采用交叉引物恒温扩增技术检测产生肠毒素Hbl的蜡样芽孢杆菌的引物、试剂盒与方法技术

技术编号:40103431 阅读:29 留言:0更新日期:2024-01-23 18:03
本发明专利技术提供了一种采用交叉引物恒温扩增技术检测产生肠毒素Hbl的蜡样芽孢杆菌的引物、试剂盒与方法。通过交叉引物恒温扩增反应对目标序列快速进行恒温扩增,在1h内就能获得阳性结果,同时由于该反应所需的引物较多,检测结果准确度极高。通过扩增反应是否发生就可判断靶基因的存在与否,从而完成了对蜡样芽孢杆菌肠毒素Hbl的特异性检测。解决了目前快速检测领域难以特异性检测出致病性蜡样芽孢杆菌的难题。该方法针对蜡样芽孢杆菌的检测限为6.0ng/μL,灵敏度是常规PCR的百倍以上。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物,特别涉及一种采用交叉引物恒温扩增技术检测产生肠毒素hbl的蜡样芽孢杆菌的引物、试剂盒与方法。


技术介绍

1、蜡样芽孢杆菌是芽孢杆菌属的一种革兰氏阳性菌,兼性需氧。虽然自然界中大多数的蜡样芽孢杆菌均不具有致病性,但蜡样芽孢杆菌仍是我国食品中最新常见的污染菌和条件致病菌之一。肠毒素hbl是蜡样芽孢杆菌中常见的肠毒素之一,致病性蜡样芽孢杆菌该毒素的携带率在90%以上,因此开发一种快速准确的检测蜡样芽孢杆菌肠毒素hbl的检测方法十分有必要。

2、目前检测蜡样芽孢杆菌的方法主要有三大类,分别为传统培养法、免疫学方法和分子生物学方法。传统培养法费时费力,效率低,并且完全无法区分致病性蜡样芽孢杆菌和非致病性蜡样芽孢杆菌。免疫学检测方法和传统分子生物学方法虽然可以特异性地检测蜡样芽孢杆菌肠毒素hbl,但都存在一定的局限性,前者的缺点是检测成本高且准确率较低,而后者检测时间较长,并且对设备要求较高。

3、交叉引物恒温扩增技术作为一种新型的核酸恒温扩增技术不仅摆脱了传统分子生物学检测方法对控温仪器的依赖,相较于其它恒温扩增技术都有着本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一组采用交叉引物恒温扩增技术检测产生肠毒素Hbl的蜡样芽孢杆菌的引物,其特征在于由剥离引物4s和5a、交叉引物2a1s、特异引物2a和3a构成,其核苷酸序列如下:

2.一种采用交叉引物恒温扩增技术检测产生肠毒素Hbl的蜡样芽孢杆菌的试剂盒,其特征在于:

3.根据权利要求2所述的试剂盒,其特征在于:

4.根据权利要求2所述的试剂盒,其特征在于:

5.根据权利要求4所述的试剂盒,其特征在于:

6.权利要求1所述的采用交叉引物恒温扩增技术检测产生肠毒素Hbl的蜡样芽孢杆菌的引物或权利要求2~5任一所述的采用交叉引物恒温扩增技术检测...

【技术特征摘要】

1.一组采用交叉引物恒温扩增技术检测产生肠毒素hbl的蜡样芽孢杆菌的引物,其特征在于由剥离引物4s和5a、交叉引物2a1s、特异引物2a和3a构成,其核苷酸序列如下:

2.一种采用交叉引物恒温扩增技术检测产生肠毒素hbl的蜡样芽孢杆菌的试剂盒,其特征在于:

3.根据权利要求2所述的试剂盒,其特征在于:

4.根据权利要求2所述的试剂盒,其特征在于:

5.根据权利...

【专利技术属性】
技术研发人员:徐振波游珊迟李雪杰刘君彦金河坡
申请(专利权)人:华南理工大学
类型:发明
国别省市:

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