包含粘膜粘附性配制的核酸活性成分的多颗粒状药物剂型以及制备所述药物剂型的方法技术

本发明专利技术涉及包含尺寸为５０至２５００μｍ的丸粒的口服多颗粒药物剂型，这些丸粒基本上由下列部分构成：ａ）包含纳米颗粒的内部基质层，这些纳米颗粒含有核酸活性成分并被包埋在由具有粘膜粘附作用的聚合物构成的基质中，和ｂ）外部成膜化包衣，其基本上由可任选与制药常规辅料，尤其是增塑剂一起配制的阴离子聚合物或共聚物构成。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及包含粘膜粘附性配制的核酸活性成分的多颗粒状药物剂型以及制备该药物剂型的方法。
技术介绍
WO 02/64148描述了包含粘多糖的配制剂及其制备方法。在此，粘多糖，例如肝素，与吸附增强剂，例如壳聚糖一起配制，随后向其提供可溶于肠液的包衣，使得活性成分可以在小肠的中段或下段释放。合适的可溶于肠液的包衣的例子是EUDRAGITL、S、L100-55型阴离子丙烯酸系共聚物。该配制剂可以包括胶囊、片剂和粒剂。端粒酶是一种在细胞分裂时促进DNA加倍，尤其是在染色体末端区域中的DNA加倍的酶。该酶因此对于保持完好的染色体结构是重要的。端粒酶活性在大多数成人体细胞中受到抑制，仅在生殖细胞中，但也在许多肿瘤细胞类型中观察到提高的端粒酶活性。据推测，端粒酶在细胞的直至它们的遗传预程序化细胞死亡的正常生命周期的分子控制中起到重要作用。肿瘤细胞中不同于正常细胞的高端粒酶活性被认为是正常的细胞分裂控制已丧失的征兆。端粒酶或与其相关的基因结构被视为是肿瘤细胞的基因治疗的出发点。WO 99/38964描述了用于基因治疗的核酸，其特别包含端粒酶基因启动子。这种DNA可以与外源基因，例如细胞毒素编码基因结合。该核酸构建体可用作具有提高的端粒酶活性的肿瘤细胞的转染用的活性成分。期望这会抑制肿瘤细胞分裂直至特异性杀死这些细胞。提到了WO 99/38964中所述的活性成分类型或由其衍生的药物剂型的口服可能性。Roy等人(1999)在Nature Medicine，第5卷，第4期，第387-391页，“Oral gene delivery with chitosan-DNA nanoparticlesgenerates immunologic protection in murine model of peanutallergy(具有壳聚糖-DNA纳米颗粒的口服基因递送在鼠性模型中产生对花生过敏反应的免疫保护)”中描述了DNA活性成分在小鼠中的口服给药。通过复合聚生将质粒DNA上存在的显性花生过敏原基因(pCMVArah2)与Mw为大约390000的壳聚糖一起配制成尺寸为100至200纳米的纳米颗粒。将这些纳米颗粒口服给药给AKR/J小鼠，在此可以检测肠上皮细胞中的转导基因表达。由此处理的小鼠产生过敏原特异性分泌IgA抗体和血清IgG2a抗体，并表现出与对照组相比降低的过敏原诱发的过敏性反应。Leong等人(1998)在Journal of Controlled Release 53，第183-193页，“DNA-polycation nanospheres as non-viral genedelivery vehicles(作为非病毒基因递送载体的DNA聚阳离子纳米球)”中描述了基因转移载体，其在BALB/c小鼠体内产生外源基因表达。纳米球作为DNA与明胶或尺寸为200至700纳米的壳聚糖的配合物形式制备。WO 02/094983描述了由核酸、对DNA具有特异性的抗体和与此相关的阳离子大分子配合物组成的配制剂。配制以纳米颗粒形式完成，其中在体外和体内均检测到提高的转染速率。提到了具有活性成分缓释的口服用配制剂。WO 03/007913描述了口服多颗粒状药物剂型，其包含以大量所谓膜片(Patches)形式的活性成分。膜片是由生物相容性材料构成的直径为500微米至5毫米且高度为100至1000微米的圆盘形物体。膜片由两层或两面构成，一面对水或体液仅具有低渗透性，例如由乙基纤维素构成，第二面包含活性成分，例如蛋白质、多糖或小分子，其可以与粘膜粘附性聚合物，例如壳聚糖、CMC、聚丙烯酸或果胶混合存在。这些膜片可以被压制形成片剂或被填充到胶囊中，该胶囊另外具有可溶于肠液的包衣。该活性成分制剂还可以与所谓的增强剂(例如脂肪酸、脂肪醇、酯、表面活性物质和蛋白酶抑制剂)组合。在作用位点，例如在肠的特定段，胶囊溶解并释放出膜片。释放出的膜片能够以它们的粘膜粘附面粘附到肠粘膜上，并在那里缓释活性成分和向肠粘膜靶向释放。膜片的仅低可渗透的第二面旨在为活性成分提供一定保护以免肠腔一面的化学或酶促失活，并防止活性成分向这一面上逸出。WO 03/092732描述了基于具有1000至50000的比较低的分子量Mw的阴离子(甲基)丙烯酸酯共聚物的pH敏感聚合物。该pH敏感聚合物尤其还适于配合核酸。该pH敏感聚合物在pH7.0或略高的范围中仅在高浓度下具有细胞毒素性质或完全没有细胞毒素性质，但在低于pH6.5时在低浓度下就已在体内具有细胞毒素或溶血或膜溶解(membranolytisch)作用。
技术实现思路
问题和解决方案WO 99/38964描述了与人类端粒酶基因或该基因的启动子有关的核酸和载体。其中所述的核酸可以被视为用于肿瘤细胞的基因治疗的潜在活性成分。WO 99/38964中仅非常一般性地提出所述的活性成分类型的口服给药。需要提出使本领域技术人员能够以不会发生过早失活(尤其是由核酸酶引起的)且足够比例的活性成分成功转染目标细胞的方式将这种类型的活性成分输送到作用位点的配制剂。开头提到的描述了纳米颗粒中的抗体-DNA共轭配合物的WO 02/094983也仅对口服药物剂型的配制给出相当一般性的暗示。WO 03/007913描述了对提供口服药物剂型的可能解决方案，该剂型在肠腔中释放并意于在此发挥作用。这种解决方案的一个缺点可尤其认为是两层膜片结构的复杂构造和制备。以具有耐胃液并可溶于肠液的包衣的胶囊形式提供药物剂型似乎特别不利。当尺寸明显大于2.5毫米时，会担心治疗再现性不足。胶囊通过胃的时间可能变化很大。在任何情况下都预期作用会延迟发生。此外，胶囊本身可能在包衣出现部分溶解后就已迅速或缓慢地溶解。包衣和胶囊两种原理在这种情况下以不利方式重叠，使得膜片的释放预计会总体上不受控。胶囊可在至少已部分可接触到肠液的情况下，取决于这时的肠内容物或肠蠕动而保持完好或基本上被机械破坏。视最初包衣的胶囊形成物的崩解或机械应力而定，一方面可能突然释放出大量膜片，或另一方面也可能出现不希望的延迟释放。因此，很希望总体上可更好地控制活性成分的释放。本专利技术涉及用于核酸活性成分的可口服给药的药物剂型，特别是用于基因治疗目的。这方面的一般性问题是以有利于活细胞在作用位点上的转染并同时确保活性成分或至少足量活性成分以能够转染的形式到达作用位点的剂型配制活性成分。本专利技术的问题之一被认为是提供适用于核酸活性成分的靶向和有效释放的药物剂型。这种药物剂型旨在提供高的剂量可靠性并在迅速通过胃后在肠腔中良好分布。所含核酸活性成分在此应受到保护以在很大程度上避免物理、化学或溶核失活，并在指定作用位点释放，使得高比例活性成分可以被机体吸收。释放位点应视治疗目的而定是可变的并可以可靠地调节。药物剂型除了DNA活性成分外仅应包含药理学可接受的非毒性成分，这样即使在药物剂型的频繁或定期摄取时，在最初开始就预计没有不希望的副作用。该问题由包含平均直径为50至2500微米的丸粒的口服多颗粒状药物剂型解决，这些丸粒由下列部分构成a)包含纳米颗粒的内部基质层，这些纳米颗粒含有核酸活性成分并包埋在由具有粘膜粘附作用的聚合物构成的基质中，其中该基质可任选包含其它制药常用辅料，b)外部成膜化包衣，其基本上本文档来自技高网...

【技术保护点】
口服多颗粒状药物剂型，其包含平均直径为５０至２５００微米的丸粒，这些丸粒基本上由下列部分构成：ａ）包含纳米颗粒的内部基质层，这些纳米颗粒含有核酸活性成分并被包埋入由具有粘膜粘附作用的聚合物构成的基质中，其中该基质任选可包含其它制药常 用辅料，ｂ）外部成膜化包衣，其基本上由任选可与制药常用辅料，尤其是增塑剂一起配制的阴离子聚合物或共聚物构成，其特征在于，将该多颗粒状药物剂型配制使得所含丸粒在胃的ｐＨ范围内被释放，通过阴离子聚合物或共聚物或其与辅料的 配制剂及其层厚的选择调节外部包衣，以使该包衣在肠中在４．０至８．０的ｐＨ范围内在１５至６０分钟内溶解，从而暴露出含活性成分的粘膜粘附性基质层，并且该层可以接合到肠粘膜上并在那里释放出活性成分，其中选择具有粘膜粘附作用的聚合物以使其在基于外部包衣开始溶解时的ｐＨ值计±０．５ｐＨ单位的范围内表现出至少η↓［ｂ］＝１５０至１０００ｍＰａ.ｓ的粘膜粘附作用和在１５分钟内１０至７５０％的水吸收，且基质层中纳米颗粒的活性成分含量最多为具有粘膜粘附作用的聚合物含量的４０ｗｔ％。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：R利齐奥，HU彼得莱特，D特鲁普提，M古特斯查克，
申请(专利权)人：罗姆有限公司，
类型：发明
国别省市：DE[德国]