一种呼吸道合胞病毒的制造技术

本发明专利技术涉及一种呼吸道合胞病毒的核酸疫苗

【技术实现步骤摘要】
一种呼吸道合胞病毒的mRNA、其制备方法与应用


[0001]本专利技术属于生物医药领域，具体涉及一种呼吸道合胞病毒的
mRNA、
其制备方法与应用
。

技术介绍

[0002]RSV
是呼吸道合胞病毒
(Respiratory Syncytial Virus
，
RSV)
的简称，于
1955
年首次被发现，属于副黏病毒科
(Paramyxoviridae)
，肺炎病毒亚科
(Pneumovirinae)
，肺炎病毒属
(Pneumovirus)
，依据
G
蛋白的序列可分为
A
和
B
两个亚型
。RSV
为非节段性的负链
RNA
病毒，其基因组长度为
15.2kb
，有
10
个基因，共编码
11
种蛋白，包括非结构蛋白
(NS1
，
NS2)、
核蛋白
(N)、
磷蛋白
(P)、
基质蛋白
(M)、RNA
依赖
RNA
聚合酶
(L)、
转录延伸因子
(M2
‑
1)、
调控因子
(M2
‑
2)
和3种包膜糖蛋白
(
黏附蛋白
(G)、
融合蛋白
(F)
和小疏水蛋白
(SH))。
[0003]RSV
是引起呼吸道感染
(Respiratory tract infection
，
RTI)
的病毒性病原体，感染主要引起下呼吸道感染症状，其中严重症状的患者占有相当高的比例
(
如毛细支气管炎和肺炎
)
，需要住院治疗，具有较高的死亡率
。RSV
可以通过人与人之间接触传播，或者通过咳嗽或打喷嚏而吸入传播，也可通过接触污染物而获得感染，主要感染鼻腔以及肺部大
、
小气道的上皮细胞，也可能感染肺泡巨噬细胞和肺部其它类型的细胞，可引起细胞融合在一起形成合胞体
。
[0004]由于
RSV
是一种
RNA
病毒，容易在复制过程中出错，大量复制可引起多种变异，并且变异速度极快，因此经常会因为突变而出现免疫逃逸的现象，导致疫苗的保护性下降
。
随着
RSV
的不断进化，现有疫苗的保护效果受到不同程度的影响
。
[0005]因此，研究和开发更为有效的
、
进一步提高体液和细胞免疫，对于预防和
/
或治疗
RSV
感染具有重要的意义和广泛的临床应用前景
。

技术实现思路

[0006]为解决上述技术问题，本专利技术提供一种呼吸道合胞病毒的
mRNA、
其制备方法与应用，具体的，
[0007]本专利技术第一方面，提供一种
mRNA
，所述
mRNA
包含第一开放阅读框，所述第一开放阅读框包含编码单体亚基蛋白和来自
RSV
的至少一个免疫原性部分的核酸：所述单体亚基蛋白选自下组的单体铁蛋白亚基，单体
encapsulin
蛋白，单体
03
‑
33
蛋白，单体硫加氧酶还原酶蛋白，单体二氧四氢蝶啶合酶蛋白，和
/
或单体丙酮酸脱氢酶复合物二氢硫辛酰胺乙酰转移酶蛋白，所述第一开放阅读框表达的单体亚基蛋白自组装为纳米颗粒，且在所述纳米颗粒的表面上展示所述至少一个免疫原性部分
。
[0008]本专利技术第二方面，提供一种
mRNA
，所述
mRNA
至少包含两个开放阅读框，其中，第一开放阅读框包括编码选自下组的单体亚基蛋白的核酸：单体铁蛋白亚基，单体
encapsulin
蛋白，单体
03
‑
33
蛋白，单体硫加氧酶还原酶蛋白，单体二氧四氢蝶啶合酶蛋白，和
/
或单体丙酮酸脱氢酶复合物二氢硫辛酰胺乙酰转移酶蛋白，第二开放阅读框包括编码来自
RSV
的
至少一个免疫原性部分的核酸，所述第一开放阅读框表达的单体亚基蛋白能自组装为纳米颗粒，且第二开放阅读框表达的所述至少一个免疫原性部分能够与第一开放阅读框表达的所述纳米颗粒结合
。
[0009]优选的，在上述任意方面，
[0010]所述至少一个免疫原性部分选自
RSV
的
pre
‑
F
蛋白的突变蛋白，所述
pre
‑
F
蛋白的突变蛋白包括相对于野生型
pre
‑
F
蛋白的突变，所述突变包括在
pre
‑
F
蛋白的第
67、88、110、144、159、173、202、227、236、248、289、309、334、344、370、389、419
和
/
或
468
位中一个或者多个位点的突变
。
[0011]优选的，所述
pre
‑
F
蛋白的突变包括如下
1)
‑
19)
中至少一种突变后得到的突变蛋白：
[0012]1)
将
Pre
‑
F
蛋白氨基酸序列第
67
位的异亮氨酸
(I)
突变为天冬酰胺
(N)
，
I67N
，
[0013]2)
将
Pre
‑
F
蛋白氨基酸序列第
88
位的丝氨酸
(S)
突变为天冬酰胺
(N)
，
S88N
，
[0014]3)
将
Pre
‑
F
蛋白氨基酸序列第
110
位的半胱氨酸
(C)
突变为丙氨酸
(A)
，
C110A
，
[0015]4)
将
Pre
‑
F
蛋白氨基酸序列第
143
位和第
144
位氨基酸之间插入甘氨酸，
[0016]5)
将
Pre
‑
F
蛋白氨基酸序列在第
144
位天冬酰胺
(N)
突变为半胱氨酸
(C)
，
N144C
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种
mRNA
，其特征在于，所述
mRNA
包含第一开放阅读框，所述第一开放阅读框包含编码单体亚基蛋白和来自
RSV
的至少一个免疫原性部分的核酸：所述单体亚基蛋白选自下组的单体铁蛋白亚基，单体
encapsulin
蛋白，单体
03
‑
33
蛋白，单体硫加氧酶还原酶蛋白，单体二氧四氢蝶啶合酶蛋白，和
/
或单体丙酮酸脱氢酶复合物二氢硫辛酰胺乙酰转移酶蛋白，所述第一开放阅读框表达的单体亚基蛋白自组装为纳米颗粒，且在所述纳米颗粒的表面上展示所述来自
RSV
的至少一个免疫原性部分
。2.
一种
mRNA
，其特征在于，所述
mRNA
至少包含两个开放阅读框，其中，第一开放阅读框包括编码选自下组的单体亚基蛋白的核酸：单体铁蛋白亚基，单体
encapsulin
蛋白，单体
03
‑
33
蛋白，单体硫加氧酶还原酶蛋白，单体二氧四氢蝶啶合酶蛋白，和
/
或单体丙酮酸脱氢酶复合物二氢硫辛酰胺乙酰转移酶蛋白，第二开放阅读框包括编码来自
RSV
的至少一个免疫原性部分的核酸，所述第一开放阅读框表达的单体亚基蛋白能自组装为纳米颗粒，且第二开放阅读框表达的所述至少一个免疫原性部分能够与第一开放阅读框表达的所述纳米颗粒结合
。3.
权利要求1或2所述的
mRNA
，其特征在于，所述来自
RSV
的至少一个免疫原性部分选自
RSV
的
pre
‑
F
蛋白的突变蛋白，所述
pre
‑
F
蛋白的突变蛋白包括相对于野生型
pre
‑
F
蛋白的突变，所述突变包括：
1)S88N
，
2)S88N
和
E289N
，
3)S88N
和
N389C
，
4)S88N、E289N、S309N
和
R468N
，
5)I67N、S88N、N144C
和
N389C
，
6)I67N、S88N、C110A、N144C、E289N、S309N、N389C
和
R468N
，
7)I67N、S88N、143
与
144
位之间插入甘氨酸
、N144C、N389C。4.
根据权利要求1‑3任一所述的
mRNA
，其特征在于，所述单体亚基蛋白为铁蛋白或其突变体；所述铁蛋白突变体为将野生型铁蛋白氨基酸序列进行如下
b1)
‑
b...

【专利技术属性】
技术研发人员：王希良，张金灿，程晋霞，刘昕阳，李世崇，司炳银，王莉，王立博，
申请(专利权)人：北京吉诺卫生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：