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【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种神经干细胞促血管生成模型的构建方法,属于神经干细胞治疗。
技术介绍
1、临床上,新血管的形成对于保持血管稳态和修复缺血心肌或中风至关重要。有研究表明人脐静脉内皮细胞(huvec)表现出最强的触发管形成的能力。
2、神经干细胞(nscs)可以促进血管生成,修复神经损伤。nscs具有潜力分化为内皮细胞,参与血管生成。此外,nscs还可以分泌多种生长因子和细胞外基质分子,如血管内皮生长因子(vegf)和基础纤维生长因子(bfgf),这些生长因子对于血管生成至关重要。nscs释放的生长因子可以促进血管内皮细胞的增殖、迁移和管腔形成。nscs还可以通过调节周围细胞和基质的微环境来促进血管生成。nscs释放的细胞外基质分子可以为血管内皮细胞提供支持和指导,从而影响血管生成的过程。这些研究结果表明,利用nscs来促进血管生成有望在脑损伤修复中发挥重要作用。然而,需要进一步研究来完善、细化nscs促血管生成的实验方案,并以此检测nscs促血管生成能力。
技术实现思路
1、针对上述现有技术,本专利技术提供了一种神经干细胞促血管生成模型的构建方法。本专利技术旨在通过在基质胶中共培养人脐静脉内皮细胞与神经干细胞,以评估人脐静脉内皮细胞的血管生成能力,研究nscs胞外基质对huvec血管生成能力的影响,评估nscs的促血管生成潜能。
2、本专利技术是通过以下技术方案实现的:
3、一种神经干细胞促血管生成模型的构建方法,包括以下步骤:
4、(
5、(2)每孔加入30000个huvec细胞,至少3个副孔,培养液选用egm2完全培养基,于37℃、5%co2及饱和湿度条件下常规培养24小时;
6、(3)弃去egm2完全培养基,换成dmem/f12培养基,同时在transwell的小室里加入200μl nscs细胞培养液,nscs细胞培养液中所含的nscs个数为2×104~8×105个,优选4×105;于37℃、5%co2及饱和湿度条件下常规培养24小时;同时,设置阳性对照组,阴性对照组;
7、阳性对照组:步骤(2)后直接进行下一步;
8、阴性对照组:弃去egm2完全培养基,换成dmem/f12培养基,于37℃、5%co2及饱和湿度条件下常规培养24小时;
9、(4)观察并记录血管生成情况;
10、(5)使用imagej进行血管分析。
11、进一步地,所述步骤(4)具体为:每个孔拍5个视野的图片,每孔选用最接近的3个视野进行数据统计求和,分析副孔之间的稳定性和离散程度。
12、进一步地,所述步骤(5)具体为:使用imagej对血管网络进行定量,通过测量网格数量来比较血管形成的程度。
13、本专利技术的神经干细胞促血管生成模型的构建方法,在体外条件下模拟神经血管环境,有助于深入了解神经干细胞对血管生成的调控作用,为相关领域提供了更贴近实际情况的研究手段。本专利技术的模型的建立使得研究者们可以通过更全面的视角来探索神经干细胞与血管生成之间的关系,为相关领域带来了新的思路和发现,丰富了研究视角。本专利技术构建的模型涉及神经生物学、血管生物学和组织工程等多个学科领域,有助于促进不同领域之间的交叉研究与合作,推动相关领域的科学进步与创新。
14、本专利技术构建nscs和huvec共培养模型,以体外模拟神经血管环境,通过研究nscs对血管生成的作用,进一步为nscs移植治疗神经系统疾病提供相应的实验和理论依据,同时也是快速评价不同批次细胞质量的方法,取得了以下有益效果:
15、(1)为神经系统疾病治疗提供实验依据:通过研究nscs对血管生成的作用,该模型为nscs移植治疗神经系统疾病提供了实验和理论依据,有望推动相关领域的治疗方法和策略的创新与优化。
16、(2)快速评价细胞质量的方法:该模型不仅用于研究nscs促血管生成的作用,同时也可作为一种快速评价不同批次细胞质量的方法,为相关领域的细胞培养质量控制提供了新的途径。
17、(3)优化实验设计:通过设计一系列实验以优化nscs促血管生成的模型,可以更充分地揭示nscs胞外基质对huvec血管生成能力的影响,评估nscs的促血管生成潜能,从而提高实验数据的准确性和可靠性。
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1.一种神经干细胞促血管生成模型的构建方法,其特征在于,包括以下步骤:
2.根据权利要求1所述的神经干细胞促血管生成模型的构建方法,其特征在于:所述NSCs细胞培养液中所含的NSCs个数为4×105个。
3.根据权利要求1所述的神经干细胞促血管生成模型的构建方法,其特征在于:所述步骤(4)具体为:每个孔拍5个视野的图片,每孔选用最接近的3个视野进行数据统计求和,分析副孔之间的稳定性和离散程度。
4.根据权利要求1所述的神经干细胞促血管生成模型的构建方法,其特征在于:所述步骤(5)具体为:使用ImageJ对血管网络进行定量,通过测量网格数量来比较血管形成的程度。
【技术特征摘要】
1.一种神经干细胞促血管生成模型的构建方法,其特征在于,包括以下步骤:
2.根据权利要求1所述的神经干细胞促血管生成模型的构建方法,其特征在于:所述nscs细胞培养液中所含的nscs个数为4×105个。
3.根据权利要求1所述的神经干细胞促血管生成模型的构建方法,其特征在于:所...
【专利技术属性】
技术研发人员:丁莹莹,王培培,陈小威,刘鹏,孙晓东,王楠,
申请(专利权)人:北京银丰鼎诚生物工程技术有限公司,
类型:发明
国别省市:
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