一种快速ELISA检测方法技术

本发明专利技术公开了一种快速ELISA检测方法，属于免疫检测技术领域，包括如下步骤：向96孔聚苯乙烯板每孔中加入抗原稀释液，37℃孵育1h，弃去孔内溶液，重复洗涤三次；向每孔中加入质量分数为1‑3％的BSA溶液进行封闭；弃去孔内溶液，洗涤，向每孔中加入HRP标记的抗体稀释液，进行超声波干预10‑30min；弃去孔内溶液，重复洗涤三次，向每孔中加入TMB底物溶液避光显色；向每孔中加入硫酸溶液进行终止反应；采用酶标仪读取波长为450nM时的OD值，记录数据。本发明专利技术利用超声波干预抗原、抗体反应，提高了抗原、抗体反应速率，可将反应时间由常规的1‑2h缩短至10‑30min。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于免疫检测，具体涉及一种快速elisa检测方法。

技术介绍

1、elisa(酶联免疫吸附试验)是将抗原或抗体结合在固相载体表面，利用抗原抗体的特异性结合以及抗体或者抗原上标记的酶催化特定底物发生显色反应，实现目标物检测的免疫分析方法。

2、elisa可用于测定抗原，也可用于测定抗体，其技术原理如下：首先将已知的抗体或抗原结合在某种固相载体上，并保持其免疫活性；测定时，将待检样本和酶标抗原或抗体按不同步骤与固相载体表面吸附的抗体或抗原发生反应。然后用洗涤的方法分离抗原-抗体复合物和游离成分；最后加入酶的作用底物催化显色，进行定性或定量。但是elisa检测步骤中抗原、抗体反应是一个限速步骤，通常需要1-2h，检测效率较低。

技术实现思路

1、本专利技术的目的在于提供一种快速elisa检测方法，以解决以下技术问题：提高elisa检测步骤中抗原、抗体反应速率，进而提高检测效率。

2、本专利技术的目的可以通过以下技术方案实现：

3、一种快速elisa检测方法，包括如下步骤本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种快速ELISA检测方法，其特征在于，包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的一种快速ELISA检测方法，其特征在于，所述抗原稀释液包括如下步骤制备：采用pH为9.6的碳酸盐包被缓冲液将抗原浓度稀释至1μg/mL，得抗原稀释液。

3.根据权利要求1所述的一种快速ELISA检测方法，其特征在于，所述pH为9.6的碳酸盐包被缓冲液包括如下成分：15mM的Na2CO3、35mM的NaHCO3。

4.根据权利要求1所述的一种快速ELISA检测方法，其特征在于，步骤一、三、四所述洗涤缓冲液TBST包括如下成分：2mM的KH2PO4、137mM的NaCl、1...

【技术特征摘要】

1.一种快速elisa检测方法，其特征在于，包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的一种快速elisa检测方法，其特征在于，所述抗原稀释液包括如下步骤制备：采用ph为9.6的碳酸盐包被缓冲液将抗原浓度稀释至1μg/ml，得抗原稀释液。

3.根据权利要求1所述的一种快速elisa检测方法，其特征在于，所述ph为9.6的碳酸盐包被缓冲液包括如下成分：15mm的na2co3、35mm的nahco3。

4.根据权利要求1所述的一种快速elisa检测方法，其特征在于，步骤一、三、四所述洗涤缓冲液tbst包...

【专利技术属性】
技术研发人员：张磊，缪连军，张志鹏，朱家雨，
申请(专利权)人：安徽环球基因科技有限公司，
类型：发明
国别省市：