一种生产聚苹果酸的里氏木霉工程菌及其构建方法和应用技术

技术编号:41206265 阅读:29 留言:0更新日期:2024-05-07 22:32
本发明专利技术公开了一种生产聚苹果酸的里氏木霉工程菌及其构建方法和应用,涉及生物工程技术领域。该里氏木霉工程菌的构建方法,包括将重组载体转化入里氏木霉宿主菌中,通过基因重组构建得到所述里氏木霉工程菌的步骤;所述里氏木霉工程菌通过过表达聚苹果酸合酶蛋白来生产聚苹果酸;所述聚苹果酸合酶蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.6所示;所述重组载体的骨架载体为LML2.0a,包括pma基因N端片段。本发明专利技术以里氏木霉菌为出发菌株,不引入任何外源基因,通过过表达内源的聚苹果酸合成酶基因,使原先不具备聚苹果酸生产能力的里氏木霉,改造为可以高效生产聚苹果酸的基因工程优化菌株,构建成符合食品安全的聚苹果酸生产菌株。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物工程,特别是涉及一种生产聚苹果酸的里氏木霉工程菌及其构建方法和应用


技术介绍

1、聚苹果酸(poly malic acid,pmla)又名聚羟基丁二酸酯是一种生物高分子材料,是以唯一的单体l-苹果酸(l-malic acid,l-ma)通过无数酯键聚合后形成的脂肪族聚合物。聚苹果酸是唯一一种含酯键又能快速水解的高分子聚合物,水解产物为l-苹果酸单体,可进入三羧酸循环中被降解。聚苹果酸侧链存在大量游离的羧基,容易被修饰或改性,与具有功能分子的活性基团相结合,从而使其附有特殊功能。因此在生物医药、食品、化妆品等领域具有广泛的应用前景。聚苹果酸作为高分子聚酯材料,具有优良的水溶性、生物相容性、生物可降解性、生物可吸收性、易修饰性、非免疫原性和无毒性,在生物医学材料、可降解塑料、吸水材料、抗菌食品包装材料等领域有广泛的应用前景,是最具发展潜力的“绿色塑料”。

2、目前,聚苹果酸的合成方法主要分为化学合成法和生物合成法。化学合成法主要有开环聚合法和直接聚合法,可以得到3种构型的pmla,其中开环聚合法技术较为成熟。但与生物合成法相比,本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种聚苹果酸合酶蛋白,其特征在于,氨基酸序列如SEQ ID NO.6所示。

2.一种如权利要求1所述聚苹果酸合酶蛋白的编码基因,其特征在于,核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示。

3.一种生产聚苹果酸的里氏木霉工程菌的构建方法,其特征在于,包括将重组载体转化入里氏木霉宿主菌中,通过基因重组构建得到所述里氏木霉工程菌的步骤;

4.根据权利要求3所述的构建方法,其特征在于,所述聚苹果酸合酶蛋白的编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示。

5.根据权利要求3所述的构建方法,其特征在于,所述重组载体含有依次连接的pma基因上游序列、启...

【技术特征摘要】

1.一种聚苹果酸合酶蛋白,其特征在于,氨基酸序列如seq id no.6所示。

2.一种如权利要求1所述聚苹果酸合酶蛋白的编码基因,其特征在于,核苷酸序列如seq id no.5所示。

3.一种生产聚苹果酸的里氏木霉工程菌的构建方法,其特征在于,包括将重组载体转化入里氏木霉宿主菌中,通过基因重组构建得到所述里氏木霉工程菌的步骤;

4.根据权利要求3所述的构建方法,其特征在于,所述聚苹果酸合酶蛋白的编码基因的核苷酸序列如seq id no.5所示。

5.根据权利要求3所述的构建方法,其特征在于,所述重组载体含有依次连接的pma基因上游序列、启动子和所述pma基因n端片段。

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【专利技术属性】
技术研发人员:王玮陈雨蒙李雅琪
申请(专利权)人:华东理工大学
类型:发明
国别省市:

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