同时检测多种血压升高相关的典型生物标记物的方法技术

本发明专利技术公开了一种同时检测多种血压升高相关的典型生物标记物的方法；生物标记物包括：a)同型半胱氨酸或其类似物，b)醛固酮和/或皮质醇，以及c)多巴胺、左旋多巴、肾上腺素、去甲肾上腺素、3

【技术实现步骤摘要】
同时检测多种血压升高相关的典型生物标记物的方法


[0001]本专利技术属于检测
，涉及一种同时检测多种血压升高相关的典型生物标记物的方法，尤其涉及一种同时检测10种血压升高相关的典型生物标记物的方法。

技术介绍

[0002]在生物体中，造成血压升高的原因比较复杂，可能和很多的因素有关，不同的原因虽然都会让血压升高，一样的结果并不意味着一样的原因，而了解原因是非常重要的。随着对这种血压升高现象了解和研究的越来越深入，对其有越来越多的了解，终于可以通过不同的生物标记物来对血压升高这一现象来进行不同原因的分析。按照目前技术的最新发展，已经发现和血压升高相关的生物标记物主要包括同型半胱氨酸(以及同型半胱氨酸类似的化合物和代谢通路上的化合物，如半胱氨酸，甲硫氨酸等)、多巴胺、左旋多巴、肾上腺素、去甲肾上腺素、3
‑
甲氧基酪氨、去甲变肾上腺素、变肾上腺素、醛固酮、皮质醇等。不同的生物标记物对应着血压升高不同的原因，检测并得到这些化合物在生物样品中的准确含量，对于确定血压升高的原因至关重要。
[0003]尽管目前可以了解到血压升高的生物标记物是什么，分别代表了什么样的血压升高原因，但是，目前最头疼的问题就是这些生物标记物很难同时进行分析和测定。而正是因为这些生物标记物可以成功地代表血压升高的各种各样的不同原因，就造成这些生物标记物本身的差异很大，他们完全不是一类的化合物。如果分别去检测这些化合物，当然可以得到他们各自的分析测定结果，但是这就意味着至少要进行5次左右检测，才能得到这些化合物的检测结果，这样的效率非常低，为了解决这个问题，目前的解决方案可以先把高度怀疑的原因进行测试，如果结果和猜测不符，那么就再继续测试其他的生物标记物，或者就直接花很长时间将以上生物标记物分开进行测定，再将各个生物标记物的分析结果进行汇总后，然后进行生理和病理的分析，但是这种方法特别慢。无论目前的哪种解决方案，都是因为不能实现所有生物标记物的同时测定问题而进行的妥协方案。如果能够实现这些生物标记物的同时检测，将大大提高效率，改变目前的困难状况。
[0004]目前的分析方法和难点(不能同时分析的难点)一览表见表1：
[0005]表1 10个典型的生物标记物的名称和难以同时分析的难点问题
[0006][0007]10个生物标记物的结构式如下：
[0008][0009]
技术实现思路

[0010]本专利技术的目的在于针对上述现有技术存在的不足，提供一种同时检测多种血压升高相关的典型生物标记物的方法。本专利技术通过特殊的样品处理方法，解决了10个高血压相关生物标记物同时检测的问题。
[0011]本专利技术的目的是通过以下技术方案来实现的：
[0012]本专利技术涉及一种同时检测多种典型生物标记物的方法，所述生物标记物包括组份：a)同型半胱氨酸或其类似物，b)醛固酮和皮质醇中至少一种，以及c)多巴胺、左旋多巴、肾上腺素、去甲肾上腺素、3
‑
甲氧基酪氨、去甲变肾上腺素、变肾上腺素中至少一种；所述方法包括如下步骤：
[0013]S1、在待测生物样品中加入还原剂三(2
‑
甲酰乙基)膦盐酸盐；
[0014]S2、加入丙酸酐，接入化学基团
‑
C3H5O；或者加入乙酸酐，接入化学基团
‑
C2H3O；
[0015]S3、加入(1
‑
(2
‑
肼基
‑2‑
氧乙基)吡啶翁氯化物)，接入化学基团
‑
C7H8N3O；
[0016]S4、注入液相色谱质谱联用仪进行分析。该方法非疾病诊断性。
[0017]步骤S1中，加入三(2
‑
甲酰乙基)膦盐酸盐还原同型半胱氨酸，是为了得到同型半
胱氨酸的稳定状态，并使其可接入
‑
C3H5O或者
‑
C2H3O；而采用其他巯基还原剂，如二硫苏糖醇、β
‑
巯基乙醇也可以得到同型半胱氨酸的稳定状态，但是之后无法接入
‑
C3H5O或者
‑
C2H3O。
[0018]作为一个实施方案，同型半胱氨酸类似物包括甲硫氨酸、半胱氨酸中至少一种。
[0019]作为一个实施方案，所述生物样品选自血浆、血清、脑脊液、组织匀浆液、干血斑、尿液、毛发、汗液或唾液。
[0020]作为一个实施方案，步骤S1中，加入还原剂三(2
‑
甲酰乙基)膦盐酸盐还原a)组分。
[0021]作为一个实施方案，步骤S2中，在b)组分化合物上接入1～n个
‑
C3H5O或者
‑
C2H3O基团。n可以为2、3、4或更多；如n＝2
‑
5。
[0022]作为一个实施方案，步骤S3中，在c)组分化合物上接入化学基团
‑
C7H8N3O。
[0023]作为一个实施方案，所述生物标记物为同型半胱氨酸或其类似物，多巴胺、左旋多巴、肾上腺素、去甲肾上腺素、3
‑
甲氧基酪氨、去甲变肾上腺素、变肾上腺素、醛固酮和皮质醇的组合。
[0024]在一些实施例中，所述生物标记物为同型半胱氨酸、多巴胺、左旋多巴、肾上腺素、去甲肾上腺素、3
‑
甲氧基酪氨、去甲变肾上腺素、变肾上腺素、醛固酮和皮质醇的组合。
[0025]本专利技术还涉及一种用于同时检测多种血压升高相关的典型生物标记物的试剂盒，所述试剂盒包括：多种生物标记物的质控品、标准品、还原剂(三(2
‑
甲酰乙基)膦盐酸盐)、化学标签接入试剂丙酸酐或者乙酸酐、化学标签接入试剂1
‑
(2
‑
肼基
‑2‑
氧乙基)吡啶翁氯化物、缓冲溶液和提取溶液。
[0026]作为一个实施方案，所述多种生物标记物包括组份：a)同型半胱氨酸或其类似物，b)醛固酮和皮质醇中至少一种，以及c)多巴胺、左旋多巴、肾上腺素、去甲肾上腺素、3
‑
甲氧基酪氨、去甲变肾上腺素、变肾上腺素中至少一种。
[0027]本专利技术通过重新设计分析流程，最终确定采用三(2
‑
甲酰乙基)膦盐酸盐+丙酸酐或者乙酸酐+(1
‑
(2
‑
肼基
‑2‑
氧乙基)吡啶翁氯化物)，3种试剂的组合是实验成功的关键，这3个试剂联用最终实现在同1份样品中，采用同1个前处理方法，不需要将1份样品分成几份或者采用不同的前处理方法，使得同型半胱氨酸(以及同型半胱氨酸类似的化合物和代谢通路上的化合物，如半胱氨酸，甲硫氨酸等)、多巴胺、左旋多巴、肾上腺素、去甲肾上腺素、3
‑
甲氧基酪氨、去甲变肾上腺素、变肾上腺素、醛固酮、皮质醇可以快速进行同时分析。
[0028]与现有技术相比，本专利技术具有如下有益效果：
[0029]1)通过重新设计整个分析方法，实现了高血压本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种同时检测多种典型生物标记物的方法，其特征在于，所述生物标记物包括组份：a)同型半胱氨酸或其类似物，b)醛固酮和皮质醇中至少一种，以及c)多巴胺、左旋多巴、肾上腺素、去甲肾上腺素、3
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甲氧基酪氨、去甲变肾上腺素、变肾上腺素中至少一种；所述方法包括如下步骤：S1、在待测生物样品中加入还原剂三(2
‑
甲酰乙基)膦盐酸盐；S2、加入丙酸酐，接入化学基团
‑
C3H5O；或者加入乙酸酐，接入化学基团
‑
C2H3O；S3、加入(1
‑
(2
‑
肼基
‑2‑
氧乙基)吡啶翁氯化物)，接入化学基团
‑
C7H8N3O；S4、注入液相色谱质谱联用仪进行分析。2.根据权利要求1所述的同时检测多种典型生物标记物的方法，其特征在于，同型半胱氨酸类似物包括甲硫氨酸、半胱氨酸中至少一种。3.根据权利要求1所述的同时检测多种典型生物标记物的方法，其特征在于，所述生物样品选自血浆、血清、脑脊液、组织匀浆液、干血斑、尿液、毛发、汗液或唾液。4.根据权利要求1所述的同时检测多种典型生物标记物的方法，其特征在于，步骤S1中，加入还原剂三(2
‑
甲酰乙基)膦盐酸盐还原a)组分。5.根据权利要求1所述的同时检测多种典型生物标记物的方法，其特征在于，步骤S2中，在...

【专利技术属性】
技术研发人员：谭晓杰，
申请(专利权)人：裕菁科技上海有限公司，
类型：发明
国别省市：