一种高氨解程度的引物合成方法技术

本发明专利技术公开了一种高氨解程度的引物合成方法，属于生物工程技术领域，包括如下步骤：第一步、合成引物：在固相载体上完成引物的合成，得到引物粗产物；第二步、氨解反应：将含有引物粗产物的固相载体放入氨解液中，经过氨解反应把引物粗产物从固相载体上切割下来，并脱掉引物上的保护基团；第三步、纯化引物；上述氨解液，包括碱性溶液、三‑(2‑氨基乙基)胺和甲醇。本发明专利技术中使用的氨解液，具有高活性和稳定性，避免了氨水氨解过程中微量物质的残留和污染，也将引物破坏降到了最低程度，进一步改善了引物品质。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物工程，具体涉及一种高氨解程度的引物合成方法。

技术介绍

1、引物合成是分子生物学中一个重要的技术步骤，常用于各种实验和应用，特别是聚合酶链反应(pcr)等。引物是一些短的dna片段，它们在pcr过程中的特定温度下与目标dna序列的互补区域配对，从而在dna复制过程中引导dna聚合酶合成新的dna链。引物合成后需要在氨的碱性条件下进行裂解，以去除碱基上的保护基团以及使合成的引物从固相载体上切割下来，得到合成的引物。常常使用新鲜的浓氨水来裂解孔径可控玻璃微球(cpg)上连接化合物与初始核苷间的酯键。氨解过程是引物合成的一个重要环节，是影响引物产物质量、产量与纯度的重要因素。

2、但是，在现有技术中，使用饱和氨水进行氨解时，通常需要很长一段时间，并且随着反应时间的增加，氨水溶液容易挥发，导致操作复杂，整体耗时较长；采用微波氨解时，反应中碱的容易消耗，导致了反应体系中oh-离子浓度降低，从而使反应无法进一步进行。

技术实现思路

1、本专利技术的目的在于提供一种高氨解程度的引物合成方法，以本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种高氨解程度的引物合成方法，其特征在于，包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的一种高氨解程度的引物合成方法，其特征在于，碱性溶液、三-(2-氨基乙基)胺和甲醇的用量体积比为1.3-2：2：10。

3.根据权利要求1所述的一种高氨解程度的引物合成方法，其特征在于，碱性溶液为NaOH溶液、KOH溶液、Mg(OH)2溶液和Ca(OH)2溶液中的一种；其中碱性溶液的浓度为1-2M。

4.根据权利要求1所述的一种高氨解程度的引物合成方法，其特征在于，三-(2-氨基乙基)胺通过如下步骤制备：

5.根据权利要求4所述的一种高氨解程度的引物合成方法...

【技术特征摘要】

1.一种高氨解程度的引物合成方法，其特征在于，包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的一种高氨解程度的引物合成方法，其特征在于，碱性溶液、三-(2-氨基乙基)胺和甲醇的用量体积比为1.3-2：2：10。

3.根据权利要求1所述的一种高氨解程度的引物合成方法，其特征在于，碱性溶液为naoh溶液、koh溶液、mg(oh)2溶液和ca(oh)2溶液中的一种；其中碱性溶液的浓度为1-2m。

4.根据权利要求1所述的一种高氨解程度的引物合成方法，其特征在于，三-(2-氨基乙基)胺通过如下步骤制备：

5.根据权利要求4所述的一种高...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘宗文，雍金贵，刘奇，高恩，潘红，黄贤华，
申请(专利权)人：通用生物安徽股份有限公司，
类型：发明
国别省市：