【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物医药，尤其涉及一种重组靶向补体调节蛋白在治疗肾损伤中的用途。
技术介绍
1、横纹肌溶解症(rm)的是由骨骼肌分解、肌肉细胞胞浆物质，如肌酸磷酸激酶(ck)，乳酸脱氢酶(ldh)、肌红蛋白、电解质等释放到循环系统中导致的一系列综合征。横纹肌溶解可以引起血清肌酶的无症状升高，也可导致威胁生命的电解质失衡和急性肾损伤(aki)。在战争及自然灾害的情况下，外伤引起的横纹肌溶解症发生率非常高，而aki是rm最严重的并发症，约一半的rm患者并发aki(riaki)，rm约占aki病例的8％至15％，其死亡率约为5-8％，严重或反复发生riaki的患者，进入慢性肾病(ckd)和终末期肾病(esrd)的概率将会大大增加，是造成战斗减员的重要原因。
2、riaki的发病机制包括多个方面：1)从受损肌肉释放的肌红蛋白沉积在近端肾小管细胞中，含铁血红素引起亚铁释放和过氧化损伤肾小管上皮细胞；2)肌红蛋白管型形成，阻塞肾小管；3)肌红蛋白清除no诱导肾血管收缩，加重肾灌注不足。上述损伤因素能够继发性活化一系列炎症信号通路、凋亡信号通路，释放大量的细胞因子，趋化免疫细胞，造成肾组织的损伤。在riaki继发性的免疫炎症损伤中，补体系统扮演了重要的角色，既能够直接造成组织细胞的损伤裂解，又能够通过趋化和活化适应性免疫细胞，引发更严重的组织损伤。
3、目前，对于riaki的治疗包括传统的水化、碱化尿液，加快肌红蛋白的排泄，减少管型形成，以及出现急性肾功能衰竭情况下的血液净化治疗，这些疗法能够从一定程度上缓解rm后发生肾
4、补体系统由约50种可溶性蛋白以及膜蛋白组成，是固有免疫系统的组成成分，与炎症反应密切相关。以往研究表明，补体活化在aki缺血再灌注损伤(iri)中发挥重要作用，是引发肾脏炎症反应造成组织损伤的重要环节。补体活化有三种途径：经典途径、旁路途径、凝集素途径。补体系统中存在补体天然调节蛋白mcp，能够降解活化的补体成分，保持补体系统的稳态，在肾脏中炎症反应的程度取决于补体活化和调节过程的动态平衡。
5、crry(complement receptor-related gene y)是啮齿类动物中mcp的同源蛋白，表达于小管上皮细胞的基底侧，动物实验表明，小鼠肾小管上皮细胞crry的缺失，能够活化补体替代途径，从而激活下游的炎症反应，引发肾小管上皮细胞损伤及aki。在aki大鼠模型中，肾小管上皮细胞受损，crry表达水平降低，导致补体替代途径的活化，引起炎症反应和组织损伤，造成肾脏功能丢失。由此可见，提高肾小管上皮细胞的补体调节蛋白crry的表达水平，有利于降解局部活化的补体成分，阻断补体级联反应，保护肾小管上皮细胞免受继发炎症损伤及肾功能损害，可以作为治疗riaki的有效策略。
技术实现思路
1、为了实现肾损伤的特异性抑制，本专利技术提供了一种新型重组靶向补体调节蛋白在治疗肾损伤中的用途。
2、第一方面，本专利技术提供一种靶向补体调节蛋白，所述靶向补体调节蛋白的编码基因包括，多肽3r5序列和crry胞外结构域的cdna序列，由linker基因连接所述多肽3r5序列和crry胞外结构域的cdna序列；多肽3r5的氨基酸序列如seq id no.1所示，cnwminkec。
3、针对靶向多肽的选择，本领域通常选择补体受体(cr2)作为靶向多肽，来确保补体调节蛋白会作用在补体上，但是补体通路涉及的器官比较多，选择补体受体作为靶向多肽，会导致所提供的补体抑制剂将作用于全身器官，容易引起感染等并发症。
4、肾脏损伤分子-1(kim-1)是表达在近端肾小管细胞表面的一种膜蛋白，在损伤后的肾小管上皮细胞特异表达，可作为肾小管损伤的生物标志物。本专利技术以特异性靶向肾脏损伤分子-1(kim-1)的多肽3r5作为靶向多肽，3r5特异性结合受损的肾小管上皮细胞，并通过内源性补体调节蛋白crry降解活化的补体c3bbb复合物，从而减少补体活化继发的免疫炎症反应对于肾小管细胞的损伤。本专利技术还发现不同的靶向多肽所起到的特异性靶向效果不同。
5、在本专利技术提供的靶向补体调节蛋白中，所述crry胞外结构域的cdna序列如seq idno.3所示。
6、在本专利技术提供的靶向补体调节蛋白中，所述靶向补体调节蛋白的编码基因如seqid no.4所示。
7、在本专利技术提供的靶向补体调节蛋白中，所述靶向补体调节蛋白的氨基酸序列如seq id no.5所示。
8、本专利技术将靶向损伤肾小管上皮细胞的多肽3r5与内源性补体调节蛋白crry的胞外段融合表达，构建一种新型的重组靶向补体调节蛋白3r5-crry。该蛋白通过3r5特异性结合受损的肾小管上皮细胞，并通过内源性靶向补体调节蛋白crry降解活化的补体c3bbb复合物，从而减少补体活化继发的免疫炎症反应对于肾小管细胞的损伤，减少横纹肌溶解导致的aki，最大程度保存肾脏功能，降低死亡率。本专利技术通过靶向kim-1的多肽，将内源性靶向补体调节蛋白crry运载到受损的肾小管部位，抑制肾脏局部补体的活化，减少对全身补体系统的抑制，减少感染等并发症的发生。同时，由于发挥补体降解功能的结构域为内源性蛋白，能够最大限度的避免免疫原性反应等不良反应的发生，提高治疗效率。
9、第二方面，本专利技术还提供上述的靶向补体调节蛋白在制备补体抑制剂中的应用。
10、第三方面，本专利技术提供一种补体抑制剂，含有上述的靶向补体调节蛋白。
11、第四方面，本专利技术提供上述的靶向补体调节蛋白或上述补体抑制剂在制备肾损伤治疗药物中的应用。
12、在本专利技术提供的应用中，所述肾损伤为急性肾损伤，优选地，所述肾损伤为横纹肌溶解所致急性肾损伤。
13、第五方面，本专利技术提供一种肾损伤治疗药物，含有上述的靶向补体调节蛋白。
14、本专利技术所提供的肾损伤治疗药物还包括药学上可接受的载体。
15、本专利技术的有益效果在于：
16、本专利技术首次提出针对肾损伤的特异性补体抑制剂，本专利技术所提供的靶向性补体调节蛋白3r5/crry通过阻断c3活化级联反应、下调后续炎症反应，明显减轻肾脏损伤，最大程度保存肾脏功能，降低死亡率。同时，通过利用肾脏的靶向多肽及内源性补体灭活蛋白，极大减少感染、免疫原性等不良反应的发生，提高安全性及治疗效率。
17、本专利技术为补体在ri-aki中的核心作用提供了进一步的证据，强调早期靶向治疗在减轻肾损伤、降低死亡率中的重要性，具有肾脏靶向性的特点，机制明确，为横纹肌溶解导致的aki治疗药物提供了新选择，有望改善横纹肌溶解急性肾损伤缺乏特异性干预手段的现状。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种靶向补体调节蛋白，其特征在于，所述靶向补体调节蛋白的编码基因包括，多肽3R5序列和Crry胞外结构域的cDNA序列，由linker基因连接所述多肽3R5序列和Crry胞外结构域的cDNA序列；多肽3R5的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
2.根据权利要求1所述的靶向补体调节蛋白，其特征在于，所述Crry胞外结构域的cDNA序列如SEQ ID NO.3所示。
3.根据权利要求1-2任一项所述的靶向补体调节蛋白，其特征在于，所述靶向补体调节蛋白的编码基因如SEQ ID NO.4所示。
4.根据权利要求3所述的靶向补体调节蛋白，其特征在于，所述靶向补体调节蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.5所示。
5.权利要求1-4任一项所述的靶向补体调节蛋白在制备补体抑制剂中的应用。
6.一种补体抑制剂，其特征在于，含有权利要求1-4任一项所述的靶向补体调节蛋白。
7.权利要求1-4任一项所述的靶向补体调节蛋白或权利要求6所述的补体抑制剂在制备肾损伤治疗药物中的应用。
8.根据权利要求7所述的应用
9.一种肾损伤治疗药物，其特征在于，含有权利要求1-4任一项所述的靶向补体调节蛋白。
10.根据权利要求9所述的药物，其特征在于，所述药物还包括药学上可接受的载体。
...【技术特征摘要】
1.一种靶向补体调节蛋白，其特征在于，所述靶向补体调节蛋白的编码基因包括，多肽3r5序列和crry胞外结构域的cdna序列，由linker基因连接所述多肽3r5序列和crry胞外结构域的cdna序列；多肽3r5的氨基酸序列如seq id no.1所示。
2.根据权利要求1所述的靶向补体调节蛋白，其特征在于，所述crry胞外结构域的cdna序列如seq id no.3所示。
3.根据权利要求1-2任一项所述的靶向补体调节蛋白，其特征在于，所述靶向补体调节蛋白的编码基因如seq id no.4所示。
4.根据权利要求3所述的靶向补体调节蛋白，其特征在于，所述靶向补体调节蛋白的氨基酸序列如seq ...
【专利技术属性】
技术研发人员：欧阳清，张利，陈香美，蔡广研，王超，张健，王旭，
申请(专利权)人：中国人民解放军总医院第一医学中心，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。