家蚕中敲除seroin2基因表达在制备家蚕散卵品系中的应用及方法技术

本发明专利技术公开了家蚕中敲除seroin2基因表达在制备家蚕散卵品系中的应用及方法，敲除Seroin2基因表达使用敲除Seroin2基因的家蚕双元转基因系统，所述系统包括基于piggyBac的Cas9表达载体和靶标Seroin2基因的sgRNA表达载体；敲除Seroin2基因后能够降低卵胶的产生，获得散卵品系，对降低家蚕制种成本具有重要意义。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物，具体涉及家蚕中敲除seroin2基因表达在制备家蚕散卵品系中的应用，还涉及制备散卵品系的方法。

技术介绍

1、蚕的一生经过蚕卵—蚁蚕—熟蚕—蚕茧—蚕蛾，共五十多天的时间。蚕用卵繁殖，拥有强大繁殖能力，一般交尾3～4小时后，雌蛾就可产下受精卵。家蚕雌性附腺由分泌部和贮存部组成，分泌部分泌的胶状蛋白贮存于贮存部中。胶状粘液蛋白主要作用是将产出的卵粘附于外界的物质上，以保证家蚕在恶劣环境中也能正常继代。制种过程从收茧开始到消茧、产卵、浴种、消毒等十几道环节。浴种是蚕种生产过程中最关键的一道环节。制种师傅们凌晨4点就要起床准备，将一块块粘满蚕种的蚕布提前放在水中浸泡，然后再人工洗刷下来。这样费时费力，人工成本极高。

2、crispr-cas9基因编辑技术作为生物医学史上第一种可高效、精确、程序化修改基因组的工具，极大推动了基因编辑的发展。相较于zip和talen两项技术更加快速且高效，因此广泛适用于各种真核生物系统；同时，该技术的操作较为简单、成本较低，可用于普通实验室，极大地推动了生命科学与医学基础研究中基因编辑的进步。因此，利用本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.家蚕中敲除seroin2基因表达在制备家蚕散卵品系中的应用，其特征在于：所述敲除Seroin2基因表达使用敲除Seroin2基因的家蚕双元转基因系统，所述系统包括基于piggyBac 的Cas9表达载体和靶标Seroin2基因的sgRNA表达载体。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述sgRNA的位点序列如SEQ ID NO.1所示。

3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：sgRNA表达载体由以下方法制备：将SEQ IDNO.2和SEQ ID NO.3所示核苷酸序列退火形成双链连入gRNA表达载体，然后将U6-gRNA-TTTTT 替换pBac[...

【技术特征摘要】

1.家蚕中敲除seroin2基因表达在制备家蚕散卵品系中的应用，其特征在于：所述敲除seroin2基因表达使用敲除seroin2基因的家蚕双元转基因系统，所述系统包括基于piggybac 的cas9表达载体和靶标seroin2基因的sgrna表达载体。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述sgrna的位点序列如seq id no.1所示。

3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：sgrna表达载体由以下方法制备：将seq idno.2和seq id no.3所示核苷酸序列退火形成双链连入grna表达载体，然后将u6-grna-ttttt 替换pbac[u6-grna-glmn, 3xp3-egfp]载体上的pu6-glmn-grna scaffold-t6获得sgrna表达载体。

4.家蚕散卵品系的制备方法，其特征在于：通过在家蚕中敲除seroin2基因，筛选纯合突变个体，获得家蚕纯散卵品种。

5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于：所述敲除seroin2基因表达的方法是通过zfns、talens和crispr/cas9或其变体介导靶标seroin2基因敲除。

6.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于：所述敲除seroin2基因表达的方法是通过crispr/cas9介导敲除家蚕seroin2基...

【专利技术属性】
技术研发人员：张晓璐，郭凯雨，赵萍，夏庆友，
申请(专利权)人：西部重庆科学城种质创制大科学中心，
类型：发明
国别省市：