用于检测沙门氏菌的一步法CRISPR/Cas12b检测试剂盒及方法技术

本发明专利技术涉及微生物检测领域，具体涉及一种用于检测沙门氏菌的一步法CRISPR/Cas12b检测试剂盒及方法，所述试剂盒包括F引物、R引物、向导RNA、Cas12b蛋白、单链核酸报告分子；所述F引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示；所述R引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示；所述向导RNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.16所示；所述单链核酸报告分子为5’‑/6‑FAM/TTTTTTTT/BHQ1/‑3’。本发明专利技术成功开发了一种沙门氏菌检测试剂盒，采用本发明专利技术的试剂盒进行检测，核酸扩增和检测同步进行，无需开盖检测。实验结果表明，本发明专利技术沙门氏菌检测系统具有较好的特异性和灵敏度。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及微生物检测领域，具体涉及一种用于检测沙门氏菌的一步法crispr/cas12b检测试剂盒及方法。

技术介绍

1、沙门氏菌(salmonella,sal)是全世界重要的食源性病原体之一，可引起严重的公共卫生问题。全球每年有超过1.53亿例肠胃炎病例和57000人死于sal。迄今为止，已鉴定出2600多种sal血清型。其中，鼠伤寒沙门氏菌和肠炎沙门氏菌是引起人类肠胃炎的两种主要血清型。通常，食用受污染的食物是sal介导的感染的主要来源。在中国，sal在细菌性食物中毒中排名第一，约占70％-80％。因此，一种准确、快速的sal检测方法对于阻断食源性疾病的爆发和维护公众健康至关重要。

2、基于细菌培养的方法已用于sal检测很长时间，该检测方法基于实验室、耗时并且劳动密集。迄今为止，基于聚合酶链式反应(pcr)的方法也已广泛用于sal检测，目前被认为是诊断金标准。然而，由于所需仪器复杂、要求技术人员经验丰富并且反应周期长等因素的限制，该方法难以在资源有限的地区实施。等温扩增克服了基于pcr的方法的缺点，并在恒定温度下进行，而不需要特定的设备本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种基于CRISPR的沙门氏菌检测试剂盒，所述试剂盒包括F引物、R引物、向导RNA、Cas12b蛋白、单链核酸报告分子；所述F引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示；所述R引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示；所述向导RNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.16所示；所述单链核酸报告分子为5’-/6-FAM/TTTTTTTT/BHQ1/-3’。

2.根据权利要求1所述的试剂盒，所述试剂盒还包括聚合酶和dNTP。

3.根据权利要求1所述的试剂盒，所述试剂盒还包括：缓冲液。

4.根据权利要求1所述的试剂盒，所述试剂盒中，每50μL包括：<...

【技术特征摘要】

1.一种基于crispr的沙门氏菌检测试剂盒，所述试剂盒包括f引物、r引物、向导rna、cas12b蛋白、单链核酸报告分子；所述f引物的核苷酸序列如seq id no.2所示；所述r引物的核苷酸序列如seq id no.3所示；所述向导rna的核苷酸序列如seq id no.16所示；所述单链核酸报告分子为5’-/6-fam/tttttttt/bhq1/-3’。

2.根据权利要求1所述的试剂盒，所述试剂盒还包括聚合酶和dntp。

3.根据权利要求1所述的试剂盒，所述试剂盒还包括：缓冲液。

4.根据权利要求1所述的试剂盒，所述试剂盒中，每50μl包括：

5.一种基...

【专利技术属性】
技术研发人员：龚建森，张笛，盛中伟，许明，董永毅，张萍，李婷婷，窦新红，吴坤，陈莉，
申请(专利权)人：江苏省家禽科学研究所，
类型：发明
国别省市：