一种从头高效合成二岩藻糖基乳糖的重组大肠杆菌构建及应用制造技术

本发明专利技术公开了一种从头高效合成二岩藻糖基乳糖的重组大肠杆菌构建及应用。该重组大肠杆菌为下述任一种：1)含有磷酸甘露糖变位酶基因、甘露糖‑1‑磷酸鸟苷基转移酶基因、GDP‑甘露糖‑4,6‑脱水酶基因和GDP‑L‑岩藻糖合成酶基因、α‑1,2‑岩藻糖基转移酶基因和α‑1,3/4‑岩藻糖基转移酶基因；2)含有1)的基因，不含有β‑半乳糖苷酶基因和UDP‑葡萄糖脂质载体转移酶基因中的至少一种，重组菌摇瓶发酵DFL产量高达5.07g/L；3)除具有2)的特征外，还含有甘露糖‑6‑磷酸异构酶基因；4)除具有3)的特征外，不含有GDP‑D‑甘露糖水解酶基因；5)除具有4)的特征外，α‑1,3/4‑岩藻糖基转移酶与热休克蛋白GroES和GroEL、麦芽糖结合蛋白MBP、硫氧还蛋白A TrxA、转录终止抗终止因子NusA和蛋白二硫异构酶DsbA基因中的至少一种共表达,重组菌摇瓶发酵DFL产量提高到6.58g/L；6)除具有5)的特征外，在重组菌分批补料发酵的过程中，采用氨水和氢氧化钠混合液调节发酵液的pH值和提供无机氮源。该重组大肠杆菌在5L发酵罐中DFL产量为30～50g/L之间，具有工业化生产的潜力。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于食品配料合成生物学中一种从头高效合成二岩藻糖基乳糖的重组大肠杆菌构建及应用。

技术介绍

1、人乳寡糖(human milk oligosaccharide，hmos)是母乳中仅次于乳糖和脂肪的第三大固体成分，其中含量最高的是岩藻糖基化人乳寡糖。岩藻糖基化人乳寡糖在促进婴幼儿的大脑发育和维持肠道菌群健康等方面发挥着重要作用。目前，美国、欧盟和澳大利亚等先后批准了几种岩藻糖基化人乳寡糖作为新食品原料使用，包括2'-岩藻糖基乳糖(2'-fucosyllactose,2'-fl)、3-岩藻糖基乳糖(3-fucosyllactose,3-fl)和二岩藻糖基乳糖(difucosyllactose,dfl)。与2'-fl和3-fl相比，dfl具有独特的功能，如dfl对无乳链球菌(streptococcus agalactiae)等b组链球菌具有很强的抗菌活性，无乳链球菌是新生儿败血症的主要原因，占全球死产的12％(nan c,et al.2015.“maternal group bstreptococcus-related stillbirth:a sys本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.重组大肠杆菌，其特征在于，所述重组大肠杆菌为下述任一种：

2.如权利要求所述的重组大肠杆菌，其特征在于，所述重组大肠杆菌还含有融合伙伴基因，所述融合伙伴基因与所述α-1,3/4-岩藻糖基转移酶基因形成融合基因，所述融合伙伴基因为下述任一种基因：

3.如权利要求所述1或2的重组大肠杆菌，其特征在于，

4.如权利要求所述1-3中任一所述的重组大肠杆菌，其特征在于，

5.如权利要求1-4中所述的重组大肠杆菌，其特征在于，所述重组大肠杆菌按照权利要求6或7所述的方法构建。

6.构建重组大肠杆菌的方法，其特征在于，所述方法包括对受体大...

【技术特征摘要】

1.重组大肠杆菌，其特征在于，所述重组大肠杆菌为下述任一种：

2.如权利要求所述的重组大肠杆菌，其特征在于，所述重组大肠杆菌还含有融合伙伴基因，所述融合伙伴基因与所述α-1,3/4-岩藻糖基转移酶基因形成融合基因，所述融合伙伴基因为下述任一种基因：

3.如权利要求所述1或2的重组大肠杆菌，其特征在于，

4.如权利要求所述1-3中任一所述的重组大肠杆菌，其特征在于，

5.如权利要求1-4中所述的重组大肠杆菌，其特征在于，所述重组大肠杆菌按照权利要求6或7所述的方法构建。

6.构建重组大肠杆菌的方法，其特征在于，所述方法包括对受体大肠杆菌...

【专利技术属性】
技术研发人员：江正强，梁山泉，杨绍青，刘丹，闫巧娟，
申请(专利权)人：中国农业大学，
类型：发明
国别省市：