树突细胞祖细胞的制备方法及其培养基技术

技术编号:40541214 阅读:20 留言:0更新日期:2024-03-05 18:57
本发明专利技术涉及树突细胞祖细胞的制备方法及其培养基,具体提供制备树突细胞祖细胞的方法,包括步骤:将来自外周血的细胞在培养基中培养,获得树突细胞祖细胞。本发明专利技术方法可以快速准确地从外周血中获取树突细胞祖细胞。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及细胞培养。更具体地,涉及从外周血中获得大量igdp(individual general dendritic cell progenitor,树突细胞组细胞)的方法及其应用。


技术介绍

1、免疫系统,包括固有免疫和适应性免疫,是人体重要的保护屏障。树突细胞(dendritic cell,dc)是功能最强的专职抗原递呈细胞(antigen presenting cells,apc),是固有免疫和适应性免疫之间的桥梁。树突细胞能激活初始型t细胞、控制着体内免疫应答反应过程,是抗肿瘤免疫反应的中心环节。利用树突细胞进行免疫治疗能诱导患者机体产生肿瘤特异性、持久的免疫应答。

2、树突细胞疫苗的临床应用取得了巨大进展。截至2022年7月25日,美国国立卫生研究院管理的“clinical trail”临床数据登记平台显示,以“dendritic cells”为关键词共有1183项树突细胞治疗临床试验登记,处于临床ⅲ/iv期的树突细胞治疗临床试验有27项,主要适应症为黑色素瘤、肾癌、前列腺癌等,白血病和hiv感染等。2010年基于树突细胞疫苗的本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种制备树突细胞祖细胞的方法,其特征在于,将来自外周血的细胞在培养基中培养,获得树突细胞祖细胞。

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述培养基含有生长因子、Raf/MEK/ERK通路调节剂、异恶唑衍生物中的至少两种。

3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述生长因子选自SCF、GM-CSF、G-CSF、IL-3、FLT-3L中的至少一种,更优选地,所述生长因子含有SCF以及选自GM-CSF、G-CSF、IL-3、FLT-3L中的至少一种。

4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,

5.根据权利要求2-4中任一项所述的方法...

【技术特征摘要】

1.一种制备树突细胞祖细胞的方法,其特征在于,将来自外周血的细胞在培养基中培养,获得树突细胞祖细胞。

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述培养基含有生长因子、raf/mek/erk通路调节剂、异恶唑衍生物中的至少两种。

3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述生长因子选自scf、gm-csf、g-csf、il-3、flt-3l中的至少一种,更优选地,所述生长因子含有scf以及选自gm-csf、g-csf、il-3、flt-3l中的至少一种。

4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,

5.根据权利要求2-4中任一项所述的方法,其特征在于,所述raf/mek/erk通路调节剂为mek激活剂和/或erk激活剂。

6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,所述raf/mek/erk通路调节剂选自gdc-0879、plx4720、vemurafenib、sorafenib、dabrafenib中的一种或几种,优选为gdc-0879。

7.根据权利要求2-6中任一项所述的方法,其特征在于,所述raf/mek/erk通路调节剂的浓度为0.1-5μm,优选为0.5-1.5μm。

8.根据权利要求2-7中任一项所述的方法,其特征在于,所述异恶唑衍生物为式(i)所示的化合物:

9.根据权利要求2-8中任一项所述的方法,其特征在于,所述异恶唑衍生物的浓度为0-15μm,优选为0-10μm,更优选为1-10μm,进一步优选为4-6μm。

10.根据权利要求2-9中任一项所述的方法,其特征在于,所述培养基还含有嘧啶并吲哚衍生物,优选地,所述嘧啶并吲哚衍生物如式(ii)所示,

11.根据权利要求10所述的方法,其特征在于,所述嘧啶并吲哚衍生物的浓度为0-80nm,优选为0-50nm。

12.根据权利要求2-11中任一项所述的方法,其特征在于,所述培养基还含有基础培养基,例如基础无血清培养基;优选地,所述基础培养基包括商业无血清培养基或补充有添加物的基本培养基。

13.根据权利要求12中任一项所述的方法,其特征在于,

14.根据权利要求13所述的方法,其特征在于,

15.根据权利要求1-14中任一项所述的方法,所述外周血为未经造血干细胞动员的外周血。

16.根据权利要求1-15中任一项所述的方法,其特征在于,所述细胞选自cd45+白细胞、cd14+细胞、cd14-细胞、cd123+细胞、cd123-细胞、cd34-细胞中的一种或多种。

17.一种培养基,其特征在于,用于从外周血制备树突细胞祖细胞,所述培养基含有生长因子、ra...

【专利技术属性】
技术研发人员:佟曼马丽向葱崔晓燕钱其军
申请(专利权)人:浙江吉量科技有限公司
类型:发明
国别省市:

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