【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于琼脂凝胶介质，具体涉及一种琼脂糖凝胶及其制备方法。
技术介绍
1、琼脂糖凝胶是以琼脂糖为支持介质制备的凝胶，具有良好的亲水性、生物相容性且分子上富含羟基，在生物大分子的分离纯化中有重要作用。
2、琼脂糖是多糖类层析介质中应用最广的一种，现有的琼脂糖凝胶材料的机械强度不高，并且蛋白载量低，为提高琼脂糖的载量和分离识别效率，可以通过增加凝胶材料的孔隙率的方式提高层析琼脂糖性能和分离效率。例如专利cn1472002a公开了一种高容量大孔琼脂糖凝胶介质的制备方法，通过加入碳酸钙作为致孔剂，实现介孔孔径和孔隙率的控制，提高了凝胶介质的孔隙率，虽然增加孔隙率有利于降低传质阻力，提高识别效率，但在高流速，以及大体系的分散情况下，削弱了琼脂糖凝胶高孔隙率的吸附量优势，也会影响琼脂糖凝胶材料的机械强度。
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提供一种琼脂糖凝胶及其制备方法，以解决在高流速，以及大体系的分散情况下琼脂糖凝胶吸附差的问题。
2、本专利技术的目的可以通过以下技术方案实现：
3、一种琼脂糖凝胶的制备方法，包括如下步骤：
4、第一步、将氨基化琼脂糖和水混合得到第一混合液，将氧化琼脂糖和水混合得到第二混合液，在温度为20±5℃条件下，将第二混合液滴加到第一混合液中，搅拌分散后，得到凝胶液，氨基化琼脂糖和氧化琼脂糖的质量比为1.8-2：1；
5、第二步、在机械搅拌条件下，将凝胶液经过加压通过的疏水性微孔滴加到油相中，形成乳液
6、作为本专利技术的一种优选技术方案，所述油相包括液体石蜡、石油醚和油溶性乳化剂，液体石蜡和石油醚的体积比7：5；油溶性乳化剂选择乳化剂op-5，油溶性乳化剂的添加量为油相总质量的5％。
7、作为本专利技术的一种优选技术方案，第一混合液中氨基化琼脂糖和水的1-2：50；第二混合液中氧化琼脂糖和水的质量比为1-2：50。
8、作为本专利技术的一种优选技术方案，氧化琼脂糖通过如下步骤制备：
9、将1g琼脂糖加入50ml水中，加热溶解，然后加入1ml双氧水进行氧化处理，氧化结束后，用乙醇提取，冷冻干燥，得到氧化琼脂糖。
10、作为本专利技术的一种优选技术方案，所述氨基化琼脂糖通过如下步骤制备：
11、将n,n'-羰基二咪唑溶解在二甲基亚砜中，然后加入琼脂糖溶液，在温度为20-30℃条件下加入端氨基超支化聚酰胺，搅拌反应24h，反应结束后，经过冷冻干燥，得到氨基化琼脂糖。利用n,n′-羰基二咪唑活化琼脂糖，使琼脂糖与端氨基超支化聚酰胺上的氨基充分反应。
12、作为本专利技术的一种优选技术方案，琼脂糖溶液的质量分数为10％，n,n'-羰基二咪唑、琼脂糖溶液、端氨基超支化聚酰胺的用量质量比为0.2：40：3。
13、作为本专利技术的一种优选技术方案，所述端氨基超支化聚酰胺通过如下步骤制备：
14、将多氨基单体和无水甲醇混合，缓慢滴加丙烯酸甲酯，在温度为30℃条件下搅拌反应24h，然后升温反应：升温至60℃反应3h，升温至90℃反应3h，升温至120℃反应3h，向得到的反应液中加入乙醚，搅拌分散后静置沉淀，保留下层粘稠液体，经过旋蒸干燥，得到端氨基超支化聚酰胺；多氨基单体和丙烯酸甲酯的用量摩尔比为1：2。
15、作为本专利技术的一种优选技术方案，多氨基单体包括三乙烯四胺、四乙烯五胺中的一种。
16、一种琼脂糖凝胶由上述制备方法制备得到。
17、本专利技术的有益效果：
18、本专利技术提供了一种琼脂糖凝胶及其制备方法，以氨基化琼脂糖和氧化琼脂糖为主要原料制备得到，本专利技术制备的样品受液体的阻滞作用相对较小，在高流速，以及大体系的分散情况下，可以维持琼脂糖凝胶高孔隙率的吸附量优势。提高琼脂糖凝胶的吸附量，实现快速识别平衡，以及大颗粒低柱压和易于大体系操作等优势，在生物领域的下游技术应用具有广阔的前景。
19、本专利技术在制备琼脂糖凝胶的过程中选用氨基化琼脂糖，该氨基化琼脂糖以端氨基超支化聚酰胺接枝琼脂糖得到，作为非线性分子，端氨基超支化聚酰胺的树状结构的引入一方面有利于提高氨基化琼脂糖的分散效果，另一方面，端氨基超支化聚酰胺的引入有利于增加制备的琼脂糖凝胶的吸附容量，满足更高吸附分离需求。
20、本专利技术中在制备琼脂糖凝胶的过程中选用氧化琼脂糖，不需要额外添加交联剂，并且氧化琼脂糖与氨基化琼脂糖之间可以形成动态的席夫碱结构满足琼脂糖凝胶的自愈合性，拓宽了琼脂糖凝胶的应用领域。
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1.一种琼脂糖凝胶的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的一种琼脂糖凝胶的制备方法，其特征在于，所述油相包括液体石蜡、石油醚和油溶性乳化剂，液体石蜡和石油醚的体积比7：5；油溶性乳化剂的添加量为油相总质量的5％。
3.根据权利要求1所述的一种琼脂糖凝胶的制备方法，其特征在于，第一混合液中氨基化琼脂糖和水的1-2：50；第二混合液中氧化琼脂糖和水的质量比为1-2：50。
4.根据权利要求1所述的一种琼脂糖凝胶的制备方法，其特征在于，所述洗涤为依次经过石油醚、乙醇及蒸馏水洗涤。
5.根据权利要求1所述的一种琼脂糖凝胶的制备方法，其特征在于，氧化琼脂糖通过如下步骤制备：
6.根据权利要求1所述的一种琼脂糖凝胶的制备方法，其特征在于，所述氨基化琼脂糖通过如下步骤制备：
7.根据权利要求1所述的一种琼脂糖凝胶的制备方法，其特征在于，琼脂糖溶液的质量分数为10％，N,N'-羰基二咪唑、琼脂糖溶液、端氨基超支化聚酰胺的用量质量比为0.2：40：3。
8.根据权利要求6所述的一种琼脂糖凝胶
9.根据权利要求8所述的一种琼脂糖凝胶的制备方法，其特征在于，所述多氨基单体包括三乙烯四胺、四乙烯五胺中的一种。
10.一种琼脂糖凝胶，其特征在于，由权利要求1-9任意一项所述的制备方法制备得到。
...【技术特征摘要】
1.一种琼脂糖凝胶的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的一种琼脂糖凝胶的制备方法，其特征在于，所述油相包括液体石蜡、石油醚和油溶性乳化剂，液体石蜡和石油醚的体积比7：5；油溶性乳化剂的添加量为油相总质量的5％。
3.根据权利要求1所述的一种琼脂糖凝胶的制备方法，其特征在于，第一混合液中氨基化琼脂糖和水的1-2：50；第二混合液中氧化琼脂糖和水的质量比为1-2：50。
4.根据权利要求1所述的一种琼脂糖凝胶的制备方法，其特征在于，所述洗涤为依次经过石油醚、乙醇及蒸馏水洗涤。
5.根据权利要求1所述的一种琼脂糖凝胶的制备方法，其特征在于，氧化琼脂糖通过如下步骤制备...
【专利技术属性】
技术研发人员：雍金贵，彭建军，何青，周淮玉，王凯，
申请(专利权)人：通用生物安徽股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
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