非核糖体肽合成酶在生产脱羧肌肽中的应用制造技术

本发明专利技术提供了非核糖体肽合成酶在生产脱羧肌肽中的应用，属于生物技术领域。本发明专利技术首次发现非核糖体肽合成酶HiEbony具有催化组胺合成脱羧肌肽的能力，并且可用于提高脱羧肌肽的产量。所述HiEbony具有如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列，其编码基因核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明专利技术提供的HiEbony在重组菌株中过表达后，摇瓶发酵能将β‑Ala和组胺转化生成脱羧肌肽，产量显著提高，且具有工业放大优势。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物，具体涉及非核糖体肽合成酶在生产脱羧肌肽中的应用。

技术介绍

1、脱羧肌肽(carcinine)的化学名称为β-丙氨酰-l-组氨，是一种由β-丙氨酸和l-组氨构成的咪唑类二肽，分子式为c8h14n4o·2hcl，相对分子质量为255.14。脱羧肌肽在常温条件下呈白色或米色粉末，无味，常温下在水中溶解度大于15g/l。早在1975年，脱羧肌肽首次于甲壳类动物体内被发现，随后又陆续发现于哺乳动物心脏中。1994年，exsymol monaco首次将脱羧肌肽运用于化妆品领域。目前，脱羧肌肽商品常以脱羧肌肽盐酸盐形式(c8h14n4o·2hcl)存在。脱羧肌肽具有稳定性好、皮透性强、作用时间长、螯合金属离子等特性，因此在抗糖化(糖逆转)、抗氧化、抗炎方面具有较广泛的应用。

2、目前，市面上大多数脱羧肌肽的制备方式为化学合成法，即短肽合成技术。该制备方式存在制备工艺繁琐、操作复杂、副产物多、不易纯化、生产成本高等缺点。因此，需要不断摸索更加绿色、简便、成本低的脱羧肌肽制备工艺。

3、微生物发酵法生产脱羧肌肽具有生产成本低、反本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种非核糖体肽合成酶或其编码基因在生产脱羧肌肽中的应用，其特征在于，所述非核糖体肽合成酶为HiEbony或其突变体，所述HiEbony的氨基酸序列为SEQ ID NO.1。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述编码基因的核苷酸序列包括SEQ IDNO.2或与SEQ ID NO.2具有75％以上同源性的核苷酸序列。

3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述应用通过利用HiEbony上调的重组微生物发酵生产脱羧肌肽；或通过利用HiEbony上调的重组微生物的全细胞催化底物生产脱羧肌肽。

4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述全细...

【技术特征摘要】

1.一种非核糖体肽合成酶或其编码基因在生产脱羧肌肽中的应用，其特征在于，所述非核糖体肽合成酶为hiebony或其突变体，所述hiebony的氨基酸序列为seq id no.1。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述编码基因的核苷酸序列包括seq idno.2或与seq id no.2具有75％以上同源性的核苷酸序列。

3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述应用通过利用hiebony上调的重组微生物发酵生产脱羧肌肽；或通过利用hiebony上调的重组微生物的全细胞催化底物生产脱羧肌肽。

4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述全细胞包括培养液、细胞裂解液、细胞裂解液的上清部分或细胞裂解液的沉淀部分。

5.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述底物包...

【专利技术属性】
技术研发人员：利爱利，田锋，时铭，万丽花，闵杰，黄祝渊，陈思猛，解婷玉，
申请(专利权)人：苏州华赛生物工程技术有限公司，
类型：发明
国别省市：