一种3个gRNA联用的高效鲢bmp6基因敲除方法及应用技术

本申请涉及鲢(Hypophthalmichthys molitrix)技术领域，具体涉及一种在鲢中3个gRNA位点敲除bmp6基因的方法及应用。该gRNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.1～3所示。本申请通过体外转录合成三个靶基因的gRNA，然后与Cas9蛋白混合，采用显微注射的方式将混合物导入鲢受精卵单细胞期的动物极中，孵化后即可获得靶基因突变的鲢F<subgt;0</subgt;代。本申请高效地实现了鲢基因敲除，为开展鲢的育种和基因功能研究提供了有效的技术手段。

【技术实现步骤摘要】

本申请涉及鲢(hypophthalmichthys molitrix)，具体涉及一种3个grna联用的高效鲢bmp6基因敲除方法及应用。

技术介绍

1、鲢(hypophthalmichthys molitrix)是我国重要的淡水养殖鱼类，为我国特有的“四大家鱼”之一。2022年养殖产量达387.98万吨，长期以来位居淡水养殖产量第二位，为保障水产品稳定有效供给做出了重要贡献。鲢属典型的节粮型养殖鱼类，主要以浮游植物为食，生产上无需投饵，节约了资源；鲢还可控制水体富营养化，调节水质，生态意义重大。此外，鲢价格低廉，以较低的价格就能获得高品质蛋白，为提高广大人民的生活品质发挥了重要作用。

2、基因编辑技术是一种通过对特定dna片段的插入、敲除、修饰或替换等，能够精确改造生物基因组，实现基因定点敲除和外源基因定点整合，对生物体中目标基因进行编辑的技术(魏景亮,吴添文,阮进学,et al.基因组编辑技术改良家畜的研究进展[j].中国农业科技导报,2014(1):7.doi:10.13304/j.nykjdb.2014.003.)。近年来出现的锌指核酸酶本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.靶向鲢(Hypophthalmichthys molitrix)bmp6基因的gRNA，其核苷酸序列如SEQ IDNO.1～3中至少一项所示。

2.根据权利要求1所述的gRNA，其靶向所述bmp6基因的第一外显子。

3.鲢(Hypophthalmichthys molitrix)bmp6基因的敲除组合物，其包括如权利要求1或2所述的gRNA和Cas9蛋白。

4.鲢(Hypophthalmichthys molitrix)bmp6基因的敲除试剂盒，其包括如权利要求1或2所述的gRNA和Cas9蛋白。

5.鲢(Hypophthalmicht...

【技术特征摘要】

1.靶向鲢(hypophthalmichthys molitrix)bmp6基因的grna，其核苷酸序列如seq idno.1～3中至少一项所示。

2.根据权利要求1所述的grna，其靶向所述bmp6基因的第一外显子。

3.鲢(hypophthalmichthys molitrix)bmp6基因的敲除组合物，其包括如权利要求1或2所述的grna和cas9蛋白。

4.鲢(hypophthalmichthys molitrix)bmp6基因的敲除试剂盒，其包括如权利要求1或2所述的grna和cas9蛋白。

5.鲢(hypophthalmichthys molitri...

【专利技术属性】
技术研发人员：梁宏伟，李晓晖，冯翠，张泽文，
申请(专利权)人：中国水产科学研究院长江水产研究所，
类型：发明
国别省市：