一种基于等温扩增技术的高危型HPV可视化检测方法技术

本发明专利技术提供了一种基于等温扩增技术的高危型HPV可视化检测方法，该方法包括：对HPV核酸样本进行LAMP等温扩增反应，获得阳性核酸扩增产物；制备胶体金侧向层析试条，胶体金侧向层析试条的检测线T1处包被有抗异硫氰酸抗体，检测线T2处包被有抗地高辛抗体，标记垫层胶体金胶微球上标记有抗生物素抗体；将阳性核酸扩增产物滴加到胶体金侧向层析试条上，生物素与抗生物素抗体结合，形成FITC‑DNA‑生物素‑生物素抗体‑胶体金复合物或DIGoxin‑DNA‑生物素‑生物素抗体‑胶体金复合物；将阳性核酸扩增产物流滴入胶体金侧向层析试条，检测是否为HPV16型阳性或HPV18型阳性。本申请突破设备束缚，诊断结果可视化，能够实现居家自测，提升检测的便携性。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物检测，具体涉及一种基于等温扩增技术的高危型hpv可视化检测方法。

技术介绍

1、环介导等温扩增技术是一种在恒温条件下进行的dna扩增方法，其原理是利用环介导dna聚合酶(bstdnapolymerase)的特殊性质，实现dna的快速扩增。该技术具有操作简便、扩增效率高、无需高精度温控设备等优点，因此在基因检测领域得到了广泛的应用。

2、横向流动试纸条是一种基于毛细管作用和反应物在纸张上的扩散效应的分析方法。通过在试纸条上固定检测目标的特异性探针和信号产生反应物，结合上样样品后，样品中的目标分子与探针发生特异性的反应，形成可视化的颜色信号，从而实现目标分子的快速检测。

3、超过90％的女性一生中至少有一次感染hpv，即宫颈癌患病潜在人群大，产品需求市场大。及早进行宫颈癌早筛，发现宫颈癌前病变并治疗是降低宫颈癌发病率和死亡率的关键。且hpv检测初筛为后续进一步诊断治疗起到决定性作用，进行准确高效的宫颈癌筛查分流可避免不必要的阴道镜转诊，有效减少医疗资源的浪费。

4、然而，宫颈癌筛查覆盖率低、现有宫颈癌检测方本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种基于等温扩增技术的高危型HPV可视化检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的一种基于等温扩增技术的高危型HPV可视化检测方法，其特征在于，还包括：所述FITC-DNA-生物素-生物素抗体-胶体金复合物或者DIGoxin-DNA-生物素-生物素抗体-胶体金复合物流至所述胶体金侧向层析试条的质控线C处时，剩余的生物素抗体-胶体金复合物与质控线C处包被的羊抗鼠抗体结合显示红色线，指示检测结果有效可控。

3.根据权利要求1所述的一种基于等温扩增技术的高危型HPV可视化检测方法，其特征在于，步骤S1具体包括以下子步骤：>

4.根据权利...

【技术特征摘要】

1.一种基于等温扩增技术的高危型hpv可视化检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的一种基于等温扩增技术的高危型hpv可视化检测方法，其特征在于，还包括：所述fitc-dna-生物素-生物素抗体-胶体金复合物或者digoxin-dna-生物素-生物素抗体-胶体金复合物流至所述胶体金侧向层析试条的质控线c处时，剩余的生物素抗体-胶体金复合物与质控线c处包被的羊抗鼠抗体结合显示红色线，指示检测结果有效可控。

3.根据权利要求1所述的一种基于等温扩增技术的高危型hpv可视化检测方法，其特征在于，步骤s1具体包括以下子步骤：

4.根据权利要求3所述的一种基于等温扩增技术的高危型hpv可视化检测方法，其特征在于，所述hpv16的lamp引物为：

5.根据权利要求3所述的一种基于等温扩增技术的高危型hpv可视化检测方法，其特征在于，所述hpv18的lamp引物为：

6.根据权利要求1所述的一种基于等温扩增技术的高危型hpv可视化检测方法，其特征在于，lamp等温扩增反应体系包括以下检测组分：

7.根据权利要求1所述的一种基于等温扩增技术的高危型hpv可视化检测方法，其特征在于，所述lamp...

【专利技术属性】
技术研发人员：蔡文凯，祝珊珊，田忠富，郝宗杰，苏业俣，罗家英，
申请(专利权)人：厦门医学院，
类型：发明
国别省市：