一种高分子改性微米磁珠及其制备方法及应用技术

本发明专利技术涉及一种高分子改性微米磁珠及其制备方法。该高分子改性微米磁珠包括裸磁珠和包被在裸磁珠表面的高分子层，高分子层的原料包括聚乙二醇、乙烯

【技术实现步骤摘要】
一种高分子改性微米磁珠及其制备方法及应用


[0001]本专利技术属于纳米材料
，具体涉及一种高分子改性微米磁珠及其制备方法及应用。

技术介绍

[0002]细胞筛选是在医学、生物学等领域非常重要的一个操作，通过细胞筛选得到特定的细胞可以用于临床诊断、组织修复和癌症治疗(Wenjuan,S.et al.Food Research International,2022,162,111952
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111952.)。因此，细胞高效筛选对于细胞疗法的治疗效果具有决定性意义。
[0003]目前常见的细胞筛选方法包括密度梯度离心、流式分选和免疫磁珠分选。密度梯度离心筛选细胞是通过离心力筛选细胞，使用这种方法进行筛选细胞时，离心操作时间较长，操作严格，而且分离效率低。流式分选是通过荧光标记来进行筛选细胞，筛选出的细胞纯度高，回收率高，但是设备较为昂贵，不能大面积推广。免疫磁珠是近几年兴起的细胞分离技术，它是利用抗原和抗体之间的特异性识别来进行对目的细胞的快速分离，使用这种方法进行分选不仅纯度高、重复性好、操作简单而且不影响细胞活性。用于免疫磁珠分选的分选柱是一种类似于注射器的柱体材料，它的腔体中填充有能放大磁场的磁珠。当带有特异性标记的细胞通过分选柱时，在外加磁场下，标记的细胞会被吸附在腔体中的带有磁性的微球上。而未被标记的细胞会先行流出，待未标记的细胞流完之后，去除磁场，此时再次洗脱分选柱，磁力消失后，被标记的细胞会流出。
[0004]在分选柱中，用于细胞筛选的磁性微球应当同时具有较好的亲水性、生物相容性以及顺磁性。通常采用包埋法对磁性微球进行表面改进。其中包衣液组分及包衣方法是决定磁性微球的包衣效果以及改性磁珠的性能的关键因素。开发更多的性能优越的高分子改性微米能够为细胞筛选提供更多的选择。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的是提供一种分散性好且具有优异的亲水性、生物相容性以及顺磁性的高分子改性微米磁珠及其制备方法。
[0006]本专利技术的另一目的是提供含有上述高分子改性微米磁珠的细胞分选柱。
[0007]本专利技术的再一目的是提供上述高分子改性微米磁珠或上述细胞分选柱在细胞筛选中的应用。
[0008]为达到上述目的，本专利技术采用的技术方案是：
[0009]一种高分子改性微米磁珠，所述高分子改性微米磁珠包括裸磁珠和包被在所述裸磁珠表面的高分子层，所述高分子层的原料包括聚乙二醇、乙烯
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乙酸乙烯共聚物和流平剂，所述聚乙二醇、乙烯
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乙酸乙烯共聚物和裸磁珠的投料质量之比为(4～6)：1：(10～40)，以所述聚乙二醇和乙烯
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乙酸乙烯共聚物的质量之和计，所述流平剂的用量为60～100μL/g，例如60μL/g、70μL/g、80μL/g、90μL/g、100μL/g。
[0010]本专利技术的高分子改性微米磁珠有着出色的亲水性和生物相容性，可以作为与细胞直接接触的材料，且高分子层对裸磁珠的顺磁性影响很小，能够保证其良好的筛选细胞功能。
[0011]优选地，所述聚乙二醇的平均分子量为5500～6500，例如5500、5600、5700、5800、5900、6000、6100、6200、6300、6400、6500。
[0012]优选地，所述乙烯
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乙酸乙烯共聚物的数均分子量为110～114。
[0013]优选地，所述裸磁珠为四氧化三铁磁珠。
[0014]优选地，所述裸磁珠的粒径为300～600μm。
[0015]优选地，所述流平剂为聚醚改性聚二甲基硅氧烷。
[0016]本专利技术还提供上述高分子改性微米磁珠的制备方法，将所述聚乙二醇、乙烯
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乙酸乙烯共聚物、裸磁珠和流平剂在有机溶剂中混合，然后旋蒸去除有机溶剂，得到的中间体经烘烤、紫外辐照得到所述的高分子改性微米磁珠。
[0017]本专利技术通过旋蒸法将高分子层负载在Fe3O4微球上，所形成的高分子层不仅包裹完整、均一，而且可以反复利用溶剂，提升利用率，降低对环境污染。
[0018]优选地，将所述聚乙二醇、乙烯
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乙酸乙烯共聚物、裸磁珠和流平剂在有机溶剂中混合后，先使用细胞破碎仪破碎细胞，再进行所述旋蒸。
[0019]优选地，所述旋蒸结束后，得到的中间体先经醇类物质清洗，再进行所述烘烤。
[0020]优选地，所述有机溶剂为氯仿、二甲基亚砜、乙醇或N,N
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二甲基甲酰胺中的一种或多种。
[0021]优选地，以所述聚乙二醇和乙烯
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乙酸乙烯共聚物的质量之和计，所述有机溶剂的用量为180～300mL/g，例如180mL/g、200mL/g、220mL/g、240mL/g、260mL/g、280mL/g、300mL/g。
[0022]优选地，控制所述旋蒸的压力为20～50KPa，旋转速度为100～400r/min，旋蒸温度为40～80℃。
[0023]优选地，控制所述烘烤的温度为40～90℃，例如40℃、50℃、60℃、70℃、80℃、90℃。
[0024]进一步优选地，控制所述烘烤的温度为40～60℃。
[0025]优选地，控制所述烘烤的时间为1～8h，例如1h、2h、3h、4h、5h、6h、7h、8h。
[0026]进一步优选地，控制所述烘烤的时间为5～8h。
[0027]优选地，控制紫外辐照的波长为200～275nm，功率为5w。
[0028]优选地，控制紫外辐照的时间为1～5h，例如1h、2h、3h、4h、5h。
[0029]进一步优选地，控制紫外辐照的时间为1～2h。
[0030]根据一些具体且优选地实施方式，所述制备方法包括如下步骤：
[0031](1)将聚乙二醇和乙烯
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乙酸乙烯共聚物溶解于有机溶剂中得到溶液A；
[0032](2)向所述溶液S1中加入流平剂并搅拌均匀，使用细胞破碎仪破碎细胞，得到溶液B；
[0033](3)向所述溶液B中加入四氧化三铁磁珠，旋蒸去除所述有机溶剂，得到中间体；
[0034](4)使用醇类物质洗涤所述中间体，然后烘烤、紫外辐照所述中间体得到所述的高分子改性微米磁珠。
[0035]进一步优选地，步骤(2)中，采用磁力搅拌，控制搅拌速度为300～800r/min，搅拌温度为40～80℃。
[0036]进一步优选地，步骤(2)中，控制细胞破碎仪的功率为50～100W。
[0037]进一步优选地，步骤(3)中，控制所述旋蒸的压力为20～50KPa，旋转速度为100～400r/min，旋蒸温度为40～80℃。
[0038]进一步优选地，步骤(4)中，所述醇类为乙醇或甲醇。
[0039]进一步优选地，步骤(4)中，控制所述烘烤的温度为40～90℃，控制所述烘烤的时间为1～8h，控制紫外辐照的波长为200～275nm，功率为4～8w，控制本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种高分子改性微米磁珠，其特征在于：所述高分子改性微米磁珠包括裸磁珠和包被在所述裸磁珠表面的高分子层，所述高分子层的原料包括聚乙二醇、乙烯
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乙酸乙烯共聚物和流平剂，所述聚乙二醇、乙烯
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乙酸乙烯共聚物和裸磁珠的投料质量之比为(4～6)：1：(10～40)，以所述聚乙二醇和乙烯
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乙酸乙烯共聚物的质量之和计，所述流平剂的用量为60～100μL/g。2.根据权利要求1所述的高分子改性微米磁珠，其特征在于：所述聚乙二醇的平均分子量为5500～6000；和/或，所述乙烯
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乙酸乙烯共聚物的数均分子量为110～114；和/或，所述裸磁珠为四氧化三铁磁珠；和/或，所述裸磁珠的平均粒径为400～600μm；和/或，所述流平剂为聚醚改性聚二甲基硅氧烷。3.如权利要求1或2所述的高分子改性微米磁珠的制备方法，其特征在于：将所述聚乙二醇、乙烯
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乙酸乙烯共聚物、裸磁珠和流平剂在有机溶剂中混合，然后旋蒸去除有机溶剂，得到的中间体经烘烤、紫外辐照得到所述的高分子改性微米磁珠。4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于：将所述聚乙二醇、乙烯
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乙酸乙烯共聚物、裸磁珠和流平剂在有机溶剂中混合后，先使用细胞破碎仪破碎细胞，再进行所述旋蒸；和/或，所述旋蒸结束后，得到的中间体先经醇类物质清洗，再进行所述烘烤。5.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于：所述有机溶剂为氯仿、二甲基亚砜、乙醇或N,N
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二甲基甲酰胺中的一种或多种；和/或，以所述聚乙二醇和乙烯
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乙酸乙烯共聚物的质量之和计，所述有机溶剂的用量为180～300mL/g。6.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于：控制所述旋蒸的压力为20～50KPa，旋转速度为100...

【专利技术属性】
技术研发人员：迟深，赵悦，孟锐锋，张进，肖培杰，
申请(专利权)人：苏州欣协生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：