【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物医药领域，具体涉及一种通用新冠疫苗、制备方法及其应用。
技术介绍
1、随着sars-cov-2在不同地区的传播，出现不同的变异株。截至目前，传播力超强的变异株有alpha(原始株)、beta、gamma、delta、lammda、omicron等变异株，未来很可能还有其它类型变异株出现。尽管研究表明接种新冠疫苗可有效预防发病和降低感染后重症率和死亡率，但国内外均出现疫苗接种后突破性感染的案例，有研究表明这些变异株对疫苗均有不同程度的免疫逃逸能力。研发高效广谱的β冠状病毒b谱系的通用疫苗迫在眉睫。
2、新冠病毒至今为止，中和表位主要集中在rbd区，ntd及s2区的中和表位只有1-2个，所以基于rbd的疫苗能在免疫动物体内诱导更高水平的中和抗体和t细胞免疫反应，和更低水平的非中和抗体或有害免疫反应，但如何开发出能针对多种亚型的，诱导机体产生更好的细胞和体液免疫反应的疫苗，依然是具有挑战性的课题。
技术实现思路
1、为了克服上述缺陷，本专利技术提供一种包括sars-cov-2的rbd突变体的融合蛋白、制备方法及其在制备通用新冠纳米颗粒疫苗中的应用的技术方案，具体的，
2、本专利技术第一方面，提供一种融合蛋白，所述融合蛋白包括原始菌株的rbd突变体的蛋白序列(rbd原始株突变体)，优选的，所述突变体的蛋白序列包括如下突变：
3、(1)8m1突变体，相对于原始菌株的突变位点包括在第346、417、444、446、452、460、484和/
4、(2)8m2突变体，相对于原始菌株的突变位点包括在第346、417、445、446、452、460、484和/或486上的突变。
5、更优选的，
6、所述8m1突变体的氨基酸相对于原始菌株的突变位点包括r346t、k417n、k444t、g446s、l452r、n460k、e484a和f486s；
7、所述8m2突变体的氨基酸相对于原始菌株的突变位点包括r346t、k417n、v445a、g446s、l452r、n460k、e484a和f486s。
8、优选的，所述融合蛋白还包括fc片段(fc)或者幽门螺旋杆菌铁蛋白(helicobacterpylori_ferritin，hpf)。
9、优选的，所述原始株的rbd突变体的蛋白序列包括：
10、(c1)、seq id no：1或者seq id no：3的的第474-692和698-916位所示，
11、(c2)、将(c1)任一种经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的具有相同功能的蛋白；
12、(c3)、与(c1)-(c2)任一种具有80％以上同一性且具有相同功能的蛋白。
13、优选的，所述原始株的rbd突变体的蛋白序列(rbd原始株突变体)包括8m1突变体和8m2突变体(8m18m2突变体)。
14、8m18m2突变体为8m1突变体与8m2突变体串联。优选的，所述8m1突变体与8m2突变体可以直接连接和/或间接连接，更优选的，所述间接连接包括通过连接肽进行连接。
15、优选的，所述融合蛋白还包括sars-cov-2的bq11的rbd蛋白序列(rbdbq11)和/或xbb的rbd蛋白序列(rbdxbb)。
16、优选的，所述bq11的rbd蛋白序列(rbdbq11)、xbb的rbd蛋白序列(rbdxbb)，原始菌株的rbd突变体的蛋白序列(rbd原始株突变体)、fc片段(fc)或者幽门螺旋杆菌铁蛋白(hpf)可以按照任一顺序进行连接，例如从n端到c端依次为：rbdbq11-rbdxbb-rbd原始株突变体-hpf、hpf-rbdbq11-rbdxbb-rbd原始株突变体、rbdxbb-rbdbq11-rbd原始株突变体-hpf、rbd原始株突变体-rbdbq11-rbdxbb-hpf、rbdbq11-rbd原始株突变体-rbdxbb-hpf、rbdxbb-rbd原始株突变体-rbdbq11-hpf、hpf-rbdxbb-rbd原始株突变体-rbdbq11、rbdbq11-rbdxbb-hpf、rbdxbb-rbdbq11-hpf等等，fc可以任意地取代上述hpf。
17、优选的，所述蛋白可以直接连接和/或间接连接，更优选的，所述间接连接包括通过连接肽进行连接。
18、优选的，所述融合蛋白还包括信号肽。
19、更优选的，所述xbb的rbd蛋白序列(rbdxbb)包括：
20、(a1)、seq id no：1的第26-244位所示或者seq id no：3的第250-468，
21、(a2)、将(a1)任一种经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的具有相同功能的蛋白；
22、(a3)、与(a1)-(a2)任一种具有80％以上同一性且具有相同功能的蛋白。
23、更优选的，所述bq11的rbd蛋白序列(rbdbq11)包括：
24、(b1)、seq id no：1的第250-468位所示或seq id no：3的第26-244位，
25、(b2)、将(b1)任一种经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的具有相同功能的蛋白；
26、(b3)、与(b1)-(b2)任一种具有80％以上同一性且具有相同功能的蛋白。
27、更优选的，所述hpf的蛋白序列包括：
28、(d1)、seq id no：3的第925-1089位所示，
29、(d2)、将(d1)任一种经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的具有相同功能的蛋白；
30、(d3)、与(d1)-(d2)任一种具有80％以上同一性且具有相同功能的蛋白。
31、更优选的，所述fc片段包括：
32、(e1)、seq id no：1的第第925-1152位。
33、(e2)、将(e1)任一种经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的具有相同功能的多肽；
34、(e3)、与(e1)-(e2)任一种具有80％以上同一性且具有相同功能的多肽。
35、更优选的，所述连接肽的序列包括：
36、(f1)、ggsgg或sgsgggsg
37、(f2)、将(f1)任一种经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的具有相同功能的多肽；
38、(f3)、与(f1)-(f2)任一种具有80％以上同一性且具有相同功能的多肽。
39、更优选的，所述信号肽的序列包括：
40、(g1)、seq id no：1或seq id no：3的第1-25位所示，
41、(g2)、将(g1)任一种经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白包括原始菌株的RBD突变体的蛋白序列(RBD原始株突变体)，优选的，所述突变体的蛋白序列包括如下突变：
2.根据权利要求1所述的融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白还包括Fc片段(Fc)或者幽门螺旋杆菌铁蛋白(HPF)，优选的，
3.根据权利要求1或2所述的融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白还包括SARS-CoV-2的BQ11的RBD蛋白序列(RBDBQ11)和/或XBB的RBD蛋白序列(RBDXBB)，
4.一种核苷酸分子，其特征在于，所述核苷酸分子编码权利要求1-3任一所述的融合蛋白。
5.根据权利要求4所述的核苷酸分子，其特征在于，所述核苷酸分子包括DNA和/或RNA，优选的，所述核苷酸分子包括：
6.一种载体，其特征在于，所述载体包括权利要求4-5任一所述的核苷酸分子。
7.一种宿主细胞，其特征在于，所述宿主细胞包括权利要求4-5任一所述的核苷酸分子或权利要求6所述的载体。
8.一种权利要求1-3任一所述融合蛋白的制备方法，其特征在于，所述制备方法包
9.一种权利要求1-3任一所述的融合蛋白、权利要求4-5任一所述的核苷酸分子、权利要求6所述的载体或者权利要求7所述的宿主细胞的应用，所述应用包括下述任一种：
10.一种疫苗，其特征在于，所述疫苗包括权利要求1-3任一所述的融合蛋白、权利要求4-5任一所述的核苷酸分子、权利要求6所述的载体或者权利要求7所述的宿主细胞，优选的，所述疫苗还包括佐剂。
...【技术特征摘要】
1.一种融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白包括原始菌株的rbd突变体的蛋白序列(rbd原始株突变体)，优选的，所述突变体的蛋白序列包括如下突变：
2.根据权利要求1所述的融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白还包括fc片段(fc)或者幽门螺旋杆菌铁蛋白(hpf)，优选的，
3.根据权利要求1或2所述的融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白还包括sars-cov-2的bq11的rbd蛋白序列(rbdbq11)和/或xbb的rbd蛋白序列(rbdxbb)，
4.一种核苷酸分子，其特征在于，所述核苷酸分子编码权利要求1-3任一所述的融合蛋白。
5.根据权利要求4所述的核苷酸分子，其特征在于，所述核苷酸分子包括dna和/或rna，优选的，所述核苷酸分子包括：
6.一种载体，其特征...
【专利技术属性】
技术研发人员：王希良，王亚丽，宋娅莉，徐骁，程晋霞，刘欣阳，李世崇，王莉，王立博，
申请(专利权)人：北京吉诺卫生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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