【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物技术和生物能源领域，具体涉及一种产油蹄形藻及其培养应用。
技术介绍
1、进入21世纪以来，经济的发展与能源的消耗存在着密切的关系，能源安全问题是各国战略性的问题，寻找一种清洁、经济、高效、可再生的新能源成为了当前急需解决的问题，其中生物能源一直作为一个重要储备技术方向，各个国家都对此保持着兴趣。在诸多的生物质能源中，微藻具有光合作用效率高、生长速率快、生物质产量高、环境适应能力强等优点，且不与粮争地，不与人争粮，从微藻中得到的脂肪酸可转化成脂肪酸甲脂，即生物柴油，因此富含油脂的微藻常被认为是第三代生物燃料的理想原料。
2、微藻细胞在生长过程中积累油脂、淀粉、蛋白、色素等成分，某些藻类中淀粉和糖原含量占细胞干重的30%，也有一些藻类在特定培养条件下油脂含量可高达80%。微藻的太阳能转化效率可达到3.5%，是生产药品、精细化工品的潜在资源，如何有效的筛选获得具有高油脂含量、环境适应能力强、可规模化培养且成本较低的新藻种，便成了各国工作者研究的重点。
3、文献“蹄形藻和单针藻生长与油脂合成影响因素的研究”（徐阳，硕士学位论文，2013）探究营养元素对两种微藻蹄形藻( kirchneriella sp. zp-1)和单针藻( monoraphidium sp. zp-2)生长及产油情况的影响。agp实验探究了mg2+、ca2+、fe3+、zn2+、mn2+、no3-、hpo42-等离子，以及吲哚乙酸(iaa)、萘乙酸(naa)、6-苄氨基腺
4、然而，目前分离出来的微藻功能往往较为单一，且抗生物污染能力（如具有化学防御能力、耐受极端环境等）有待提升。因此选育具有耐受能力强、功能多样的微藻将有利于扩大微藻的应用领域，使其更适于工业化应用。
技术实现思路
1、针对现有技术的不足，本专利技术提供了一株产油蹄形藻及其培养应用。本专利技术提供的产油蹄形藻能利用co2生长，获得富含油脂的生物质，并且耐受铜离子能力强，能够吸附一定量的铜离子。
2、本专利技术提供了一株产油蹄形藻（ kirchneriellalunaris）tmj-b4，已于2021年04月23日日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为cgmcc no.22394。
3、本专利技术提供的蹄形藻（ kirchneriellalunaris）tmj-b4在显微镜下藻细胞为绿色，藻细胞常4-8个聚集一组，单个细胞弯曲成蹄形或镰刀形，长4-6μm，中央宽1-3μm。
4、本专利技术提供的蹄形藻（ kirchneriellalunaris）tmj-b4能够耐受的co2浓度可达30v%，能够耐受的铜离子浓度不高于160ppm。
5、本专利技术提供的蹄形藻（ kirchneriellalunaris）tmj-b4的18s rdna基因测序分析结果见序列表。根据序列比对，蹄形藻（ kirchneriellalunaris）tmj-b4与已公布的蹄形藻的18s rdna存在一定差异。
6、本专利技术还提供了一种蹄形藻（ kirchneriellalunaris）tmj-b4的培养方法，在光生物反应器中，利用淡水培养基培养，通入co2含量为1.0v%-30v%，优选5v%-20v%的气体。培养条件为：光照强度1500-20000lux，ph值为6-10，温度为15-35℃，优选20-30℃，光照周期为24h，光暗时间比为14:10-10:14，培养至稳定期结束，收获微藻细胞。经检测，藻细胞干重达到5g/l以上，细胞总脂含量占细胞干重的45%以上。
7、本专利技术培养方法中，所述的淡水培养基为bg11培养基、se培养基或d1培养基等中的任意一种。
8、本专利技术所述的蹄形藻（ kirchneriellalunaris）tmj-b4在固定co2中的应用。该藻株能够利用co2进行光照自养生长，具有较高的co2固定效率，能够耐受的co2浓度可达30v%。
9、本专利技术所述的蹄形藻（ kirchneriellalunaris）tmj-b4在生产微藻油脂中的应用。该藻株在适宜生长条件下进行光照自养生长获取富含油脂的藻细胞，藻细胞干重达5g/l以上，细胞总脂含量占细胞干重的45%以上。
10、本专利技术所述的蹄形藻（ kirchneriellalunaris）tmj-b4在吸附铜离子中的应用。该藻株能够吸附一定浓度的铜离子，不影响微藻的正常生长，体系中铜离子浓度不高于160ppm，铜离子去除率高于80%。
11、与现有技术相比，本专利技术具有以下有益效果：
12、（1）本专利技术筛选得到的蹄形藻（ kirchneriellalunaris）tmj-b4，能够利用co2在自养条件高效生长，固碳效率高，缓解目前工业社会所带来的co2温室效应问题。
13、（2）蹄形藻（ kirchneriellalunaris）tmj-b4能够吸附一定浓度的铜离子，铜离子浓度不高于160ppm，铜离子去除率高于80%。
14、（3）蹄形藻（ kirchneriellalunaris）tmj-b4所得藻细胞的经济性高，在常规培养条件下，藻细胞干重可达5g/l，细胞总脂含量占细胞干重的45%以上，可作为生物柴油及其他油脂产品的生产原料。
15、生物材料保藏说明
16、本专利技术提供的蹄形藻（ kirchneriella lunaris）tmj-b4，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心；保藏编号：cgmcc no.22394；保藏日期：2021年04月23日；保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所。
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1.一株产油蹄形藻，为蹄形藻（Kirchneriellalunaris）TMJ-B4，已于2021年04月23日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No. 22394。
2.根据权利要求1所述的蹄形藻，其特征在于：蹄形藻（Kirchneriellalunaris）TMJ-B4在显微镜下藻细胞为绿色，藻细胞常4-8个聚集一组，单个细胞弯曲成蹄形或镰刀形，长4-6μm，中央宽1-3μm。
3.根据权利要求1所述的蹄形藻，其特征在于：蹄形藻（Kirchneriellalunaris）TMJ-B4能够耐受的CO2浓度达30v%，能够耐受的铜离子浓度不高于160ppm。
4.一种蹄形藻（Kirchneriellalunaris）TMJ-B4的培养方法，其特征在于：在光生物反应器中，利用淡水培养基培养，通入CO2含量为1.0v%-30v%，优选5v%-20v%的气体。
5.根据权利要求4所述的培养方法，其特征在于：培养条件为：光照强度1500-20000Lux，pH值为6-10，温度为15-35℃，优选20-
6.根据权利要求4所述的培养方法，其特征在于：所述的淡水培养基为BG11培养基、SE培养基或D1培养基中的任意一种。
7.权利要求1所述的蹄形藻（Kirchneriellalunaris）TMJ-B4在固定CO2中的应用。
8.权利要求1所述的蹄形藻（Kirchneriellalunaris）TMJ-B4在生产微藻油脂中的应用。
9.权利要求1所述的蹄形藻（Kirchneriellalunaris）TMJ-B4在吸附铜离子中的应用。
10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于：该藻株能够吸附一定浓度的铜离子，体系中铜离子浓度不高于160ppm，铜离子去除率高于80%。
...【技术特征摘要】
1.一株产油蹄形藻，为蹄形藻（kirchneriellalunaris）tmj-b4，已于2021年04月23日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为cgmcc no. 22394。
2.根据权利要求1所述的蹄形藻，其特征在于：蹄形藻（kirchneriellalunaris）tmj-b4在显微镜下藻细胞为绿色，藻细胞常4-8个聚集一组，单个细胞弯曲成蹄形或镰刀形，长4-6μm，中央宽1-3μm。
3.根据权利要求1所述的蹄形藻，其特征在于：蹄形藻（kirchneriellalunaris）tmj-b4能够耐受的co2浓度达30v%，能够耐受的铜离子浓度不高于160ppm。
4.一种蹄形藻（kirchneriellalunaris）tmj-b4的培养方法，其特征在于：在光生物反应器中，利用淡水培养基培养，通入co2含量为1.0v%-30v%，优选5v%-20v%的气体。
5.根据权...
【专利技术属性】
技术研发人员：师文静，樊亚超，张霖，
申请(专利权)人：中国石油化工股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
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