阳离子脂质及包含其的脂质载体、核酸脂质纳米颗粒组合物在细胞转染中的应用及其方法技术

本发明专利技术涉及一种阳离子脂质及包含其的脂质载体、核酸脂质纳米颗粒组合物在细胞转染中的应用及其方法。具体而言，该脂质载体或核酸脂质纳米颗粒组合物中的阳离子脂质选自式(I)化合物或式(II)化合物，转染方法的具体步骤为：使脂质载体负载核酸，形成核酸脂质纳米颗粒组合物，随后加入至干细胞或免疫细胞中进行孵育、培养。该方法通过改变核酸脂质纳米颗粒组合物的成分及组成，有效提升了核酸在干细胞和免疫细胞中的转染效率，且表现出很高的生物安全性，除此之外该转染条件温和，操作简单，易于放大，适于推广应用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物，具体涉及一种阳离子脂质及包含其的脂质载体、核酸脂质纳米颗粒组合物在细胞转染中的应用，以及一种利用该阳离子脂质及包含其的脂质载体、核酸脂质纳米颗粒组合物提升细胞(特别是干细胞或免疫细胞)转染效率的方法，在此基础之上，核酸脂质纳米颗粒组合物在免疫细胞中的高效转染能够有效刺激免疫细胞扩增。

技术介绍

1、转染是一种能够将外源基因导入真核细胞内的专业技术。随着分子生物学和细胞生物学研究的不断发展，转染已经成为研究和控制真核细胞基因功能的常用工具，广泛应用在基因功能研究、调控基因表达、突变分析和蛋白质生产等生物学实验中。根据导入的核酸存在于宿主细胞内时间的长短，转染可以分为瞬时转染(瞬转)和稳定转染(稳转)；根据转染方式，转染可以大致分为物理转染、化学转染和生物转染。上述转染方式各有优缺点，因此，根据需求选择简单、合适、安全性高且高效的转染方法很重要。

2、然而，对于难以高效转染的干细胞和免疫细胞而言，目前市面上的转染试剂(如lipo 2000，如附图1所示，其将egfp转染到t细胞中的转染效率不足5％)以及商业化的阳离子脂质所形成的本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种阳离子脂质或包含其的脂质载体或核酸脂质纳米颗粒组合物在干细胞或免疫细胞转染中的应用，其特征在于，所述阳离子脂质为式(I)化合物或式(II)化合物中的一种或多种的组合，或者其药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构体、溶剂化物、螯合物、非共价复合物或前体药物，

2.一种提升细胞转染效率的方法，所述方法包括以下步骤：

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述脂质载体与所述核酸的质量比为(1～50):1，优选(1～30):1；和/或

4.根据权利要求2或3所述的方法，其特征在于，所述核酸脂质纳米颗粒组合物的粒径为40nm-500nm，优选为60n...

【技术特征摘要】

1.一种阳离子脂质或包含其的脂质载体或核酸脂质纳米颗粒组合物在干细胞或免疫细胞转染中的应用，其特征在于，所述阳离子脂质为式(i)化合物或式(ii)化合物中的一种或多种的组合，或者其药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构体、溶剂化物、螯合物、非共价复合物或前体药物，

2.一种提升细胞转染效率的方法，所述方法包括以下步骤：

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述脂质载体与所述核酸的质量比为(1～50):1，优选(1～30):1；和/或

4.根据权利要求2或3所述的方法，其特征在于，所述核酸脂质纳米颗粒组合物的粒径为40nm-500nm，优选为60nm-300nm；

5.根据权利要求2-4任一项所述的方法，其特征在于，所述核酸为dna、sirna、mrna、dsrna、反义核酸、微rna、反义微rna、antagomir、微rna抑制剂、微rna激活剂和免疫刺激性核酸中的一种或多种的组合。

6.根据权利要求2-5任一项所述的方法，其特征在于，所述干细胞为脂肪干细胞、脐带间充质干细胞、胚胎干细胞、造血干细胞、生殖干细胞、神经干细胞、肝脏干细胞、胰腺干细胞和成肌细胞等中的一种或多种的组合；所述免疫细胞为t淋巴细胞、b淋...

【专利技术属性】
技术研发人员：高银佳，黄珂，黄龙岳，葛童童，赵亮，孙振华，
申请(专利权)人：苏州科锐迈德生物医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：