【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物医药领域，具体涉及一种包括xbbbq11类抗体的融合蛋白构建体、制备方法及其在疫苗中的应用。
技术介绍
1、冠状病毒是一类主要感染脊椎动物的有包膜的单股正链rna病毒，因病毒包膜上有向四周伸出的突起，形如花冠而得名，广泛存在于人类、哺乳动物和鸟类宿主中。据悉，国际病毒分类委员会将冠状病毒分为四个属：α，β，γ和δ。β属冠状病毒又分a、b、c、d四个谱系，b谱系(又称sarbecoviruses)包括2019新型冠状病毒(sars-cov-2)及其变异株、严重急性呼吸综合征冠状病毒(sars-cov)及其变异株、sars相关的冠状病毒(sarsr-cov)。
2、sars-cov-2席卷全球，可导致covid-19，给人类工作生活造成了巨大的影响，随着sars-cov-2在不同地区的传播，出现不同的变异株，疫情态势仍持续紧张。截至目前，传播力超强的变异株有alpha(原始株)、beta、gamma、delta、lammda、omicron等变异株，未来很可能还有其它类型变异株出现。尽管研究表明接种疫苗可有效预防发病和降低感染后重症率和死亡率，但国内外均出现疫苗接种后突破性感染的案例，有研究表明这些变异株对疫苗均有不同程度的免疫逃逸能力。研发高效广谱的β冠状病毒b谱系的通用疫苗迫在眉睫。这样的疫苗不但能预防现在流行的sars-cov-2及其变异株的感染，也能预防未来再现的sars-cov感染或新发sars相关冠状病毒的感染。
3、sars-cov-2至今为止，中和表位主要集中在rbd区，nt
技术实现思路
1、为了克服上述缺陷，本专利技术提供一种包括xbbbq11类抗体的融合蛋白构建体、制备方法及其在疫苗中的应用的技术方案，具体的，
2、本专利技术第一方面，提供一种包括xbbbq11类抗体的融合蛋白构建体，所述融合蛋白构建体包括bq11的rbd蛋白序列、xbb的rbd蛋白序列，以及抗体恒定区蛋白序列。
3、优选的，所述恒定区包括轻链恒定区(lc)和重链恒定区(hc)。
4、优选的，所述bq11的rbd蛋白序列和xbb的rbd蛋白序列与不同的恒定区连接，更优选的，所述bq11的rbd蛋白序列与轻链恒定区蛋白序列连接形成bq11-lc类抗体，所述xbb的rbd蛋白序列与重链恒定区蛋白连接形成xbb-hc类抗体，或者，所述bq11的rbd蛋白序列与重链恒定区蛋白序列连接形成bq11-hc类抗体，所述xbb的rbd蛋白序列与轻链恒定区蛋白序列连接形成xbb-lc类抗体。
5、优选的，所述连接包括直接连接和/或间接连接，更优选的，所述间接连接包括通过连接肽进行连接。
6、所述轻链恒定区与重链恒定区经二硫键直接连接。
7、优选的，所述融合蛋白构建体还包括信号肽。
8、更优选的，所述bq11的rbd蛋白序列包括：
9、(a1)、seq id no：1的第26-244位所示，
10、(a2)、将(a1)任一种经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的具有相同功能的蛋白；
11、(a3)、与(a1)-(a2)任一种具有80％以上同一性且具有相同功能的蛋白。
12、更优选的，所述xbb的rbd蛋白序列包括：
13、(b1)、seq id no：2的第26-244位所示，
14、(b2)、将(b1)任一种经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的具有相同功能的蛋白；
15、(b3)、与(b1)-(b2)任一种具有80％以上同一性且具有相同功能的蛋白。
16、更优选的，所述抗体轻链恒定区的蛋白序列包括：
17、(c1)、seq id no：1的第254-358位所示，
18、(c2)、将(c1)任一种经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的具有相同功能的蛋白；
19、(c3)、与(c1)-(c2)任一种具有80％以上同一性且具有相同功能的蛋白。
20、更优选的，所述抗体重链恒定区的蛋白序列包括：
21、(d1)、seq id no：2的第254-581位所示，
22、(d2)、将(d1)任一种经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的具有相同功能的蛋白；
23、(d3)、与(d1)-(d2)任一种具有80％以上同一性且具有相同功能的蛋白。
24、更优选的，所述连接肽的序列包括：
25、(e1)、seq id no：1的第245-253位所示，或者seq id no：2的第245-253位所示，
26、(e2)、将(e1)任一种经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的具有相同功能的多肽；
27、(e3)、与(e1)-(e2)任一种具有80％以上同一性且具有相同功能的多肽。
28、更优选的，所述信号肽的序列包括：
29、(f1)、seq id no：1的第1-25位所示，或者seq id no：2的第1-25位所示，
30、(f2)、将(f1)任一种经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的具有相同功能的多肽；
31、(f3)、与(f1)-(f2)任一种具有80％以上同一性且具有相同功能的多肽。
32、本文中，同一性是指氨基酸序列同一性。可使用国际互联网上的同源性检索站点测定氨基酸序列的同一性，如ncbi主页网站的blast网页。例如，可在高级blast2.1中，通过使用blastp作为程序，将expect值设置为10，将所有filter设置为off，使用blosum62作为matrix，将gap existence cost，per residue gap cost和lambda ratio分别设置为11，1和0.85(缺省值)并进行检索以对氨基酸序列的同一性进行计算，然后即可获得本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种包括XBBBQ11类抗体的融合蛋白构建体，其特征在于，所述融合蛋白构建体包括BQ11的RBD蛋白序列、XBB的RBD蛋白序列，以及抗体恒定区蛋白序列。
2.根据权利要求1所述的融合蛋白构建体，其特征在于，所述恒定区序列包括轻链恒定区(LC)和重链恒定区(HC)，优选的，所述BQ11的RBD蛋白序列和XBB的RBD蛋白序列与不同的恒定区连接，更优选的，所述BQ11的RBD蛋白序列与轻链恒定区蛋白序列连接形成BQ11-LC类抗体，所述XBB的RBD蛋白序列与重链恒定区蛋白连接形成XBB-HC类抗体，或者，所述BQ11的RBD蛋白序列与重链恒定区蛋白序列连接形成BQ11-HC类抗体，所述XBB的RBD蛋白序列与轻链恒定区蛋白序列连接形成XBB-LC类抗体。
3.根据权利要求1或2所述的融合蛋白构建体，其特征在于，
4.一种核苷酸分子，其特征在于，所述核苷酸分子编码权利要求1-3任一所述的融合蛋白构建体。
5.根据权利要求4所述的核苷酸分子，其特征在于，所述核苷酸分子包括DNA和/或RNA，优选的，所述核苷酸分子包括：
7.一种宿主细胞，其特征在于，所述宿主细胞包括权利要求4-5任一所述的核苷酸分子或权利要求6所述的载体。
8.一种权利要求1-3任一所述融合蛋白构建体的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括将权利要求4-5任一所述的核苷酸分子或者权利要求6所述的载体导入到宿主细胞，培养所述宿主细胞，优选的，所述制备方法包括在非还原条件下，纯化所述融合蛋白构建体，获得通过LC与HC的二硫键连接的融合蛋白构建体。
9.一种权利要求1-3任一所述的融合蛋白构建体、权利要求4-5任一所述的核苷酸分子、权利要求6所述的载体或者权利要求7所述的宿主细胞的应用，所述应用包括下述任一种：
10.一种疫苗，其特征在于，所述疫苗包括权利要求1-3任一所述的融合蛋白构建体、权利要求4-5任一所述的核苷酸分子、权利要求6所述的载体或者权利要求7所述的宿主细胞，优选的，所述疫苗还包括佐剂。
...【技术特征摘要】
1.一种包括xbbbq11类抗体的融合蛋白构建体，其特征在于，所述融合蛋白构建体包括bq11的rbd蛋白序列、xbb的rbd蛋白序列，以及抗体恒定区蛋白序列。
2.根据权利要求1所述的融合蛋白构建体，其特征在于，所述恒定区序列包括轻链恒定区(lc)和重链恒定区(hc)，优选的，所述bq11的rbd蛋白序列和xbb的rbd蛋白序列与不同的恒定区连接，更优选的，所述bq11的rbd蛋白序列与轻链恒定区蛋白序列连接形成bq11-lc类抗体，所述xbb的rbd蛋白序列与重链恒定区蛋白连接形成xbb-hc类抗体，或者，所述bq11的rbd蛋白序列与重链恒定区蛋白序列连接形成bq11-hc类抗体，所述xbb的rbd蛋白序列与轻链恒定区蛋白序列连接形成xbb-lc类抗体。
3.根据权利要求1或2所述的融合蛋白构建体，其特征在于，
4.一种核苷酸分子，其特征在于，所述核苷酸分子编码权利要求1-3任一所述的融合蛋白构建体。
5.根据权利要求4所述的核苷酸分子，其特征在于，所述核苷酸分子包括dna...
【专利技术属性】
技术研发人员：王希良，王亚丽，宋娅莉，徐骁，程晋霞，刘欣阳，李世崇，王立博，
申请(专利权)人：北京吉诺卫生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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