System.ArgumentOutOfRangeException: 索引和长度必须引用该字符串内的位置。 参数名: length 在 System.String.Substring(Int32 startIndex, Int32 length) 在 zhuanliShow.Bind() 一种鉴定人源细胞和小鼠源细胞的方法技术_技高网

一种鉴定人源细胞和小鼠源细胞的方法技术

技术编号:41311702 阅读:3 留言:0更新日期:2024-05-13 14:54
本发明专利技术公开了一种鉴定人源细胞和小鼠源细胞的方法,属于基因检测技术领域,采用市售基因组DNA提取试剂盒获取待鉴定细胞的基因组DNA;分别筛选6个小鼠源细胞STR位点和6个人源细胞的STR位点,根据STR位点设计引物,将基因组DNA进行PCR扩增;通过对小鼠源细胞和人源细胞的STR位点进行筛选,设计出带有荧光标记的正向引物和正常的SSR反向引物,从而对待筛选细胞的基因组DNA进行PCR扩增,通过凝胶电泳条带分布和STR位点的峰的判断,便于准确、直观的判断待检测细胞的来源;如果其中一个位点出现两个等位基因峰,还可判断待检测细胞存在污染,从而有助于试验研究的顺利进行。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于基因检测,具体涉及一种鉴定人源细胞和小鼠源细胞的方法


技术介绍

1、细胞作为一种独特的产品,具有自我复制的能力,使得商家有可能进行自行复制后再销售。实验室经常用人源细胞和小鼠源细胞,可以用于制造疫苗,例如流感疫苗和covid-19疫苗。研究人员可以使用这些细胞来生产病毒蛋白,并将其注入动物模型进行动物试验;还可以使用这些细胞来创建三维肿瘤模型,以便更好地理解肿瘤的行为和生长方式。此外,这些细胞也可用于开发抗癌药物,以及对已有的药物进行筛选和测试。总之,人源细胞和小鼠源细胞在实验室中具有广泛的应用价值,对于疾病的研究和治疗具有重要意义。

2、然而,在实验室中,小鼠细胞系的使用频率紧随人源细胞之后,两种来源的细胞难免发生交叉污染的问题,如细胞传代的次数、培养环境的控制以及潜在的交叉污染等,这些都难以得到确切的保障。确保细胞的来源对于实验研究的成功至关重要。


技术实现思路

1、本专利技术的目的在于提供一种鉴定人源细胞和小鼠源细胞的方法,通过str技术解决人源细胞和小鼠源细胞难以鉴定的问题。

2、本专利技术的目的可以通过以下技术方案实现:

3、一种鉴定人源细胞和小鼠源细胞的方法,包括如下步骤:

4、步骤一:采用市售基因组dna提取试剂盒获取待鉴定细胞的基因组dna;

5、步骤二:分别筛选6个小鼠源细胞str位点和6个人源细胞的str位点,根据str位点设计引物,将基因组dna进行pcr扩增;

6、步骤三:将pcr产物进行电泳分析和数据分析,根据凝胶电泳条带分布和str位点的峰判断待鉴定细胞的来源。

7、进一步地,荧光标记为fam、hex、tamra和rox中的任意一种。

8、进一步地,引物带荧光标记的正向引物和正常的ssr反向引物。

9、进一步地,6个小鼠源细胞str位点为2-3、4-2、5-5、8-1、11-2和13-2。

10、进一步地,2-3的正向引物的序列如seq id no:1所示,ssr反向引物的序列如seqid no:2所示;

11、4-2的正向引物的序列如seq id no:3所示,ssr反向引物的序列如seq id no:4所示;

12、5-5的正向引物的序列如seq id no:5所示,ssr反向引物的序列如seq id no:6所示;

13、8-1的正向引物的序列如seq id no:7所示,ssr反向引物的序列如seq id no:8所示;

14、11-2的正向引物的序列如seq id no:9所示,ssr反向引物的序列如seq id no:10所示;

15、13-2的正向引物的序列如seq id no:11所示,ssr反向引物的序列如seq id no:12所示;

16、进一步地,6个人源细胞的str位点为d21s11、d2s1138、d3s1358、d5s818、d7s820和d8s1179。

17、进一步地,d21s11的正向引物的序列如seq id no:13所示,ssr反向引物的序列如seq id no:14所示;

18、d2s1138的正向引物的序列如seq id no:15所示,ssr反向引物的序列如seq idno:16所示;

19、d3s1358的正向引物的序列如seq id no:17所示,ssr反向引物的序列如seq idno:18所示;

20、d5s818的正向引物的序列如seq id no:19所示,ssr反向引物的序列如seq idno:20所示;

21、d7s820的正向引物的序列如seq id no:21所示,ssr反向引物的序列如seq idno:22所示;

22、d8s1179的正向引物的序列如seq id no:23所示,ssr反向引物的序列如seq idno:24所示。

23、本专利技术的有益效果:

24、本专利技术鉴定人源细胞和小鼠源细胞的方法,通过对小鼠源细胞和人源细胞的str位点进行筛选,设计出带有荧光标记的正向引物和正常的ssr反向引物,从而对待筛选细胞的基因组dna进行pcr扩增,通过凝胶电泳条带分布和str位点的峰的判断,便于准确、直观的判断待检测细胞的来源;如果其中一个位点出现两个等位基因峰,还可判断待检测细胞存在污染,从而有助于试验研究的顺利进行。

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【技术保护点】

1.一种鉴定人源细胞和小鼠源细胞的方法,其特征在于,包括如下步骤:

2.根据权利要求1所述的一种鉴定人源细胞和小鼠源细胞的方法,其特征在于,所述引物为带荧光标记的正向引物和正常的SSR反向引物。

3.根据权利要求2所述的一种鉴定人源细胞和小鼠源细胞的方法,其特征在于,所述荧光标记为FAM、HEX、TAMRA和ROX中的任意一种。

4.根据权利要求2所述的一种鉴定人源细胞和小鼠源细胞的方法,其特征在于,6个小鼠源细胞STR位点为2-3、4-2、5-5、8-1、11-2和13-2。

5.根据权利要求2所述的一种鉴定人源细胞和小鼠源细胞的方法,其特征在于,6个人源细胞的STR位点为D21 S11、D2S1138、D3S1358、D5S818、D7S820和D8S1179。

6.根据权利要求4所述的一种鉴定人源细胞和小鼠源细胞的方法,其特征在于,2-3的正向引物的序列如SEQ ID NO:1所示,SSR反向引物的序列如SEQ ID NO:2所示;

7.根据权利要求5所述的一种鉴定人源细胞和小鼠源细胞的方法,其特征在于,D21S11的正向引物的序列如SEQ ID NO:13所示,SSR反向引物的序列如SEQ ID NO:14所示;

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【技术特征摘要】

1.一种鉴定人源细胞和小鼠源细胞的方法,其特征在于,包括如下步骤:

2.根据权利要求1所述的一种鉴定人源细胞和小鼠源细胞的方法,其特征在于,所述引物为带荧光标记的正向引物和正常的ssr反向引物。

3.根据权利要求2所述的一种鉴定人源细胞和小鼠源细胞的方法,其特征在于,所述荧光标记为fam、hex、tamra和rox中的任意一种。

4.根据权利要求2所述的一种鉴定人源细胞和小鼠源细胞的方法,其特征在于,6个小鼠源细胞str位点为2-3、4-2、5-5、8-1、11-2和13-2。

5.根据权利要求2所述...

【专利技术属性】
技术研发人员:雍金贵彭建军何青周淮玉郑宏玲
申请(专利权)人:通用生物安徽股份有限公司
类型:发明
国别省市:

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