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【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及甲状腺球蛋白的免疫检测及用于其的试剂盒。
技术介绍
1、甲状腺球蛋白(tg)是仅由甲状腺滤泡细胞制成的分子量66万的糖蛋白。生物合成的tg被释放至滤泡腔。在该过程中,通过过氧化物酶的作用,碘分子与tg分子中的酪氨酸基结合,进行甲状腺激素的合成。滤泡腔的tg再次被滤泡细胞摄入,在滤泡细胞内分解,引起甲状腺激素的释放。另外,该过程通过甲状腺激素(tsh)的作用而被激活。因此,在正常时,tg本身在血中的释放仅略微发生,tg的血中释放表示甲状腺的某种异常。因此,tg是器官特异性高、对甲状腺疾病极其有用的标记物。特别地,血中tg被用作甲状腺分化癌的手术评价、以及知晓术后复发、转移的有无的标记物。此外,对于在格雷夫斯病(日语:バセドウ病)中的治疗的效果、缓解的指标、先天性甲状腺功能低下症的病型的确定、鉴别、治疗监测等也是有用的。另外,还暗示了通过与图像诊断的组合来鉴别结节性甲状腺瘤的术前诊断、良性甲状腺疾病和恶性肿瘤的可能性。
2、但是,在受试者为抗甲状腺球蛋白抗体(tgab)阳性的情况下,实际上即使是tg高值,有时也因在测定方面的问题而导致成为低值。例如,甲状腺癌中,患者的20~30%为tgab阳性,因此在tg测定时,需要同时测定tgab。另外,在tgab阳性的桥本病中,难以准确测定tg的量,同样地,在观察到tgab阳性的其它自身免疫性疾病(格雷夫斯病(basedow))中,也有可能无法准确测定tg的量。
3、已知以准确地测定tg的量为目的,利用表面活性剂或酸性化剂对试样进行预处理的甲状腺球蛋白测定方
4、现有技术文献
5、专利文献
6、专利文献1:wo 2018/047792
7、专利文献2:wo 2020/0241443
8、专利文献3:日本特开平7-46966号公报
技术实现思路
1、专利技术所要解决的技术问题
2、本专利技术的目的在于提供一种新的方法,该方法即使在抗甲状腺球蛋白抗体为阳性的样本中,也能够准确地测定样本中的甲状腺球蛋白量。
3、用于解决技术问题的技术方案
4、本申请专利技术人等进行了深入研究,结果发现,通过还原处理,能够使甲状腺球蛋白/抗甲状腺球蛋白抗体免疫复合物解离,成功地制作了以解离后的经还原处理的甲状腺球蛋白为对应抗原的单克隆抗体,发现通过使用了该单克隆抗体的免疫检测,在抗甲状腺球蛋白抗体阳性的样本中也能够准确地测定甲状腺球蛋白,从而完成了本专利技术。
5、即,本专利技术提供以下的方案。
6、(1)一种通过免疫检测来测定从生物体分离的样本中的甲状腺球蛋白的方法,其包含利用还原剂处理从生物体分离的样本的预处理工序,其中,该免疫检测是使用以利用还原剂处理得到的甲状腺球蛋白为对应抗原的单克隆抗体或其抗原结合性片段的免疫检测。
7、(2)根据(1)所述的方法,其中,所述单克隆抗体的对应表位包含在序列号1~5中的任一者所示的氨基酸序列中。
8、(3)根据(1)或(2)所述的方法,其中,所述免疫检测为夹心法,所述单克隆抗体或其抗原结合性片段用于该夹心法的第一抗体和第二抗体中的至少任一者。
9、(4)根据(3)所述的方法,其中,所述第一抗体包含选自序列号1的氨基酸序列中包含所述对应表位的抗体和序列号5的氨基酸序列中包含所述对应表位的抗体中的至少1种,所述第二抗体包含选自序列号2的氨基酸序列中包含所述对应表位的抗体、序列号3的氨基酸序列中包含所述对应表位的抗体和序列号4的氨基酸序列中包含所述对应表位的抗体中的至少1种。
10、(5)根据(4)所述的方法,其中,所述第一抗体为捕捉抗体,第二抗体为标记抗体。
11、(6)一种用于进行(1)所述方法的免疫检测试剂盒,其包含还原剂以及单克隆抗体或其抗原结合性片段,所述单克隆抗体或其抗原结合性片段以利用还原剂处理得到的甲状腺球蛋白为对应抗原。
12、专利技术效果
13、根据本专利技术,即使在抗甲状腺球蛋白抗体阳性的样本中,也能够准确地测定甲状腺球蛋白。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种通过免疫检测来测定从生物体分离的样本中的甲状腺球蛋白的方法,其特征在于,包含利用还原剂处理从生物体分离的样本的预处理工序,
2.根据权利要求1所述的方法,其中,所述单克隆抗体的对应表位包含在序列号1~5中的任一者所示的氨基酸序列中。
3.根据权利要求1或2所述的方法,其中,所述免疫检测为夹心法,所述单克隆抗体或其抗原结合性片段用于该夹心法的第一抗体和第二抗体中的至少任一者。
4.根据权利要求3所述的方法,其中,所述第一抗体包含选自序列号1的氨基酸序列中包含所述对应表位的抗体和序列号5的氨基酸序列中包含所述对应表位的抗体中的至少1种,
5.根据权利要求4所述的方法,其中,所述第一抗体为捕捉抗体,第二抗体为标记抗体。
6.一种用于进行权利要求1所述方法的免疫检测试剂盒,其特征在于,包含还原剂以及单克隆抗体或其抗原结合性片段,所述单克隆抗体或其抗原结合性片段以利用还原剂处理得到的甲状腺球蛋白为对应抗原。
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】
1.一种通过免疫检测来测定从生物体分离的样本中的甲状腺球蛋白的方法,其特征在于,包含利用还原剂处理从生物体分离的样本的预处理工序,
2.根据权利要求1所述的方法,其中,所述单克隆抗体的对应表位包含在序列号1~5中的任一者所示的氨基酸序列中。
3.根据权利要求1或2所述的方法,其中,所述免疫检测为夹心法,所述单克隆抗体或其抗原结合性片段用于该夹心法的第一抗体和第二抗体中的至少任一者。
4.根据权利要求...
【专利技术属性】
技术研发人员:新井修,八木慎太郎,青柳克己,
申请(专利权)人:株式会社先端生命科学研究所,
类型:发明
国别省市:
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