【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及农业生物，尤其涉及一种osgms5pro启动子及其应用。
技术介绍
1、转基因技术已经成为研究基因功能的基础研究和应用研究领域不可或缺的技术之一，启动子作为驱动基因表达的重要功能顺式作用元件，在转基因技术中占据重要地位。启动子按其表达方式可分为组成型启动子、诱导型启动子和时空特异型启动子三类。组成型启动子能够在所有或大多数组织中启动基因转录，使基因表达具有时空持续性和表达恒定性。诱导型启动子能够在某些物理或化学信号的刺激下启动或大幅提高基因表达量，它们具有增强子、沉默子或类似功能的序列结构，并表现出明显的专一性。时空特异型启动子只在特定的生长阶段或部位中启动基因表达。深入研究启动子的表达模式既有利于理解基因的表达调控机制和生物学功能，又有助于有效调控外源基因的表达。
2、目前，在植物转化过程中应用较多的启动子主要是花椰菜花病毒的启动子(camv35spro)和玉米多聚泛素蛋白基因启动子(zmubipro)。camv35spro是植物dna病毒的启动子，在应用于植物转基因中时，可能引起不必要的担忧；zmubipro虽然来源于植物，但在转化时频繁使用同一种启动子易导致转基因沉默。
3、因此，挖掘新的高效的组成型启动子，尤其是植物本源的、生物安全性好的启动子显得尤其重要。
技术实现思路
1、本专利技术提供了一种水稻来源的、生物安全性好的组成型启动子。基于此，特提出如下
技术实现思路
。
2、第一方面，本专利技术提供了一种osgms5pro启动
3、i)seq id no.1所示的核苷酸序列；
4、ii)与i)完全互补的核苷酸序列；
5、iii)如i)所示的核苷酸序列经取代、缺失、增加一个或多个核苷酸序列得到的具有同等启动子功能的核苷酸序列。
6、第二方面，本专利技术提供了扩增所述启动子的引物对。
7、优选地，所述引物对为如seq id no.2-3所示的引物对。
8、seq id no.2-3所示的引物对可用于扩增如seq id no.1所示的核苷酸序列。
9、第三方面，本专利技术提供了含有所述启动子的生物材料；所述生物材料为表达盒、载体、宿主细胞中的至少一种。
10、在一些实施方案中，所述宿主细胞不能发育为完整的植株个体。
11、优选地，当所述生物材料为表达盒时，所述表达盒包括以转录方向彼此功能性连接的所述osgms5pro启动子、功能基因和终止子；
12、优选地，所述功能基因包括筛选标记基因和/或植物农艺性状相关基因。
13、筛选标记基因是一种已知功能或已知序列的基因，能够起着特异性标记的作用。在基因工程意义上来说，它是重组dna载体的重要标记，通常用来检验转化成功与否；在基因定位意义上来说，它是对目的基因进行标志的工具，通常用来检测目的基因在细胞中的定位。
14、所述筛选标记基因优选为β-葡萄糖苷酸酶基因gus、潮霉素磷酸转移酶基因hn、乙酰乳酸合酶突变基因als、bar基因、抗性epsps基因或nptii基因中的一种或多种。
15、植物农艺性状，即和农作物的生育期、株高、叶面积、果实重量、品质、除草剂抗性、病虫害抗性等可以代表作物品种特点的相关性状。相应的，植物农艺性状相关的基因即是和这些性状相关的基因。
16、第四方面，本专利技术提供了一种试剂或试剂盒，其中含有所述启动子、或所述引物对、或所述生物材料。
17、第五方面，本专利技术提供了所述启动子、或所述引物对、或所述生物材料、或所述试剂或试剂盒在以下至少一方面中的应用：
18、1)制备转基因植物；
19、2)驱动基因在植物中的表达；
20、3)植物遗传育种或种质改良；
21、4)植物杂交制种。
22、优选地，所述应用包括：将所述osgms5pro启动子构建至载体上，然后转化至植物中；
23、或将所述生物材料导入植物中。
24、优选地，所述应用还包括：转化或导入植物中后，通过筛选标记基因进行筛选。
25、优选地，所述基因为功能基因、功能基因的反义基因、或小rna基因；
26、优选地，所述功能基因为植物农艺性状相关基因或筛选标记基因；
27、优选地，所述小rna基因为能够干扰所述功能基因表达的小rna基因。
28、优选地，驱动基因在植物中的表达具体包括驱动基因在植物愈伤组织、营养生长期的组织或生殖器官中的表达。
29、优选地，所述植物包括水稻、玉米、小麦、大麦、大豆、棉花、油菜、高粱、小米中的至少一种。
30、作为一种优选的具体实施方式，本专利技术提供了一种制备转基因水稻的方法，包括：
31、通过农杆菌转化法将包括所述osgms5pro启动子的载体转化至水稻愈伤组织中；
32、将所述水稻愈伤组织经过抗性筛选和分化得到水稻幼苗；
33、将所述水稻幼苗进行生根培养得到转基因水稻。
34、优选地，所述水稻愈伤组织通过如下方法制备得到：
35、水稻种子去壳消毒后，将成熟胚接种于诱导培养基中，诱导胚性愈伤组织，28～30℃暗培养30～50天。
36、优选地，在将所述osgms5pro启动子转化至水稻愈伤组织中后，还包括共培养，所述共培养为在22～24℃暗培养至愈伤组织表面出现菌体。
37、优选地，所述抗性筛选为将经过共培养的愈伤组织接种到添加潮霉素的筛选培养基中，28～30℃暗培养30-50天，进行抗性筛选；
38、优选地，所述分化为将经过抗性筛选的愈伤组织添加至添加潮霉素的分化培养基上，28～30℃光照培养25-40天。
39、优选地，所述生根培养为将水稻幼苗接种到添加潮霉素的生根培养基上生根，30～32℃光照培养5～20天。
40、优选地，在生根培养后，包括pcr检测，选择检测为阳性的植株种植。
41、本专利技术具备如下有益效果：
42、本专利技术筛选得到了一种osgms5pro启动子，该启动子为组成型启动子，来源于水稻，其可以驱动基因在水稻、玉米或小麦等植物的愈伤组织、营养生长期的主要功能组织(根、叶、花、幼苗、幼穗等)或生殖器官中的高效稳定表达。
43、本专利技术提供的osgms5pro启动子可与植物内源或外源筛选标记基因组成植物转基因筛选表达盒，或植物遗传转化筛选载体，并添加其他功能元件进行植物组织培养或植物遗传转化，为植物遗传转化的筛选提供了有效的工具和方法。
44、本专利技术提供的osgms5pro启动子可驱动基因在转化苗的营养生长期地上和地下部分的主要功能组织中高效表达。除此之外，osgms5pro启动子为植物内源基因，在转基因过程中不引入菌源等外源基因片段，不仅丰富了植物转基因的启动子资源，还可有效降低外源基因引起的转基因植物的本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种OsGMS5pro启动子，其特征在于，其包括至少一条如下核苷酸序列：
2.扩增权利要求1所述启动子的引物对。
3.根据权利要求2所述的引物对，其特征在于，其为如SEQ ID NO.2-3所示的引物对。
4.含有权利要求1所述OsGMS5pro启动子的生物材料；所述生物材料为表达盒、载体、宿主细胞中的至少一种。
5.根据权利要求4所述的生物材料，其特征在于，当所述生物材料为表达盒时，所述表达盒包括以转录方向彼此功能性连接的所述OsGMS5pro启动子、功能基因和终止子；
6.一种试剂或试剂盒，其特征在于，其中含有权利要求1所述的OsGMS5pro启动子、或权利要求2或3所述的引物对、或权利要求4或5所述的生物材料。
7.权利要求1所述的OsGMS5pro启动子、权利要求2或3所述的引物对、权利要求4或5所述的生物材料、或权利要求6所述的试剂或试剂盒在以下至少一方面中的应用：
8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，包括：将所述OsGMS5pro启动子构建至载体上，然后转化至植物中；
...【技术特征摘要】
1.一种osgms5pro启动子，其特征在于，其包括至少一条如下核苷酸序列：
2.扩增权利要求1所述启动子的引物对。
3.根据权利要求2所述的引物对，其特征在于，其为如seq id no.2-3所示的引物对。
4.含有权利要求1所述osgms5pro启动子的生物材料；所述生物材料为表达盒、载体、宿主细胞中的至少一种。
5.根据权利要求4所述的生物材料，其特征在于，当所述生物材料为表达盒时，所述表达盒包括以转录方向彼此功能性连接的所述osgms5pro启动子、功能基因和终止子；
6.一种试剂或试剂盒，其特征在于，其中含有权利要求1所述的osgms5pro启动子...
【专利技术属性】
技术研发人员：安保光，赵光苗，金雄霞，欧阳超，王健华，陈思兰，
申请(专利权)人：海南波莲科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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