【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种可逆永生化人源神经干细胞系的制备方法，属于分子细胞生物学、生物化学及神经生物学领域。
技术介绍
1、神经干细胞(neural stem cells，nscs)来源于侧脑室的脑室下区(subventricular zone，svz)和海马齿状回的颗粒层下区(subgranular zone，sgz)，能够自我更新与维持，并具有向神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞分化的多向分化潜能。并且由于其良好的组织融合性和迁移能力，以及低免疫原性所带来的较低的免疫排斥反应，神经干细胞被广泛应用于神经系统疾病的研究中，如中风、神经退行性疾病、脊髓损伤等。目前在临床研究方面，主要利用原代神经干细胞进行探究，然而原代细胞培养及应用存在多种缺陷：首先，原代神经干细胞具有有限的寿命、有限的细胞分裂次数，不能无限传代，因此需要反复从组织中分离出来建立培养体系，耗时繁琐且成本很高；其次，原代细胞来源于不同个体，不同批次细胞间的遗传背景存在差异，异质性的缺陷会导致难以获得稳定可靠的结果；再次，由于胎脑来源有限，且受到社会学和伦理学的束缚，使得原代神经...
【技术保护点】
1.一种可逆永生化人源神经干细胞系的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的可逆永生化人源神经干细胞系的制备方法，其特征在于：所述标记基因为荧光标记基因；所述筛选基因为抗生素筛选基因；所述病毒选自逆转录病毒、慢病毒、腺病毒和腺相关病毒中的任意一种。
3.根据权利要求2所述的可逆永生化人源神经干细胞系的制备方法，其特征在于：所述荧光标记基因为增强绿色荧光蛋白基因；所述抗生素筛选基因选自嘌呤霉素抗性基因，腐草霉素抗性基因，杀稻瘟菌素抗性基因，潮霉素抗性基因或新霉素抗性基因。
4.根据权利要求1所述的可逆永生化人源神...
【技术特征摘要】
1.一种可逆永生化人源神经干细胞系的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的可逆永生化人源神经干细胞系的制备方法，其特征在于：所述标记基因为荧光标记基因；所述筛选基因为抗生素筛选基因；所述病毒选自逆转录病毒、慢病毒、腺病毒和腺相关病毒中的任意一种。
3.根据权利要求2所述的可逆永生化人源神经干细胞系的制备方法，其特征在于：所述荧光标记基因为增强绿色荧光蛋白基因；所述抗生素筛选基因选自嘌呤霉素抗性基因，腐草霉素抗性基因，杀稻瘟菌素抗性基因，潮霉素抗性基因或新霉素抗性基因。
4.根据权利要求1所述的可逆永生化人源神经干细胞系的制备方法，其特征在于：所述重组病毒载体的空载体为lv-ef1a-mcs-pgk-puro-wpre或lv-ef1a-mcs-p2a-egfp-pgk-puro-wpre。
5.根据权利要求1所述的可逆永生化人源神经干细胞系的制备方法，其特征在于：所述转导前，使用对照病毒进行moi摸索，通过荧光表达水平，选择合适的moi进行正式的转导；
6....
【专利技术属性】
技术研发人员：李瑞，周莹，陈小威，杨玉翠，杨敏，张换红，张紫瑞，
申请(专利权)人：北京银丰鼎诚生物工程技术有限公司，
类型：发明
国别省市：
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