【技术实现步骤摘要】
本申请涉及分析化学的，具体涉及一种hplc检测左氧氟沙星制剂中相关杂质的方法。
技术介绍
1、左氧氟沙星属第三代喹诺酮类抗菌药，其抗菌活性约为氧氟沙星的2倍，主要作用机制为抑制细菌dna旋转酶活性，从而抑制细菌dna的复制。左氧氟沙星具有抗菌效力强、安全性高、耐药性低等特点，对多数肠杆菌科细菌，如肺炎克雷白杆菌、变形杆菌属、伤寒沙门菌属、志贺菌属、部分大肠杆菌等有较强的抗菌活性，对部分葡萄球菌、肺炎链球菌、流感杆菌、铜绿假单胞菌、淋球菌、衣原体等也有良好的抗菌作用。
2、由于左氧氟沙星的组成复杂，左氧氟沙星原料中的相关杂质会对左氧氟沙星制剂的安全性和有效性造成不利影响。目前，针对左氧氟沙星制剂的相关杂质的检测主要是采用高效液相色谱法，但随着相关杂质的增多，通常需要在多个检测波长下进行，并且还可能存在检测谱图的基线分离困难、各峰之间的分离度差(分离度＜1.5)、部分杂质未洗脱出来等问题。因此，急需提供一种检测速度快、检测灵敏度高、准确度高的方法来实现左氧氟沙星制剂中相关杂质(杂质a、杂质b、杂质c、杂质d、杂质e、杂质f、杂质g、杂质h和杂质j)的检测。
技术实现思路
1、为了快速、准确检测左氧氟沙星制剂中的相关杂质(杂质a、杂质b、杂质c、杂质d、杂质e、杂质f、杂质g、杂质h和杂质j)，本申请提供一种hplc检测左氧氟沙星制剂中相关杂质的方法。
2、第一方面，本申请提供一种hplc检测左氧氟沙星制剂中相关杂质的方法，采用如下的技术方案：
3、一
4、所述流动相梯度洗脱方法为：0-42min，流动相a为100％，流动相b为0％；42-60min，流动相a由100％线性减少至0％，流动相b由0％线性增加至100％；60-70min，流动相a为0％，流动相b为100％；70-70.1min，流动相a由0％增加至100％，流动相b由100％减少至0％；70.1-80min，流动相a为100％，流动相b为0％；
5、所述相关杂质选自杂质a、杂质b、杂质c、杂质d、杂质e、杂质f、杂质g、杂质h和杂质j。
6、本申请中，为了实现左氧氟沙星制剂中杂质a、杂质b、杂质e、杂质f、杂质g和杂质j的同时检测，基于美国药典(usp)43提供的方法进行改进，并通过大量实验探究，重新确定了左氧氟沙星制剂中相关物质检测方法中的相关检测条件。因此，本申请提供的检测方法通过采用特定的流动相梯度洗脱程序，并将流动相流速控制为1.2-1.4ml/min，能够快速、准确地同时检测左氧氟沙星制剂中的杂质a、杂质b、杂质c、杂质d、杂质e、杂质f、杂质g、杂质h和杂质j，并且检测的专属性强、灵敏度高、分离度好；将上述检测方法用于左氧氟沙星制剂生产中，能够实现制剂质量的有效把控。
7、优选地，所述分离检测过程中，所述流动相a为醋酸铵高氯酸钠溶液-乙腈，流动相b为高氯酸钠溶液-乙腈-甲醇。
8、进一步优选地，所述分离检测过程中，所述流动相a中，醋酸铵高氯酸钠溶液与乙腈的体积比为(88-92):(8-12)；所述流动相b中，高氯酸钠溶液、乙腈、甲醇的体积比为(40-60):(25-35):(15-25)。
9、在一个具体的实施方案中，所述流动相a中，醋酸铵高氯酸钠溶液与乙腈的体积比为90:10；所述流动相b中，高氯酸钠溶液、乙腈、甲醇的体积比为50:30:20。
10、优选地，所述分离检测过程中，检测波长为230-300nm。
11、优选地，柱温为58-60℃。
12、优选地，进样量为10-15μl。
13、优选地，所述醋酸铵高氯酸钠溶液的ph为2.0-2.4。
14、优选地，所述十八烷基硅烷键合硅胶填料的色谱柱为c18inertsil ods-3色谱柱，规格为4.6mm×250mm，5μm。
15、综上所述，本申请具有以下有益效果：
16、1.本申请采用hplc能够同时检测左氧氟沙星制剂中的9种相关杂质(杂质a、杂质b、杂质c、杂质d、杂质e、杂质f、杂质g、杂质h和杂质j)，并且具有检测灵敏度高、检测准确度高、检测时间短、操作简单等优点。
17、2.本申请提供的hplc检测左氧氟沙星制剂中相关杂质的方法能够同时检测氟康唑中可能存在的相关杂质(杂质a、杂质b、杂质c、杂质d、杂质e、杂质f、杂质g、杂质h和杂质j)，利用上述方法进行检测，杂质a的定量限为0.5029μg/ml，检测限为0.2514μg/ml；杂质b的定量限为0.1004μg/ml，检测限为0.0502μg/ml；杂质c的定量限为0.1508μg/ml，检测限为0.0754μg/ml；杂质d的定量限为0.2990μg/ml，检测限为0.1495μg/ml；杂质e的定量限为0.649μg/ml，检测限为0.2325μg/ml；杂质f的定量限为0.1167μg/ml，检测限为0.0584μg/ml；杂质g的定量限为0.2260μg/ml，检测限为0.1130μg/ml；杂质h的定量限为0.4972μg/ml，检测限为0.2486μg/ml；杂质j的定量限为0.7697μg/ml，检测限为0.3848μg/ml；左氧氟沙星的定量限为0.2448μg/ml，检测限为0.1224μg/ml，说明本申请提供的检测方法具有优异的检测灵敏度。
18、3.在3种加标浓度下，杂质a的回收率在97.83％～117.96％之间，rsd为7.75％(n＝9)；杂质b的回收率在97.45％～100.23％之间，rsd为0.98％(n＝9)；杂质c的回收率在97.83％～101.68％之间，rsd为1.18％(n＝9)；杂质d的回收率在101.17％～107.08％之间，rsd为1.67％(n＝9)；杂质e的回收率在94.56％～102.35％之间，rsd为2.67％(n＝9)；杂质f的回收率在98.59％～101.81％之间，rsd为0.96％(n＝9)；杂质g的回收率在98.00％～102.35％之间，rsd为1.76％(n＝9)；杂质h的回收率在89.69％～104.40％之间，rsd为5.50％(n＝9)；杂质j的回收率在90.33％～102.34％之间，rsd为4.81％(n＝9)。由此可知，本申请提供的hplc检测左氧氟沙星制剂中相关杂质的方法能够对杂质a、杂质b、杂质c、杂质d、杂质e、杂质f、杂质g、杂质h、杂质j进行检测，并且检测的准确度高。
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1.一种HPLC检测左氧氟沙星制剂中相关杂质的方法，其特征在于，所述检测方法包括以下步骤：配制样品溶液、将所述样品溶液注入液相色谱仪中，采用十八烷基硅烷键合硅胶填料的色谱柱及流动相梯度洗脱方法进行分离检测；流动相流速为1.2-1.4mL/min；
2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述分离检测过程中，所述流动相A为醋酸铵高氯酸钠溶液-乙腈，流动相B为高氯酸钠溶液-乙腈-甲醇。
3.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于，所述分离检测过程中，所述流动相A中，醋酸铵高氯酸钠溶液与乙腈的体积比为（88-92）:（8-12）；所述流动相B中，高氯酸钠溶液、乙腈、甲醇的体积比为（40-60）:（25-35）:（15-25）。
4.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述分离检测过程中，检测波长为230-300nm。
5.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述分离检测过程中，柱温为58-60℃。
6.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述分离检测过程中，进样量为10-15μL。
7.根
8.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述十八烷基硅烷键合硅胶填料的色谱柱为C18Inertsil ODS-3色谱柱，规格为4.6mm×250mm，5μm。
...【技术特征摘要】
1.一种hplc检测左氧氟沙星制剂中相关杂质的方法，其特征在于，所述检测方法包括以下步骤：配制样品溶液、将所述样品溶液注入液相色谱仪中，采用十八烷基硅烷键合硅胶填料的色谱柱及流动相梯度洗脱方法进行分离检测；流动相流速为1.2-1.4ml/min；
2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述分离检测过程中，所述流动相a为醋酸铵高氯酸钠溶液-乙腈，流动相b为高氯酸钠溶液-乙腈-甲醇。
3.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于，所述分离检测过程中，所述流动相a中，醋酸铵高氯酸钠溶液与乙腈的体积比为（88-92）:（8-12）；所述流动相b中，高氯酸钠溶液、乙腈、甲醇的体积比为（40-60）:（...
【专利技术属性】
技术研发人员：高焕焕，
申请(专利权)人：华夏生生药业北京有限公司，
类型：发明
国别省市：
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