【技术实现步骤摘要】
:本专利技术涉及属于医疗生物领域，具体的说涉及单链抗体scFv3的制备方法。
技术介绍
:抗肾小球基底膜病是以循环中抗GBM抗体阳性和(或)抗GBM抗体在肺和(或)肾脏中沉积为特征的一组自身免疫性疾病，起病急，发展快，预后差。抗GBM抗体对于抗GBM病具有诊断意义，它的水平与病情的严重程度和预后都有明显相关性，提示该抗体在发病机制中起了重要作用。抗GBM抗体的靶抗原为GBM中IV型胶原α 3链的羧基末端球状非胶原区(NCl区)。目前抗GBM病的主要治疗方法是强化血浆置换和免疫抑制剂联合治疗。糖皮质激素和免疫抑制剂只能部分减少抗GBM抗体的产生，对于体内已存在的致病性抗体却无能为力。血浆置换可以清除体内循环的抗GBM抗体，并不能解离已与靶抗原结合的抗体，特异性较差，且价格昂贵。如果我们能获得抗GBM抗体的特异性抗体，分子量较小，不仅能与血液循环中游离的抗体结合，形成小的复合物，滤过基底膜；也可以封闭抗GBM抗体，使其不能与靶抗原结合，从而不再继续损害肾脏，从而缓解患者的症状，缩短病程，改善预后。
技术实现思路
:本专利技术主要解决目前在治疗GBM方面存在的...
【技术保护点】
人源化抗肾小球基底膜抗体的单链抗体scFv3的制备方法，其特征在于：所述制备方法包括以下步骤：A、选材，筛选出抗人GBM抗体的单链抗体scFv3基因、大肠杆菌Top10和Rosetta2菌、克隆载体pGEM‑T Easy Vector、限制性内切酶BamHI、HindⅢ、Taq DNA聚合酶、T4DNA连接酶、表达载体pQE80L、胶回收试剂盒及小量质粒提取试剂盒，含碱性磷酸酶的羊抗人IgG抗体，抗GBM抗体,快速纯化系统仪器；B、单链抗体scFv3基因的PCR扩增，以重组噬菌粒pCANTAB‑scFv3为模板,XP1和XP2为引物,进行PCR扩增；C、克隆载体pGEM‑s...
【技术特征摘要】
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。