【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及检测，具体涉及一种性早熟早期筛查的生物标记物和应用。
技术介绍
1、目前性早熟已经变成非常严重的社会问题，中国的孩子在没有到达性发育的年龄就出现早熟的现象，称为性早熟。性早熟除了会对孩子的身体健康，心理发育会产生影响之外，另外一旦发生性早熟，孩子的身高成长就停止，身体和心理也都会受到严重的影响。
2、目前性早熟最大的问题就是很难早期发现，通常都是在孩子已经出现了症状，比如说乳房发育等现象后，才发现孩子已经形成了性早熟，而到这个时候孩子的骨龄已经闭合，再进行干预就已经为时过晚。
3、如果能够尽早的发现孩子性早熟的情况，尽早的进行用药或者是干预，完全可以延缓孩子的性发育，能够让孩子健康的成长，因此寻找更早的发现孩子性早熟的方法变得非常的重要，而势在必行。但是因为造成孩子性早熟的原因多种多样，而性早熟的检测指标非常有限，目前主要都是通过观察孩子的发育来判断性早熟的，而这一种临床判断的方式通常都是在性早熟发生的，后期才能够应用，那么如何在性早熟发生的前期或者是早期来进行性早熟的发现，一直都没有合适的方法和指标。
4、cn113567582a曾公开了一组性早熟生物标记物“所述生物标志物包括哈西奈德、皮质酮、可的松、11-脱氧皮质酮、11-脱氧皮质醇、17α-羟孕酮、倍他松丁酸酯、氟氢可的松醋酸酯、甲基泼尼松龙醋酸酯、泼尼松龙醋酸酯、氢化可的松戊酸酯、甲基睾酮，雄(甾)烯二酮中的一种或多种”。该在先专利在研究的过程中，没有考虑到所有和性早熟产生有可能相关的生物标记物，因此有很大的局限性。性早
技术实现思路
1、鉴于此，本专利技术的目的在于提供一种性早熟早期筛查的生物标记物和应用。本专利技术通过大量的检测工作，和对性早熟及健康人群的反复的对比，发现了能够早期判断和筛查性早熟的有效的生理指标，并将其成功地应用于性早熟的早期筛查和判断。
2、本专利技术筛查的性早熟相关生物标记物和各自的编号见表1，本专利技术申请中化合物和编号均保持一致，不再反复说明：
3、表1本专利技术筛查的性早熟相关生物标记物和各自的编号
4、
5、
6、
7、本专利技术的目的是通过以下技术方案来实现的：
8、本专利技术提供一种生物标志物在制备儿童性早熟筛查、诊断或风险评估的产品中的应用，其特征在于，所述生物标志物包括如下组合中的一种：
9、生物标志物组合一：甲基睾酮、倍他米松丙酸酯、邻苯二甲酸单甲酯、邻苯二甲酸单环已酯、2,2'-二羟基-4-甲氧基二苯甲酮、睾酮；
10、生物标志物组合二：布地奈德、地夫可特、氟米龙醋酸酯、氟氢缩松、泼尼松、甲基睾酮、倍他米松丙酸酯、地索奈德、氟可龙、卤倍他索丙酸酯、卤米松、炔诺孕酮、甲羟孕酮、甲地孕酮、米非司酮、帕拉米松、异氟泼尼松。
11、所述生物标志物的样本来自尿液。
12、所述生物标志物通过包括如下步骤的制备方法制备获得：
13、1)在样品中加入内标溶液，配置成样本溶液；
14、2)酶解：步骤1)的样本溶液中加入葡萄糖醛酸酶溶液进行酶解；
15、3)酶解后样本分别上样于hlb固相萃取板和max固相萃取板，淋洗液洗涤去干扰物质后，用洗脱液进行洗脱，收集洗脱液，进行uplc-ms检测。
16、步骤2)中，葡萄糖醛酸酶溶液的浓度为5,000-20,000u/ml。
17、步骤2)中，酶解时间为1-2h，温度为35-60℃；葡萄糖醛酸酶溶液和样本溶液的体积比为20:1-40:1。
18、步骤2)中，所述洗脱液为包含甲酸和有机相的混合溶液，混合溶液中甲酸的质量分数为2-3％；有机相包括乙睛、甲醇，两者体积比为9:1-8:2；淋洗液为水。
19、步骤1)中，内标溶液含20种內源激素类化合物的稳定同位素内标和11种塑化剂代谢物的稳定同位素内标；
20、所述20种內源激素类化合物包括：11-脱氧皮质酮、17α-羟孕酮、21-脱氧皮质醇、皮质酮、11-脱氧皮质醇、雄烯二酮、二氢睾酮、睾酮、孕烯醇酮、孕酮、褪黑素、皮质醇、可的松、地塞米松、醛固酮、17α-羟孕烯醇酮、雌酮、雌二醇、雌三醇、脱氢异雄酮硫酸盐；
21、所述11种塑化剂代谢物包括：邻苯二甲酸单甲酯、邻苯二甲酸单乙酯、邻苯二甲酸单苯酯、邻苯二甲酸单正丁酯、邻苯二甲酸单(3-羟基正丁基)酯、邻苯二甲酸单(2-乙基-5-羟基己基)酯、邻苯二甲酸单(2-乙基-5-氧代己基)酯、邻苯二甲酸单(2-乙基-5-羧戊基)酯、邻苯二甲酸单(3-羧丙基)酯、邻苯二甲酸单异丁酯、邻苯二甲酸单(2-羟基-异丁基)酯。
22、步骤3)中，采用uplc-ms进行分析时，采用的液相分析条件为：
23、色谱柱：acquity uplc beh phenyl；
24、流动相a：0.1％氟化铵甲酸水溶液，ph 2.5-4.5；
25、流动相b：乙腈:甲醇9:1；
26、流动相梯度条件为：
27、 时间(min) 流速(ml/min) 流动相a 流动相b 0.00 0.40 75％ 25％ 0.20 0.40 75％ 25％ 8.00 0.40 5％ 95％ 9.00 0.40 5％ 95％ 9.01 0.40 75％ 25％ 11.00 0.40 75％ 25％
28、。
29、步骤3)中，
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1.一种生物标志物在制备儿童性早熟筛查、诊断或风险评估的产品中的应用，其特征在于，所述生物标志物包括如下组合中的一种：
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述生物标志物的样本来自尿液。
3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述生物标志物通过包括如下步骤的制备方法制备获得：
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，步骤2)中，葡萄糖醛酸酶溶液的浓度为5,000-20,000U/mL。
5.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，步骤2)中，酶解时间为1-2h，温度为35-60℃；葡萄糖醛酸酶溶液和样本溶液的体积比为20:1-40:1。
6.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，步骤2)中，所述洗脱液为包含甲酸和有机相的混合溶液，混合溶液中甲酸的质量分数为2-3％；有机相包括乙睛、甲醇，两者体积比为9:1-8:2；淋洗液为水。
7.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，步骤1)中，内标溶液含20种內源激素类化合物的稳定同位素内标和11种塑化剂代谢物的稳定同位素内标；
8.根据权利要求3所
9.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，步骤3)中，
10.一种性早熟风险评估模型，其特征在于，所述评估模型的判别方程式为：
...【技术特征摘要】
1.一种生物标志物在制备儿童性早熟筛查、诊断或风险评估的产品中的应用，其特征在于，所述生物标志物包括如下组合中的一种：
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述生物标志物的样本来自尿液。
3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述生物标志物通过包括如下步骤的制备方法制备获得：
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，步骤2)中，葡萄糖醛酸酶溶液的浓度为5,000-20,000u/ml。
5.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，步骤2)中，酶解时间为1-2h，温度为35-60℃；葡萄糖醛酸酶溶液和样本溶液的体积比为20:1-40:1。
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【专利技术属性】
技术研发人员：张元媛，谭晓杰，陈铭，
申请(专利权)人：裕菁科技上海有限公司，
类型：发明
国别省市：
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