松材线虫快速检测方法及试剂盒技术

技术编号:4048492 阅读:329 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
一种松材线虫快速检测方法及试剂盒,松材线虫特异性引物序列如序列表的序列1和2所示,线虫DNA提取液中各原料及浓度是:200mmol/L?Tris-HCl、200mmol/L?NaCl、100mmol/LEDTA、20mg/mL?SDS、20μL/mLβ-巯基乙醇和200μg/mL蛋白酶K;PCR反应用液为:10×PCR缓冲液、10mM?dNTP、20μMSCXC-F、20μM?SCXC-R、5U/μL?Taq?DNA聚合酶、松材线虫阳性DNA和重蒸水;本试剂盒及其检测方法对松材线虫的成虫、幼虫及卵都能检测,且能分辨出松材线虫与拟松材线虫,具有检测快速、简便和准确的优点。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种松材线虫快速检测试剂盒,包括特异性引物、DNA提取液、松材线虫阳性DNA及PCR反应用液,其特征是:  1)松材线虫特异性引物序列:  SCXC-F:5’-AAAATAAATGTAAAATGAATG-3’;  SCXC-R:5’-GTGCTCGTCACGATGATG-3’;  2)线虫DNA提取液中各原料及其浓度是:  200mmol/L Tris-HCl、200mmol/L NaCl、100mmol/L EDTA、20mg/mL SDS、20μL/mLβ-巯基乙醇和200μg/mL蛋白酶K;  3)PCR反应用液为:  10×PCR缓冲液、10mM dNTP、20μM SCXC F、20μM SCXC R、5U/μL Taq DNA聚合酶、松材线虫阳性DNA和重蒸水。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:马新颖徐志宏陈为民
申请(专利权)人:浙江农林大学杭州市森林和野生动物保护管理总站
类型:发明
国别省市:33[中国|浙江]

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