含基底膜的组织工程皮肤及其构建方法技术

本发明专利技术涉及组织工程和医学创面修复技术领域。目前以聚乳酸、聚羟基乙酸、胶原、透明质酸等材料作为真皮支架构建的活性皮肤替代物，一方面基质材料提取困难，制作工艺复杂，费用昂贵，难以在临床广泛推广应用，另一方面其不具备皮肤的基底膜结构，导致愈合皮肤不耐压和耐磨，表皮粘附不牢，容易脱落破损或形成水疱，且影响正常表皮结构、形态的发育。而异体脱细胞真皮取自尸体皮，来源有限，价格昂贵，限制了临床应用。本发明专利技术目的在于提供以一种以表面修饰改性的羊膜为基底膜，血浆为基质的皮肤替代物，其材料来源广泛、成本低廉、制备方法简单，经动物实验证明可在体内移植中保持完整的基底膜和半桥粒，加速并促进表皮结构形态的形成。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种含基底膜的组织工程皮肤的构建方法，其特征在于该方法包括如下步骤：Ａ）分离、培养角朊细胞、成纤维细胞；Ｂ）表面修饰改性羊膜：去除绒毛膜后的羊膜，经生理盐水反复浸泡、清洗后，于０．０２％的ＥＤＴＡ溶液３７℃消化２小时，超声振荡洗涤彻底除去残留的细胞碎片及绒毛膜组织，置于含１０００Ｕ／ｍｌ庆大霉素、２．５ｇ／ｍｌ两性霉素Ｂ的生理盐水中浸泡２０至５０分钟；Ｃ）构建组织工程皮肤；将Ｂ）步骤制备的羊膜与含成纤维细胞的血浆基质复合，再将角朊细胞以１－５×１０↑［５］个／ｃｍ↑［２］的密度接种于羊膜表皮面，体外培养２－３周。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：纪世召，夏照帆，肖仕初，李恒宇，王光毅，杨晓妍，罗鹏飞，
申请(专利权)人：中国人民解放军第二军医大学，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]