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【技术实现步骤摘要】
技术介绍
技术实现思路
【技术保护点】
1.一种控制细胞中遗传序列转录的方法,包括
2.一种从多能干细胞产生肌细胞的方法,所述方法包括步骤:
3.根据权利要求1或2所述的方法,其中所述细胞是哺乳动物细胞、有袋类动物细胞、非人灵长类动物细胞、驼类动物细胞或家畜动物细胞,或者优选地所述细胞是来自家畜动物的细胞。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的方法,其中所述细胞是来自猪或来自牛的细胞。
5.根据权利要求1至4中任一项所述的方法,其中所述方法用于将多能干细胞编程为成熟细胞。
6.根据权利要求1至5中任一项所述的方法,其中所述转录调节蛋白选自以下任一者:逆向四环素反式激活蛋白(rtTa)、四环素阻抑蛋白(TetR)、VgEcR合成性受体或杂合转录调节蛋白,所述杂合转录调节蛋白包含来自酵母GAL4蛋白的DNA结合结构域、来自人孕酮受体的截短型配体结合结构域和来自人NF-κB的激活结构域。
7.根据权利要求6所述的方法,其中rtTA的活性受四环素或其衍生物、任选地多西环素控制,且其中诱导型启动子包括Tet应答元件(TRE)。
8.根据权利要求1
9.根据权利要求1至8中任一项所述的方法,其中所述方法先体外后体内进行。
10.根据权利要求1至9中任一项所述的方法,其中在第一和/或第二基因组安全港位点插入额外的遗传物质,所述额外的遗传物质任选地包含以下一种或多种:
11.细胞,其通过权利要求1至10中任一项所述的方法制备。
12.具有修饰的基因组的动物细胞,所述修饰的基因组包含插入第一遗传安全港位点中的编码转录调节蛋白的基因;和插入第二遗传安全港位点中的包含与诱导型启动子有效连接的遗传序列的可诱导盒,其中所述诱导型启动子受转录调节蛋白调节并且所述第一和第二遗传安全港位点是不同的。
13.根据权利要求12所述的动物细胞,其中所述可诱导盒包含编码MYOD1的遗传序列。
14.根据权利要求11至13中任一项所述的细胞的用途,用于组织工程化。
15.根据权利要求14所述的用途,用于培养肉的生产。
16.减少动物细胞中内源性基因转录和/或翻译的方法,包括以下步骤:
17.敲除动物细胞中内源性基因的方法,包括以下步骤:
...【技术特征摘要】
1.一种控制细胞中遗传序列转录的方法,包括
2.一种从多能干细胞产生肌细胞的方法,所述方法包括步骤:
3.根据权利要求1或2所述的方法,其中所述细胞是哺乳动物细胞、有袋类动物细胞、非人灵长类动物细胞、驼类动物细胞或家畜动物细胞,或者优选地所述细胞是来自家畜动物的细胞。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的方法,其中所述细胞是来自猪或来自牛的细胞。
5.根据权利要求1至4中任一项所述的方法,其中所述方法用于将多能干细胞编程为成熟细胞。
6.根据权利要求1至5中任一项所述的方法,其中所述转录调节蛋白选自以下任一者:逆向四环素反式激活蛋白(rtta)、四环素阻抑蛋白(tetr)、vgecr合成性受体或杂合转录调节蛋白,所述杂合转录调节蛋白包含来自酵母gal4蛋白的dna结合结构域、来自人孕酮受体的截短型配体结合结构域和来自人nf-κb的激活结构域。
7.根据权利要求6所述的方法,其中rtta的活性受四环素或其衍生物、任选地多西环素控制,且其中诱导型启动子包括tet应答元件(tre)。
8.根据权利要求1至7中任一项所述的方法,其中所述第一和第二基因组安全港位点选自以下任...
【专利技术属性】
技术研发人员:L·瓦里尔,M·科特,M·帕洛夫斯基,A·贝尔泰罗,D·奥特曼,
申请(专利权)人:剑桥企业有限公司,
类型:发明
国别省市:
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