【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及免疫分析，尤其涉及一种奥氮平测定试剂盒及其制备方法。
技术介绍
1、精神分裂症是最常见的精神类疾病之一，世界范围的发病率约为0.3%~0.7%，主要的临床症状包括幻觉、妄想、思维混乱、狂躁等。近年，我国精神分裂症的发病率呈明显上升趋势。在治疗方面，抗精神分裂药物使用过程中经验用药仍处于主导地位，目前应用于临床的药物有三十余种，其中奥氮平和阿立哌唑为临床常用的第二代抗精神分裂症药物，其中奥氮平副作用小，治疗效果明显，阿立哌唑能够改善患者阴性和阳性症状，是抗精神治疗中的常见组合药物。
2、由于不同患者间的个体差异，在相同的服药剂量下，亦可造成截然不同的疗效。为了合理用药，治疗药物监测（therapeutic dug monitoring，tdm）显得尤为重要。基于德国神经精神药理学与药物精神病学协会最新指南对奥氮平进行tdm处于强烈推荐等级。为了更好的了解奥氮平用药后的药物动力学，需要一种灵敏度高，特异性好操作便捷，使用成本低的测定血清中奥氮平及其代谢物的方法，以观察药物的量效关系。
3、在tdm临床检测中，传统的药物检测技术主要有高效液相色谱法和质谱或者液质联用技术等。这些法具有灵敏度和准确度高、特异性强的优点，但也存在技术要求高，需要有专业的技术人员进行操作，样本需要进行前处理，繁琐费时，重现性较差，仪器和耗材成本较高，响应时间长，检测浓度有限，最为重要的是上述方法对于仪器具有比较高的依赖性，而且这些仪器基本上都是进口，大大提高检测成本。
4、而磁微粒化学发光技术是将化学发光技术
技术实现思路
1、本专利技术针对上述的技术问题，提供一种奥氮平测定试剂盒，采用基于磁微粒化学发光免疫分析技术的竞争法进行检测。化学发光免疫分析法是近三十年来迅速发展起来的免疫分析方法，具有高灵敏度，高特异性、无需催化剂、标记结合物稳定、检测速度快、操作便捷和检测成本低等优点，被广泛应用。本发现还提供了一种奥氮平测定试剂盒的制备方法，适用发光标记物，发光强度稳定，反应速度快且与抗体连接后不会对待测物的结合产生影响；抗体通过生物素-亲和素与磁珠相连增加结合力、特异性高，提高了检测试剂的灵敏度和准确度。
2、为了实现上述目的，本专利技术提供的技术方案如下：
3、本发现首先提供一种奥氮平测定试剂盒，包括以下试剂组份:
4、试剂r1为亲和素磁微粒溶液；
5、试剂r2生物素标记的奥氮平抗体；
6、试剂r3化学发光物标记的奥氮平抗原；
7、校准品为含奥氮平纯品的bsa溶液。
8、其中，r1所述的亲和素磁微粒的质量百分比为0.05%~0.25%，粒径大小为1~3μm；
9、r2中奥氮平抗体与生物素的摩尔比是1：5~1：50；
10、r3中奥氮平抗原与化学发光物的摩尔比是1：1.5-1：20；
11、奥氮平校准品是以含有bsa的缓冲液为基质加入奥氮平纯品配制而成的高、低两个浓度点的校准品溶液。
12、优选地，上述的奥氮平测定试剂盒，r1所述的亲和素包括卵白亲和素、链霉亲和素、卵黄亲和素及类亲和素。
13、优选地，上述的奥氮平测定试剂盒，r2所述的生物素标记奥氮平抗体为单克隆抗体或多克隆抗体。
14、优选地，上述的奥氮平测定试剂盒，r2所述的生物素标记奥氮平抗体，其中生物素为未活化生物素和活化生物素。
15、优选地，上述的奥氮平测定试剂盒，r2所述的生物素标记奥氮平抗体，其中活化生物素包括生物素酰肼，生物素对硝基酚酯，生物素n羟基丁二酰亚胺酯，活化长臂生物素。
16、优选地，上述的奥氮平测定试剂盒，r3所述的化学发光标记物为吖啶酯、鲁米诺、辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶或三联吡啶钌。
17、本专利技术还提供了上述奥氮平测定试剂盒的制备方法，所述方法包括下述步骤：
18、r1的制备方法为取亲和素磁微粒溶液，加入10mm pb缓冲液稀释至5mg/ml,充分混匀后，放置于磁力架上直至上清澄清无浑浊，弃上清；重复清洗2-5次后，用10mm pb缓冲液配制成磁珠浓度为0.05%~0.25%的r1试剂，2~8℃备用；
19、r2的制备方法为取奥氮平抗体，用10mm pb缓冲液置换奥氮平抗体保存液，离心后将抗体稀释至1~2mg/ml,将平衡后的生物素原液混匀，按照抗体与生物素摩尔比1：5~1：50将生物素添加到抗体中，混匀，振荡标记反应0.5-5h，纯化，得到生物素标记的奥氮平抗体，用缓冲液稀释至0.05~2.5ug/ml,即为r2试剂，2~8℃备用；
20、r3的制备方法为取奥氮平抗原，用10mm pb缓冲液置换奥氮平抗体保存液，离心后将抗体稀释至1~2mg/ml,将平衡后的化学发光物原液混匀，按照抗体与化学发光物摩尔比1：1.5-1：20将化学发光物添加到抗原中，混匀，振荡标记反应0.5-5h，纯化，得到化学发光物标记的奥氮平抗原，用缓冲液稀释至0.01~0.5ug/ml,即为r3试剂，2~8℃备用；
21、校准品的配制方法是用含0.5-5.0% bsa的tris或pbs或heps缓冲液为基质加入奥氮平纯品配制而成，校准品含有高、低两个浓度点，校准品形态为液态。
22、试剂盒以外还具有奥氮平主校准品以及质控品用于内部测试，不在试剂盒组份内。其中，主校准品为6个浓度点，质控品含高、低两个浓度点，所述的质控品为含一定量奥氮平抗原的血清基质。
23、以及酸性预激发液、碱性激发液和浓缩清洗液仅用于试剂盒检测，不在该试剂盒组份内。酸性预激发液为过氧化氢和硝酸水溶液。碱性激发液为氢氧化钠与吐温20水溶液。浓缩清洗缓冲液含磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、nacl和表面活性剂等成分的缓冲液。
24、本专利技术检测试剂盒采用的原料是竞争法，具体是通过样本中的奥氮平抗原与系统中化学发光物标记的奥氮平抗原竞争特异性结合奥氮平抗体，利用发光物产品的光子以检测样本中的浓度。
25、本专利技术的优点在于以磁微粒分离化学发光技术为检测手段，同时采用生物素和化学发光物标记技术进行检测以建立一种奥氮平的化学发光试剂盒。以磁微粒为固相分离载体，可使抗原、抗体的结合反应本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种奥氮平的定量测定试剂盒，其特征在于，包括以下试剂组份：
2.如权利要求1所述的奥氮平测定试剂盒，其特征在于，R1所述的亲和素包括卵白亲和素、链霉亲和素、卵黄亲和素及类亲和素。
3.如权利要求1所述的奥氮平测定试剂盒，其特征在于，R2所述的生物素标记奥氮平抗体为单克隆抗体或多克隆抗体；
4.如权利要求1所述的奥氮平测定试剂盒，其特征在于，R2所述的生物素标记奥氮平抗体，其中活化生物素包括但不局限于生物素酰肼，生物素对硝基酚酯，生物素N羟基丁二酰亚胺酯，活化长臂生物素。
5.如权利要求1所述的奥氮平测定试剂盒，其特征在于，R3所述的化学发光标记物为吖啶酯、鲁米诺、辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶或三联吡啶钌。
6.如权利要求1所述的奥氮平测定试剂盒，其特征在于，R3化学发光物标记的奥氮平抗原为化学合成的化合物或者重组抗原。
7.如权利要求1所述的奥氮平测定试剂盒，其特征在于，R3化学发光物标记的奥氮平抗原为半抗原或者完全抗原。
8.一种制备如权利要求1所述的奥氮平测定试剂盒的制备方法，所述方法包括下
9.根据权利要求8所述的奥氮平测定试剂盒的制备方法，其特征在于，所述的化学发光标记物为吖啶酯、鲁米诺、异鲁米诺或三联吡啶钌。
10.根据权利要求8所述的奥氮平测定试剂盒的制备方法，其特征在于，所述的奥氮平抗体为单克隆抗体或多克隆抗体。
...【技术特征摘要】
1.一种奥氮平的定量测定试剂盒，其特征在于，包括以下试剂组份：
2.如权利要求1所述的奥氮平测定试剂盒，其特征在于，r1所述的亲和素包括卵白亲和素、链霉亲和素、卵黄亲和素及类亲和素。
3.如权利要求1所述的奥氮平测定试剂盒，其特征在于，r2所述的生物素标记奥氮平抗体为单克隆抗体或多克隆抗体；
4.如权利要求1所述的奥氮平测定试剂盒，其特征在于，r2所述的生物素标记奥氮平抗体，其中活化生物素包括但不局限于生物素酰肼，生物素对硝基酚酯，生物素n羟基丁二酰亚胺酯，活化长臂生物素。
5.如权利要求1所述的奥氮平测定试剂盒，其特征在于，r3所述的化学发光标记物为吖啶酯、鲁米诺、辣根过氧化...
【专利技术属性】
技术研发人员：李忠鹏，何扬锦，严军，陈颖，
申请(专利权)人：浙江准策生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：
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