【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于细胞分离领域，具体涉及一种细胞分离方法。
技术介绍
1、随着人工智能的快速发展，各行各业的智能化越来越明显。在涉及细胞分离的精准性和智能化程度上存在着不足。在医院、生物或医疗研究所等一些需要大量细胞分离的场所，在细胞液通过离心机分层后，在细胞分离的过程完全依靠肉眼判断和手工操作，这样不仅浪费了大量的人力财力，而且在操作的过程中可能会因为一些误操作导致目标细胞损失，甚至分离失败。
技术实现思路
1、本专利技术的目的是提供一种细胞分离方法，提高抽吸精度，提高工作效率，减少因人工操作失误引起的误差和损失。
2、为达到上述目的，本专利技术采用的一种技术方案是：
3、一种细胞分离方法，包括如下步骤：
4、(1)细胞样本在离心机内离心分层，分层后的细胞样本包括沿离心机中心向外依次分布的内细胞层、外细胞层；
5、(2)在离心分层过程中采集细胞样本分层图像，对采集的细胞样本分层图像进行处理，基于处理结果得到分层后的外细胞层的体积v外，其中，所述外细胞层体积v外通过以下公式得到：
6、v外＝πr2h-πr2h，
7、r为外细胞层最外侧与离心机中心的距离，r为内细胞层最外侧与离心机中心的距离，h为细胞样本的高度；
8、(3)转移外细胞层，当离心机内的外细胞层的体积v外等于v外设时停止转移，v外设为目标体积值，其中转移外细胞层过程实时采集细胞样本分层图像，并对采集的细胞样本分层图像进行处理。
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10、根据本专利技术的一些实施方面，步骤(2)中，对采集的细胞样本分层图像进行如下处理：
11、s1、对图像进行高斯滤波；
12、s2、对滤波后的图像进行边缘识别；
13、s3、对边缘检测结果进行膨胀处理。
14、膨胀处理后的白色直线即为细胞样本的分层界限，通过该步骤对细胞样本分层图像进行处理，可得到外细胞层的具体位置，便于计算外细胞层的体积。
15、根据本专利技术的一些实施方面，步骤(2)中，间隔n秒采集一张细胞样本分层图像；步骤(3)中，间隔m秒采集一张细胞样本分层图像，m小于n。步骤(2)中，分层可能还未完成，间隔一段较长时间后再采集细胞样本分层图像，减少工作量；当分层完成并稳定后，需要尽快计算分层后的外细胞层的体积，间隔一段较短时间后采集细胞样本分层图像，便于在较快时间内转移外细胞层。
16、根据本专利技术的一些实施方面，n大于等于20小于等于50，n优选为30；m大于0小于等于5，m优选为1。
17、根据本专利技术的一些实施方面，可先间隔n1秒采集一张细胞样本分层图像，再间隔n2秒采集一张细胞样本分层图，接下来间隔n3……ni秒采集一张细胞样本分层图，n1、n2、n3……ni可依次减小，这样设置更灵活，减少工作量的同时较快得到外细胞层的体积。
18、根据本专利技术的一些实施方面，步骤(3)中，转移外细胞层之前降低离心机转速，这样操作可在保证细胞分层正常的情况下，将外细胞层更好更快地吸出，以保证抽吸精度。
19、根据本专利技术的一些实施方面，在步骤(3)之前，若离心过程中外细胞层的体积不变，则进行转移外细胞层操作；若离心过程中外细胞层的体积变化，继续离心操作直至外细胞层的体积不变。离心过程中外细胞层的体积不变，说明分层完成，分层完成才进行步骤(3)，这样保证步骤(3)中抽吸外细胞层的精度，保证分离精度。
20、根据本专利技术的一些实施方面，在步骤(3)之后还包括：(4)转移内细胞层，当离心机内的内细胞层的体积v内等于v内设时停止转移，v内设为目标体积值，其中，转移过程中实时采集细胞样本分层图像，并对采集的细胞样本分层图像进行处理，并基于处理结果得到分层后的内细胞层的体积v内，所述内细胞层体积v内通过以下公式得到：
21、v内＝πr2h-πr12h，
22、其中，r为内细胞层最外侧与离心机中心的距离，r1为内细胞层最内侧与离心机中心的距离。
23、该步骤可实现离心机内保留定量的内细胞层溶液。
24、根据本专利技术的一些实施方面，所述的方法通过以下装置实现，所述的装置包括：
25、离心机，所述离心机包括顶盖、底座、第一输送通道，所述顶盖由透明材质制成，所述顶盖与所述底座围合形成离心室，所述顶盖上设置有沿其径向延伸的刻度；所述第一输送通道伸入所述离心室内用于转移外细胞层；
26、图像获取模块，所述图像获取模块用于采集细胞样本分层图像；
27、图像处理模块，所述图像处理模块用于对采集的细胞样本分层图像进行处理，其中，根据内细胞层与外细胞层之间的分层界限对应的刻度、刻度对应的像素，得到内细胞层的最外侧与离心机中心的距离r；
28、液体转移模块，所述液体转移模块与所述第一输送通道连通，用于为转移外细胞层提供动力；
29、驱动模块，所述驱动模块与所述离心机连接用于驱动所述离心机转动；
30、控制器，所述控制器与所述图像处理模块、液体转移模块、驱动模块均连接。
31、根据本专利技术的一些实施方面，所述顶盖上侧设置有支撑部，所述支撑部沿所述顶盖的径向设置，所述支撑部具有水平面、位于水平面两侧下方的倾斜面，其中一个倾斜面向靠近另一个倾斜面方向倾斜，所述刻度设置在倾斜面上，所述刻度与水平面形成锐角夹角。
32、根据本专利技术的一些实施方面，所述装置还包括第二输送通道、第一夹管阀、第二夹管阀，所述第二输送通道伸入所述离心室内用于转移内细胞层；所述第一夹管阀与所述第一输送通道连通，所述第二夹管阀与所述第二输送通道连通；
33、步骤(3)中，当转移外细胞层时，打开所述第一夹管阀，关闭所述第二夹管阀。
34、由于上述技术方案运用，本专利技术与现有技术相比具有下列优点：
35、本专利技术提供的细胞分离方法，在细胞样本分层后采集样本细胞分层图像，并对采集的细胞样本分层图像进行处理，基于处理结果得到分层后的外细胞层的体积，根据体积进行外细胞层转移，实现离心机内保留定量的外细胞层溶液，提高分离精度，提高工作效率，减少因人工操作失误引起的损失。
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1.一种细胞分离方法，其特征在于，包括：
2.根据权利要求1所述的细胞分离方法，其特征在于，所述离心机包括顶盖、底座、第一输送通道，所述顶盖由透明材质制成，所述顶盖与所述底座围合形成离心室，所述顶盖上设置有沿其径向延伸的刻度，所述第一输送通道伸入所述离心室内用于转移外细胞层。
3.根据权利要求2所述的细胞分离方法，其特征在于，所述外细胞层体积V外通过以下公式得到：
4.根据权利要求3所述的细胞分离方法，其特征在于，所述内细胞层的最外侧与离心机中心的距离r通过以下公式获得：
5.根据权利要求4所述的细胞分离方法，其特征在于，若所述外细胞层和内细胞层的分层界限对应的像素位于相邻两个刻度对应的像素(Yi、Yi-1)之间，k为Yi所对应的刻度与离心室内壁之间的间距；或者若Y1所对应的刻度对应离心室内壁，则k为Yi-1所对应的刻度与Y1所对应的刻度之间的间距。
6.根据权利要求5所述的细胞分离方法，其特征在于，i为2、3、4、5、6或7。
7.根据权利要求6所述的细胞分离方法，其特征在于，i为7，分别为第一刻度、第二刻
8.根据权利要求4所述的细胞分离方法，其特征在于，在转移外细胞层之后还包括：转移内细胞层，当离心机内的内细胞层的体积V内等于V内设时停止转移，V内设为目标体积值，其中，转移过程中实时采集细胞样本分层图像，并对采集的细胞样本分层图像进行处理，并基于处理结果得到分层后的内细胞层的体积V内，所述内细胞层体积V内通过以下公式得到：
9.根据权利要求1所述的细胞分离方法，其特征在于，V外设为20-60ml。
10.根据权利要求1所述的细胞分离方法，其特征在于，对采集的细胞样本分层图像进行如下处理：
...【技术特征摘要】
1.一种细胞分离方法，其特征在于，包括：
2.根据权利要求1所述的细胞分离方法，其特征在于，所述离心机包括顶盖、底座、第一输送通道，所述顶盖由透明材质制成，所述顶盖与所述底座围合形成离心室，所述顶盖上设置有沿其径向延伸的刻度，所述第一输送通道伸入所述离心室内用于转移外细胞层。
3.根据权利要求2所述的细胞分离方法，其特征在于，所述外细胞层体积v外通过以下公式得到：
4.根据权利要求3所述的细胞分离方法，其特征在于，所述内细胞层的最外侧与离心机中心的距离r通过以下公式获得：
5.根据权利要求4所述的细胞分离方法，其特征在于，若所述外细胞层和内细胞层的分层界限对应的像素位于相邻两个刻度对应的像素(yi、yi-1)之间，k为yi所对应的刻度与离心室内壁之间的间距；或者若y1所对应的刻度对应离心室内壁，则k为yi-1所对应的刻度与y1所对应的刻度之间的间距。
6.根据权利要求5所...
【专利技术属性】
技术研发人员：迟深，孟锐锋，赵悦，高亚奇，
申请(专利权)人：苏州欣协生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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