【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种高活性的未折叠蛋白响应元件及其筛选方法与应用，属于生物。
技术介绍
1、内质网是真核细胞内的一个关键细胞器，在分泌型蛋白和膜蛋白的折叠过程中发挥了重要作用。当细胞生产的蛋白质超出其负荷能力时，内质网则会产生错误折叠的蛋白质。这些错误折叠蛋白质的积累会对细胞造成负担，并激活细胞应激响应途径。未折叠蛋白响应途径(unfolded protein response，upr)是一种适应性信号传导机制，通过提高细胞的蛋白质折叠能力来维持内质网稳态。转录因子hac1p通过与启动子上游的未折叠蛋白响应元件(upre)相互作用，可改变约400个基因的表达水平。利用upre介导的启动子来驱动荧光蛋白表达，可以构建出一个用于检测由未折叠蛋白积累引起的内质网应激的upr生物传感器。这种传感器在灵敏度上优于基于hac1 mrna剪接的传统检测方法。但其设计受限于有限的upre和非upr启动子组合，例如cyc1p，或某些特定的天然upr启动子，例如hac1p、kar2p和ero1p。其中，upre1是kar2p启动子的顺式作用元件，用于调节其活...
【技术保护点】
1.一种高活性的未折叠蛋白响应元件的筛选方法，其特征在于：利用色蛋白EforRed和绿色荧光蛋白GFP融合作为报告蛋白，通过结合平板观察色蛋白和酶标仪定量检测绿色荧光蛋白的方法，实现对含有高活性的未折叠蛋白响应元件的菌株的初步筛选；随后，对初筛菌株进行二次验证，从而获取高活性的响应元件。
2.根据权利要求1所述的高活性的未折叠蛋白响应元件的筛选方法，其特征在于包括如下步骤：
3.根据权利要求2所述的高活性的未折叠蛋白响应元件的筛选方法，其特征在于：
4.根据权利要求3所述的高活性的未折叠蛋白响应元件的筛选方法，其特征在于：
<...【技术特征摘要】
1.一种高活性的未折叠蛋白响应元件的筛选方法，其特征在于：利用色蛋白eforred和绿色荧光蛋白gfp融合作为报告蛋白，通过结合平板观察色蛋白和酶标仪定量检测绿色荧光蛋白的方法，实现对含有高活性的未折叠蛋白响应元件的菌株的初步筛选；随后，对初筛菌株进行二次验证，从而获取高活性的响应元件。
2.根据权利要求1所述的高活性的未折叠蛋白响应元件的筛选方法，其特征在于包括如下步骤：
3.根据权利要求2所述的高活性的未折叠蛋白响应元件的筛选方法，其特征在于：
4.根据权利要求3所述的高活性的未折叠蛋白响应元件的筛选方法，其特征在于：
5.根据权利要求2所述的高活性的未折叠蛋白响应元件的筛选方法，其特征在于：
6.根据权利要求2所述的高活性的未折叠蛋白响应元件的筛选方法，其特征在于：
7.根据权利要求6所述的高活性的未折叠蛋白响应元件的筛选方法，其特征在于：
8.一种高活性的未折叠蛋白响应元件，其特征在于：通过权利要求1～7任一项所述的筛选方法得到，为核苷酸序列如seq id no.12～32所示的m77～97。
9.权利要求8所述的高活性的未折叠蛋白响应元件在制备模块化未折...
【专利技术属性】
技术研发人员：黄明涛，肖楚凡，刘秀妨，潘雨阳，李媛媛，
申请(专利权)人：华南理工大学，
类型：发明
国别省市：
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