【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及植物转基因工程，具体涉及过表达dir15基因在促进毛白杨花青素合成中的应用。
技术介绍
1、彩叶林景观是我国重要生态景观资源。彩叶树种是形成彩叶林景观的核心成分，其叶色在生长期内稳定地呈现非绿色而具有观赏价值。
2、目前我国彩叶树种优良品种匮乏，采用分子育种技术创制彩叶树新品种，是尽快突破目前我市彩叶林产业发展瓶颈的有效手段。而杨树是我国传统的绿化和造林用树，同时其全基因组测序的完成及完善的遗传转化体系，也使得其成为通过分子育种手段创制彩叶树良种的理想材料。
3、花青素是一类广泛存在于植物中的重要类黄酮化合物，在植物生长、代谢和胁迫反应中起到重要作用。花青素在生长发育过程中，使植物的花果呈现丰富的色彩，吸引昆虫授粉和动物摄食，从而促进种子的传播。已有研究显示，在植物中形成转录因子复合物可以提高花青素的产量和稳定性。这其中有三种转录因子被报道广泛参与花青素的调控，分别为myb,bhlh和wd40，这三种转录因子通过形成一个mbw的转录复合体共同作。该复合体已经在包括拟南芥、玉米、矮牵牛、大尾草和苜蓿在内的多种模式物种中被发现。
4、而在杨树中也已经报道了多个myb转录因子调控花青素的合成。ptrmyb57编码一种位于细胞核的r2r3-myb蛋白，主要在成熟叶片中表达，在杨树花青素和pa生物合成中起负调控作用。转录因子myb120在杨树中能够显著促进花青素累积。还有其他调控蛋白也被发现参与植物花青素的生物合成，这些转录因子在调控花青素结构生物合成基因的表达中起着促进或抑制的作用，并在
5、现有大量关于结构基因和转录因子如何调控花青素的研究，但对于是否存在其他功能基因调控花青素还不清楚。目前多个物种的dir基因已被解析，但对于dir基因能否参与杨树中花青素生物合成的调控目前还不清楚。因此研究dir是否能够在杨树中调控花青素合成，对于完善花青素调控网络是至关重要的，最终为创制彩叶杨新品种提供理论基础及优良种质素材。
技术实现思路
1、有鉴于此，本专利技术的目的在于提供过表达dir15基因在促进毛白杨花青素合成中的应用。
2、为达到上述目的，本专利技术提供如下技术方案：
3、1、过表达dir15基因在促进毛白杨花青素合成中的应用。
4、本专利技术优选的，编码所述dir15基因的核苷酸序列为seq id no.3所示。
5、本专利技术优选的，含如下步骤：
6、(1)通过pcr扩增所述dir15基因，将扩增的基因片段连接于植物表达载体上，构建得到dir15过表达载体；
7、(2)将步骤(1)中构建的dir15过表达载体转化入农杆菌感受态细胞中，得到农杆菌工程菌；
8、(3)使用步骤(2)中构建的农杆菌工程菌，通过农杆菌介导的遗传转化方法将dir15基因转入植物中，并对植物体进行分子水平鉴定，得到dir15基因上调表达的阳性转基因植株，筛选出花青素含量提高的转基因植株。
9、本专利技术优选的，步骤(1)中所述植物表达载体为pcxsn-flag。
10、本专利技术优选的，步骤(1)中所述农杆菌为农杆菌gv3101菌株。
11、本专利技术的有益效果在于：本专利技术过表达dir15基因在促进毛白杨花青素合成中的应用。通过构建dir15过表达载体，经根癌农杆菌侵染法转化野生型毛白杨后获得dir15过表达转基因植株，经后续阳性鉴定筛选出表达量较高的植株，进行高光处理后，对其表型进行观察以及总花青素含量测定。结果发现，强光处理后，与同时期野生型相比，过表达dir15的转基因植株颜色更红，总花青素含量显著性增高，表明dir15能促进花青素的累积。本专利技术提供的培育技术方法，为彩叶杨新品种提供理论基础及优良种质素材。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.过表达DIR15基因在促进毛白杨花青素合成中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，编码所述DIR15基因的核苷酸序列为SEQID NO.3所示。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，包含如下步骤：
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，步骤(1)中所述植物表达载体为pCXSN-FLAG。
5.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，步骤(1)中所述农杆菌为农杆菌GV3101菌株。
【技术特征摘要】
1.过表达dir15基因在促进毛白杨花青素合成中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，编码所述dir15基因的核苷酸序列为seqid no.3所示。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于...
【专利技术属性】
技术研发人员：许长征，姜倩倩，杨雪瑞，付小康，罗克明，赵爱春，
申请(专利权)人：西部重庆科学城种质创制大科学中心，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。