【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及家畜品种培育及性状改良，尤其涉及利用从猪肌管提取的外泌体调控猪肌内脂肪细胞成脂分化。
技术介绍
1、猪肉是一种重要的日常肉类消费品。猪肉中含有适量肌内脂肪(大理石纹)才能使肉质优良，一般认为猪肉中2.5％-3％的肌内脂肪含量为最佳。骨骼肌是一种高度异质性的分泌型组织，约占机体体重40％，由肌纤维、肌膜、肌管和神经组成。猪肉肉质特性也受骨骼肌肌纤维成分的影响，特别是肌纤维数量和肌纤维直径及肌纤维类型等因素。其中，肌纤维密度和类型与肌肉嫩度和系水力密切相关，直接影响着猪肉的风味、多汁性、色泽(lee etal.2010)。
2、外泌体是直径介于30-150nm的一种能被细胞排出体外并被其他细胞摄取的微小囊泡。几乎所有细胞都可以通过释放外泌体将其部分细胞内容物输送到细胞外空间并被受体细胞吸收以此来介导与其他细胞或器官的交流。研究发现肌内前体脂肪细胞经体外成脂分化培养后所得成熟肌内脂肪细胞，可以分泌促进肌细胞脂质沉积的外泌体(赵蕊.猪肌内脂肪细胞外泌体的转录组测序分析及其对肌细胞脂质沉积的作用研究.西北农林科技大学,2021.doi:10.27409/d.cnki.gxbnu.2021.000282.)。但该研究中提取的肌内脂肪细胞来源的外泌体产量不高(浓度1.45×109个/ml)，且外泌体在应用中受其来源的限制。
3、骨骼肌也可以分泌外泌体，由于肌纤维和肌内脂肪之间生理解剖位置比较接近，所以外泌体可能介导它们之间的细胞间通讯。但目前并没有见到用以分离猪肌管来源外泌体的方法及应用的报道。
<...【技术保护点】
1.一种从猪肌管提取外泌体的方法，其特征在于：包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述一种从猪肌管提取外泌体的方法，其特征在于：所述步骤1中，将猪肌卫星细胞进行传代培养，传代培养至细胞覆盖率≥80％时在培养基中换用马血清并进行诱导分化。
3.根据权利要求1或2所述一种从猪肌管提取外泌体的方法，其特征在于：所述步骤1中，采用无外泌体的完全培养基培养猪肌卫星细胞。
4.根据权利要求1所述一种从猪肌管提取外泌体的方法，其特征在于：所述步骤2中，低速离心的条件依次为：3-5℃、100×g-200×g离心8-11min，3-5℃、300×g-500×g离心29-31min，3-5℃、1000×g-10000×g离心19-21min。
5.根据权利要求1所述一种从猪肌管提取外泌体的方法，其特征在于：所述步骤2中，超速离心的条件为：3-5℃、100000×g-150000×g离心1-2h。
6.猪肌管来源外泌体在调节猪肉质性状中的应用。
7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于：所述猪肌管来源外泌体促进猪肌内脂肪细胞成脂分化
8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于：所述肌内脂肪细胞是仔猪肌肉组织中的肌内前体脂肪细胞。
9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于：所述肌肉组织来源为背最长肌或半腱肌。
10.根据权利要求6所述的应用，其特征在于：所述猪肌管来源外泌体具体采用比目鱼肌来源肌卫星细胞诱导分化后提取获得。
...【技术特征摘要】
1.一种从猪肌管提取外泌体的方法，其特征在于：包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述一种从猪肌管提取外泌体的方法，其特征在于：所述步骤1中，将猪肌卫星细胞进行传代培养，传代培养至细胞覆盖率≥80％时在培养基中换用马血清并进行诱导分化。
3.根据权利要求1或2所述一种从猪肌管提取外泌体的方法，其特征在于：所述步骤1中，采用无外泌体的完全培养基培养猪肌卫星细胞。
4.根据权利要求1所述一种从猪肌管提取外泌体的方法，其特征在于：所述步骤2中，低速离心的条件依次为：3-5℃、100×g-200×g离心8-11min，3-5℃、300×g-500×g离心29-31min，3-5℃、1000×g-10000×g离心19-21min...
【专利技术属性】
技术研发人员：庞卫军，赵甜甜，喻赫，田婷婷，贺昭昭，张孜怡，
申请(专利权)人：西北农林科技大学，
类型：发明
国别省市：
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