz-o-030菌株按照1%的比例加到氯苯污水中,进行处理;
15、2-2)活化后的hz-o-030菌株按照1%的比例加到含盐的氯苯污水中,进行处理;
16、2-3)活化后的hz-o-030菌株按照1%的比例加到不同ph值的氯苯污水中,进行处理。
17、进一步的,lb培养基包括蛋白胨10g、酵母膏5g、氯化钠10g,补充蒸馏水至1l,ph7.0-7.2。
18、进一步的,菌株活化具体为:将菌株hz-o-030接种于lb培养基中进行活化,30℃,100r/min,缺氧条件下振荡培养48h。
19、与现有技术相比,本专利技术可用于高盐度含氯苯污水的处理,降解氯苯的同时,同步降低总氮和氨氮。
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1.一种耐盐氯苯降解菌株,其特征在于:为苍白杆菌(Ochrobactrumsp),保藏标号为CGMCC NO.27159。
2.根据权利要求1所述的一种耐盐氯苯降解菌株,其特征在于:16S rDNA的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。
3.根据权利要求1或2所述的一种耐盐氯苯降解菌株,其特征在于:通过富集培养基对印染厂污水处理系统中缺氧池中底泥进行富集,将底泥离心后,去上清,污泥沉淀按照5-10%w/v加入到富集培养基中,在缺氧条件DO<1mg/L下,35℃进行富集。
4.根据权利要求3所述的一种耐盐氯苯降解菌株,其特征在于:每天检测培养基中氯苯含量的变化,如培养基中的的氯苯含量降至0mg/L时,按照5-10%的比例再次接种至新的培养基中,同时加大氯苯的含量;驯化1-2个月后,污泥的氯苯降解效率较初始阶段提高,此时得到氯苯降解菌富集液,将富集菌液采用平板稀释涂布以及划线法进行分离和纯化。
5.根据权利要求4所述的一种耐盐氯苯降解菌株,其特征在于:使用纯化培养基进行将富集菌液用液体纯化培养基稀释成10-1-10-77个梯度,每个
6.根据权利要求1所述的一种耐盐氯苯降解菌株,其特征在于:菌株HZ-O-030在牛肉膏蛋白胨固体培养基上划线,于30℃,缺氧条件下培养24-48h;HZ-O-030菌落直径为0.5-1mm,菌落呈白色,隆起,表面光滑没有光泽,圆形,边缘光滑,透明,无臭无味;通过扫描电镜观察显微形态,菌株HZ-O-030为杆菌,长1-2μm,宽0.4-0.5μm。
7.一种耐盐氯苯降解菌株的应用,其特征在于:应用于氯苯废水处理,步骤包括:
8.根据权利要求7所述的一种耐盐氯苯降解菌株的应用,其特征在于:LB培养基包括蛋白胨10g、酵母膏5g、氯化钠10g,补充蒸馏水至1L,pH7.0-7.2。
9.根据权利要求7所述的一种耐盐氯苯降解菌株的应用,其特征在于:菌株活化具体为:将菌株HZ-O-030接种于LB培养基中进行活化,30℃,100r/min,缺氧条件下振荡培养48h。
...【技术特征摘要】
1.一种耐盐氯苯降解菌株,其特征在于:为苍白杆菌(ochrobactrumsp),保藏标号为cgmcc no.27159。
2.根据权利要求1所述的一种耐盐氯苯降解菌株,其特征在于:16s rdna的核苷酸序列如seq id no.1所示。
3.根据权利要求1或2所述的一种耐盐氯苯降解菌株,其特征在于:通过富集培养基对印染厂污水处理系统中缺氧池中底泥进行富集,将底泥离心后,去上清,污泥沉淀按照5-10%w/v加入到富集培养基中,在缺氧条件do<1mg/l下,35℃进行富集。
4.根据权利要求3所述的一种耐盐氯苯降解菌株,其特征在于:每天检测培养基中氯苯含量的变化,如培养基中的的氯苯含量降至0mg/l时,按照5-10%的比例再次接种至新的培养基中,同时加大氯苯的含量;驯化1-2个月后,污泥的氯苯降解效率较初始阶段提高,此时得到氯苯降解菌富集液,将富集菌液采用平板稀释涂布以及划线法进行分离和纯化。
5.根据权利要求4所述的一种耐盐氯苯降解菌株,其特征在于:使用纯化培养基进行将富集菌液用液体纯化培养基稀释成10-1-10-77个梯度,每个梯度取...
【专利技术属性】
技术研发人员:邓敬轩,单晓红,邱勋,向斯,
申请(专利权)人:恒臻无锡生物科技有限公司,
类型:发明
国别省市:
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